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1、吸氧预处理诱导的大鼠脑内Fos表达论文张西京，熊利泽，王曦，胡文能【关键词】氧疗【Abstract】AIM:Toinvestigateictoleranceinducedbyoxygeninhalingpreconditioning.METHODS:SDratslydividedinto2groups:oxygeninhalingpreconditioninggroupandcontrolgroup(n=6each).TheratsinoxygeninhalingpreconditioninggroupinhaledPureoxyenfor24h,alsinhaled210mLL-1P
2、ureoxgenfor24h.24hafterthetreatment,alltheratsovedout.TheFosexpressioninratbrainmunohistochemistrymethodandthedifferencebetilar.Hoa,lateralparabranchialnucleus,caudalpartofspinalnucleusof5thnerve,ventroltegmentalnucleus,periaqueductalnucleus,supramammillarynucleus,supraopticnucleus,hippocampus,s
3、ubiculum,.freelygdaloidnucleus,anteriorcorticalamygdaloidnucleus,lateralseptalnucleus,bednucleusofstriaterminalis,globuspallidus,Callejaisland,occipitalcortex,retrosplenialcortex,parietalcortex,forelimbandhindlimbareaofcortex,andfrontalcortex.CONCLUSION:Somenucleicanbeactivatedbyoxygeninhalingpr
4、econditioning.Oncogenecfosisinvolvedintheregulationofthebrainischemictoleranceinducedbyoxygeninhalingpreconditioning.【KeyLL-1O224h.24h后经心灌流、取脑；用免疫组化法观察Fos蛋白在大鼠脑内的表达，比较两组大鼠的表达差异.结果：Fos样免疫反应阳性神经元在脑内分布广泛，两组动物脑内的Fos阳性细胞的分布模式非常相似.但吸氧预处理的大鼠脑内许多脑区Fos表达明显增多、增强.结论：吸氧预处理可激活脑内的一些核团；原癌基因cfos参与了对吸氧预处理诱导脑缺血耐受
5、的调节.【关键词】氧疗；预处理；基因，fos；大鼠；脑0引言自1990年Kitagagkg-1）腹腔内注射，麻醉后开胸，经心脏灌注，先用9gL-1生理盐水100mL冲净血液，然后用预冷的40gL-1多聚甲醛固定液400mL灌注，先快灌200mL，继之慢灌200mL.灌注完毕，取出全脑，40gL-1多聚甲醛后固定2h后，将脑放入200gL-1蔗糖溶液，4℃过夜.组织块完全沉底后用冰冻切片机连续冠状切片，隔4取1，片厚50μm.1.2.2免疫组织化学染色将脑片经10mmolL-1PBS漂洗，浸入800mLL-1甲醇和3mLL-1过氧化氢封闭30min，10gL-1牛血清白蛋白、30mLL-
6、1羊血清和3gL-1TritonX100封闭1h，用ABC方法进行免疫组化染色：首先将脑片浸入兔抗Fos抗体（1∶3000，SantaCruzTec.），室温24h；10mmolL-1PBS漂洗10min×3次；再入生物素化的抗兔IgG抗体，室温4h；10mmolL-1PBS漂洗10min×3次；最后入生物素卵白素辣根过氧化物酶复合物（ABC,1∶500，Sigma公司），室温2h，10mmolL-1PBS漂洗10min×3次.用硫酸镍铵加强的DAB蓝色反应法进行呈色反应，当阳性产物呈深蓝色而背底几乎无色时终止反应，贴片，梯度脱水、透明、封片，光镜下观察.利用图像分析仪（Quantim
7、et57℃，Leica公司）计数.部分切片用做免疫组化方法对照实验，一抗用牛血清白蛋白稀释液替代.二抗、ABC复合物同其他免疫组化反应切片，结果未见阳性结构.统计学处理：各核团Fos阳性细胞数用x±s表示，当方差齐时，两组均数的比较用t检验；当方差不齐时，两组均数的比较用近似法t′检验.2结果对两组大鼠从延髓尾端到端脑的全脑切片进行了观察，Fos样免疫反应阳性神经元在脑内分布广泛，两组动物脑内的Fos阳性细胞的分布模式非常相似，主要有以下诸核团
