吸氧预处理诱导的大鼠脑内fos表达

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1、吸氧预处理诱导的大鼠脑内Fos表达:张西京,熊利泽,王曦,胡文能【关键词】氧疗  【Abstract】AIM:Toinvestigateictoleranceinducedbyoxygeninhalingpreconditioning.METHODS:SDratslydividedinto2groups:oxygeninhalingpreconditioninggroupandcontrolgroup(n=6each).TheratsinoxygeninhalingpreconditioninggroupinhaledPureoxyenfor24h,alsinhaled210

2、mL・L-1Pureoxgenfor24h.24hafterthetreatment,alltheratsovedout.TheFosexpressioninratbrainmunohistochemistrymethodandthedifferencebetilar.Hoa,lateralparabranchialnucleus,caudalpartofspinalnucleusof5thnerve,ventroltegmentalnucleus,periaqueductalnucleus,supramammillarynucleus,supraopticnu

3、cleus,hippocampus,subiculum,posterolateralcorticalamygdaloidnucleus,anteriorcorticalamygdaloidnucleus,lateralseptalnucleus,bednucleusofstriaterminalis,globuspallidus,Callejaisland,occipitalcortex,retrosplenialcortex,parietalcortex,forelimbandhindlimbareaofcortex,andfrontalcortex.CONCLUSION:

4、Somenucleicanbeactivatedbyoxygeninhalingpreconditioning.Oncogenecfosisinvolvedintheregulationofthebrainischemictoleranceinducedbyoxygeninhalingpreconditioning.  【KeyL・L-1O224h.24h后经心灌流、取脑;用免疫组化法观察Fos蛋白在大鼠脑内的表达,比较两组大鼠的表达差异.结果:Fos样免疫反应阳性神经元在脑内分布广泛,两组动物脑内的Fos阳性细胞的分布模式非常相似.但吸氧预处理的大鼠脑内许多脑

5、区Fos表达明显增多、增强.结论:吸氧预处理可激活脑内的一些核团;原癌基因cfos参与了对吸氧预处理诱导脑缺血耐受的调节.  【关键词】氧疗;预处理;基因,fos;大鼠;脑  0引言  自1990年Kitagag・kg-1)腹腔内注射,麻醉后开胸,经心脏灌注,先用9g・L-1生理盐水100mL冲净血液,然后用预冷的40g・L-1多聚甲醛固定液400mL灌注,先快灌200mL,继之慢灌200mL.灌注完毕,取出全脑,40g・L-1多聚甲醛后固定2h后,将脑放入200g・L-1蔗糖溶液,4℃过夜.组织块完全沉底

6、后用冰冻切片机连续冠状切片,隔4取1,片厚50μm.  1.2.2免疫组织化学染色将脑片经10mmol・L-1PBS漂洗,浸入800mL・L-1甲醇和3mL・L-1过氧化氢封闭30min,10g・L-1牛血清白蛋白、30mL・L-1羊血清和3g・L-1TritonX100封闭1h,用ABC方法进行免疫组化染色:首先将脑片浸入兔抗Fos抗体(1∶3000,SantaCruzTec.),室温24h;10mmol・L-1PBS漂洗10min×3次;再入生物素化的抗兔IgG抗体,室温4h

7、;10mmol・L-1PBS漂洗10min×3次;最后入生物素卵白素辣根过氧化物酶复合物(ABC,1∶500,Sigma公司),室温2h,10mmol・L-1PBS漂洗10min×3次.用硫酸镍铵加强的DAB蓝色反应法进行呈色反应,当阳性产物呈深蓝色而背底几乎无色时终止反应,贴片,梯度脱水、透明、封片,光镜下观察.利用图像分析仪(Quantimet57℃,Leica公司)计数.部分切片用做免疫组化方法对照实验,一抗用牛血清白蛋白稀释液替代.二抗、ABC复合物同其他免疫组化反应

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