培养基母液的配置

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时间:2018-07-24

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1、培养基母液与培养基的配置摘要:配制培养基时,为了使用方便和用量准确,通常采用母液法进行配制,即将所选培养基配方中各试剂的用量,扩大若干倍后再准确称量,分别先配制成一系列的母液保存,使用时按比例吸取母液进行稀释配制即可。关键词:培养基母液常用培养基植物激素1.常用培养基种类,培养基母液的各种成分的量以及配置过程1.1常用培养基:MS培养基MS培养基是目前使用最普遍的培养基。其具有较高的无机盐浓度,能够保证组织生长所需的矿质营养还能加速愈伤组织的生长。由于配方中的离子浓度高,在配制、贮存和消毒等过程中,即使有些成分略有出入,也不会影响离子间的平衡。MS固体培养

2、基可用于诱导愈伤组织,也可用于胚、茎段、茎尖及花药的培养,其液体培养基用于细胞悬浮培养时能获得明显的成功。MS培养基的无机养分的数量和比例比较合适,足以满足植物细胞在营养上和生理上的需要。因此,一般情况下,不用再添加氨基酸、酪蛋白水解物、酵母提取物及椰子汁等有机附加成分。和其它培养基的基本成分相比,MS培养基中的硝酸盐、钾和铵的含量高,这是它的显著特点。B5培养基与其他培养基相比,它的主要特点是含有较低的铵,而铵这一营养成分可能对有些培养基有抑制生长的作用。当愈伤组织和悬浮培养中对B5培养基与MS培养基进行对比培养试验时,发现有些植物的愈伤组织和细胞培养物

3、在MS培养基上生长得好,有些在B5培养基上生长得更适宜。N6培养基为水稻的花药培养设计,成分简单,硝酸铵含量高,不含钼,用于花药(谷物)培养。LS培养基基本与MS培养基相同,LS成分相对少了。White培养基为培养番茄根尖培养设计,无机盐浓度低,属于低盐培养基。适用于生根培养,成熟胚胎培养,后作了改良,多用于本草植物。1.2几种常用培养基母液的各种成分的量以及配置过程培养基母液的各种成分包括大量元素、微量元素、Fe盐、有机成分、肌醇、激素等。1.2.1大量元素母液的配制(10X,1000ml)成分使用浓度(mg/L)配置1000ml培养基称取量(g)MS培

4、养基硝酸钾 KNO3190019硝酸铵NH4NO3165016.5磷酸二氢钾 KH2PO41701.7硫酸镁 MgSO4.7H2O3703.7氯化钙 CaCl2.2H2O4404.4B5培养基KNO3250025CaCl2·2H2O1501.5MgSO4·7H2O2502.5(NH4)2SO41341.34N6培养基硝酸钾(KN03)283028.3硫酸铵(NH4SO4)4634.63氯化钙(CaCl2·2HzO)1661.66硫酸镁(MgSO4·7H20)1851.85磷酸二氢钾(KH2PO4)40041.2.2微量元素母液的配置(100X,500ml)

5、成分使用浓度(mg/L)配置500ml培养基称取量(g)MS培养基碘化钾 KI0.830.0415硼酸 H3BO36.20.31硫酸锰 MnSO4.4H2O22.31.12硫酸锌 ZnSO4.7H2O8.60.415钼酸钠 Na2MoO4.2H2O0.250.0125硫酸铜 CuSO4.5H2O0.0250.00125氯化钴 CoCl2.620.0250.00125B5培养基KI0.750.0375H3B043.00.15MnSO4.4H2O100.5ZnSO4.7H2O201Na2MOO4.2H2O0.250.0125Cocl2.6H2O0.0250.0

6、0125CuSO4.5H2O0.0250.00125N6培养基硫酸锰(MnS04·4H20)4.40.22硫酸锌(ZnSO4·7H20)1.60.08硼酸(H2BO3)0.80.04碘化钾(KI)1.60.081.2.3Fe盐母液的配置(100X,200ml)成分使用浓度(mg/l)配置200ml培养基称取量(g)MS培养基、B5培养基乙二胺四乙酸二钠 Na2.EDTA37.30.746硫酸亚铁 FeSO24.7H2O27.80.556N6培养基乙二胺四乙酸二钠 Na2.EDTA37.250.745硫酸亚铁 FeSO24.7H2O27.850.5571.2

7、.4有机成分母液的配置(100X,200ml,不含肌醇)成分使用浓度(mg/l)配置200ml培养基称取量(g)MS培养基甘氨酸20.04盐酸硫胺素VB10.10.002盐酸吡哆醇VB60.50.01烟酸VB5或VPP0.50.01蔗糖300006B5培养基烟酸VB5或VPP1.00.02盐酸吡哆醇VB61.00.02盐酸硫胺100.2N6培养基烟酸VB5或VPP0.50.01甘氨酸20.04盐酸硫胺素1.00.02盐酸吡哆素0.50.011.2.5肌醇母液配置(100X,200ml)培养基使用浓度(mg/l)配置200ml培养基称取量(g)MS培养基10

8、02B5培养基1002N6培养基不含肌醇1.2.6激素母液的配置名

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