耐甲氧西林表皮葡萄球菌及耐药性检测及同源性研究

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1、耐甲氧西林表皮葡萄球菌及耐药性检测及同源性研究【摘要】目的：了解我院MRSE的检出率及耐药的特点，并对MRSE菌株的同源性进行研究。为临床合理用药和耐药菌的防治提供参考依据。方法:采用头孢西丁纸片扩散法及mecA基因PCR法检测出MRSE菌株，并对两种检测方法加以比较。结果:128株临床分离表皮葡萄球菌中，用头孢西丁纸片法及PCR法对MRSE检出率分别为79．69％(102／128)和85．16％(109／128)，两种方法对MRSE检出率差异无统计学意义。以PCR法检出mecA基因作为判断MRSE的金标准，头孢西丁纸片法灵敏度为88．07％、特异度为68．42％、符合

2、率为88．16％。MRSE对多种抗菌药物耐药显著；除对B-内酰胺类明显耐药外，对红霉素和克林霉素的耐药率均高达98．17％，结果显示部分MRSE菌株间谱型相同。结论:头孢西丁纸片法是筛选和确认MRSE菌株的一种可靠、简便的方法。MRSE为多重耐药菌株，耐药形势严峻，部分菌株间存在克隆传播现象，临床必须加强细菌耐药性监测。【关键词】耐甲氧西林表皮葡萄球菌；耐药性；抗菌药物【中图分类号】R446.61【文献标识码】A【文章编号】1007-8517(2009)10-0104-026耐甲氧西林表皮葡萄球菌及耐药性检测及同源性研究【摘要】目的：了解我院MRSE的检出率及耐药的特点

3、，并对MRSE菌株的同源性进行研究。为临床合理用药和耐药菌的防治提供参考依据。方法:采用头孢西丁纸片扩散法及mecA基因PCR法检测出MRSE菌株，并对两种检测方法加以比较。结果:128株临床分离表皮葡萄球菌中，用头孢西丁纸片法及PCR法对MRSE检出率分别为79．69％(102／128)和85．16％(109／128)，两种方法对MRSE检出率差异无统计学意义。以PCR法检出mecA基因作为判断MRSE的金标准，头孢西丁纸片法灵敏度为88．07％、特异度为68．42％、符合率为88．16％。MRSE对多种抗菌药物耐药显著；除对B-内酰胺类明显耐药外，对红霉素和克林霉素

4、的耐药率均高达98．17％，结果显示部分MRSE菌株间谱型相同。结论:头孢西丁纸片法是筛选和确认MRSE菌株的一种可靠、简便的方法。MRSE为多重耐药菌株，耐药形势严峻，部分菌株间存在克隆传播现象，临床必须加强细菌耐药性监测。【关键词】耐甲氧西林表皮葡萄球菌；耐药性；抗菌药物【中图分类号】R446.61【文献标识码】A【文章编号】1007-8517(2009)10-0104-0261资料与方法1.1标本来源128株表皮葡萄球菌均来自我院2005年1月～2007年12月间住院患者的各类送检标本，主要来源于痰(44．53％)、分泌物(15．62％)、血液(10．93%)、创

5、伤口(7．81％)等。1.2方法1.2.1头孢西丁纸片法检测MRSE参照2005年CLSI的标准进行。秤量19gM-H琼脂溶解于500ml双蒸水中，高压灭菌后，M-H琼脂冷却至50-60℃左右，倾注25ml制备药敏平皿。将培养好的细菌液体，稀释到0.5个麦氏浊度，用棉棒蘸取原菌液均匀涂布在药敏平皿上，然后贴上30ug头孢西丁纸片，在35℃下培养24小时观察结果。头孢西丁纸片法的判定标准为：抑菌环直径=24mm判定为MRSE。1.2.2mecA基因的检测根据美国临床及实验室标准协会(CLSI)标准，通过PCR方法检测出耐甲氧西林的表皮葡萄球菌(MRSE)。1.3药敏试验采

6、用K-B法，万古霉素等抗生素药敏纸片购自英国OXOID，结果按NCCLS药敏试验法规判定，质控菌株为金黄色葡萄球菌ATCC25923(敏感株)、ATCC43300(含有mecA基因的菌株)。1.4统计学处理用SPSSl1．0软件对比头孢西丁纸片扩散法和mecA，PCR法对MRSE的检出率以进行X2检验。62结果128株临床分离的表皮葡萄球菌，经mecA基因PCR法检测，MRSE检出率为85.16％(109／128)，头孢西丁纸片法对MRSE的检出率为79.69％(102／128)。两种方法的检出率无统计学差异，χ=4.366，P=0.113。以PCR方法检测mecA基因

7、(mecA基因经测序证实)作为金标准，头孢西丁纸片扩散法的灵敏度为88.07％、特异度为68.42％、符合率为88.16％。17种抗菌药物对表皮葡萄球菌的体外抗菌活性显示MRSE对多种抗菌药物耐药显著，大多数抗菌药物的耐药率均在50％以上，其中对青霉素耐药率为96．33％，对红霉素和克林霉素的耐药也很显著，耐药率均高达98．17％。MRSE对阿米卡星、利福平较为敏感，耐药率分别为21．1％、42．2％；对万古霉素、替考拉宁非常敏感，耐药率为0，见表1。3讨论表皮葡萄球菌现已成为医院感染6的重要病原菌，随着抗菌药物的广泛使用，耐药菌株不断出