园艺植物育种学实验指导书(2013.3)

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1、园艺植物育种学总论实验指导书黄桂香编著广西大学农学院园艺系2013年3月21目录实验一园艺植物花粉生活力测定(3h)…………………………………3（一）果树花粉生活力测定………………………………………………3（二）蔬菜花粉生活力测定………………………………………………6实验二、三园艺植物开花习性观察及有性杂交育种(6h)……………7（一）果树开花习性观察及有性杂交育种………………………………7（二）蔬菜开花习性观察及有性杂交育种………………………………8实验四、园艺植物品种描述及鉴别(3h)…………………………………10（一）番茄品种描述及鉴别

2、………………………………………………10（二）荔枝品种描述及鉴别………………………………………………13实验五、种胚分离培养技术(3h)…………………………………………16实验六、园艺植物选择育种(3h)…………………………………………17实验七、园艺植物品种调查及育种方案的制订(6h)……………………20实验八、园艺植物花粉单核期观察(3h)…………………………………2021实验一、园艺植物花粉发芽试验及生活力测定内容一：果树花粉发芽试验及花粉生活力测定一、目的要求练习并掌握果树花粉发芽试验及花粉生活力测定技术二、材料用具供试花粉、氯化钙、

3、硼酸、琼脂、蔗糖、凹玻片、棉花、染色瓶、蒸馏水、显微镜、计数器、天平、载玻片、盖玻片、烧杯、镊子、水浴锅、玻璃杯、玻棒、冰箱、温箱、干燥器等。联苯胺、α—萘酚、碳酸钠、酒精、过氧化氢、氯化三苯基四氮吡、磷酸氢二钠、磷酸二氢钾、量筒、量瓶、滴瓶等。安全提示：因联苯胺、α—萘酚、氯化三苯基四氮唑为易制毒化学品，操作时要按规范要求，避免人体直接接触，注意安全。三、说明在有性杂交工作中，常因杂交亲本组合的花期不遇，或亲本植株异地而必须预先收集父本花粉，花粉应贮藏在低温(0—4℃)，干燥(相对湿度0—4%)不受阳光直射(或黑暗)的环境下，可以较长时间地

4、保持花粉的生活力，经贮藏或外地采来的花粉，在授粉之前，必须检验花粉的生活力，以确定花粉发芽的可靠程度，这对检验杂交后的效果，具有重要意义。花粉人工发芽的效果与培养基的配制是否适合有很大关系，培养基常用不同浓度的蔗糖和琼脂1%及蒸馏水配制而成，不同果树的花粉对蔗糖浓度要求不同。一般柑桔花粉要求蔗糖浓度以10—15%为宜；苹果及梨以10—15%为宜，桃以10%为宜。通过控制蔗糖浓度的高低可调节培养基的渗透压，防止播种的花粉在培养基上发生破裂现象。培养基一般以微酸性为宜，pH值相应调整在6—5.2之间，发芽温度控制在20—25℃，并需要空气和较高的

5、湿度。如在培养基中加入少量的硼酸和维生素B1，更可促进花粉发芽。测定花粉生活力，同样是检查花粉的质量，因为做花粉发芽试验时，操作较复杂，设备要求较高，需时也较长。为了简易而迅速地测定花粉的生活力，也有用化学染色的方法测定花粉生活力，但此种方法有一个很大的缺点，就是不能真实地反映出有发芽力的花粉究竟有多少，因为即使染上色的花粉也不一定都具有生活力。所以一般常用而且较为可靠的方法仍然是采用花粉发芽试验，而染色法作为一种粗略的快速测定，还是比较简便的。四、方法和步骤(一)花粉发芽试验(1)培养基的配制：在100毫升蒸馏水中，加入琼脂1克，蔗糖(按果

6、树花粉种类不同的比例加入)和0.01g的硼酸共同置于烧杯中加热煮沸，使琼脂和蔗糖等充分溶解于水中，在加热过程中，由于水分蒸发，必须加入失去的水分，才能保持准确的浓度，然后将烧杯置于水浴锅中(或盛热水的烧杯中)备用，以防培养基冷却凝固(2)发芽床的装置：用玻棒将冷却前(约50℃)的培养基滴入凹玻片的凹孔中(1—2滴)，要求培养基表面必须园正，待其凝固后用作播种花粉之发芽床。(3)播种花粉用接种丝或头发沾上花粉(花粉事先收集使之干燥，贮藏于干燥器中置于冰箱内)21少许，均匀地播种于培育基表面，播种时要防止花粉成团堆集于培育基上；也要防止花粉埋入培

7、养基过深，影响花粉发芽。播种后要在显微镜下检查，花粉分布是否均匀。花粉堆积过多难以计数，而过少则影响发芽。以每一视野中（10×10）分布有100—200粒左右花粉为宜。播种完毕后，将凹玻片插入染色瓶中(染色瓶底事先放入少量的脱脂棉，并加入适量的无菌水)，盖上瓶盖。再在染色瓶上贴上标签，注明花粉种类，蔗糖浓度，采集时间，播种时间，工作者姓名等。然后置于温箱中（温度调至25—28℃左右）。(4)播种后的检查：播种根据树种不同，隔不同时间在显微镜下，检查花粉发芽情况、苹果、梨、桃在3—4小时后检查第一次，以后每隔2—4小时检查一次（北方可适当缩短2

8、次之间的时间），柑桔在24小时检查一次。每次检查三个视野（最好能固定视野检查。如不能固定视野检查，则每次检查的视野不能重复）。同时用计数器统计出花粉总粒数及发芽粒数