GGT的测定在肝癌诊断中的临床应用.doc

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1、GGT的测定在肝癌诊断中的临床应用【关键词】,肝癌摘要:目的:评价血清GGT测定指标在肝癌诊断中的应用价值。方法:取我院2001年至2004年中,已确诊断为原发性肝癌及转移性肝癌患者血清。AFP采用美国EverlongInc,生产ALPHA-FETOROTEIN(AFP)生多试剂进行酶免疫测定。GGT采用上海复星长征γ-谷氨酰转移酶医学科学有限公司生产的试剂,在日本岛津L-8000全自动生化分析仪上机测定。结果:392例肝癌患者测定AFP阳性率68%,GGT阳性率为99%。结论:在作肝癌诊断及早期普查治疗活动中,应增加GGT作为诊断指标,以及早发现肝癌特别不

2、明来因的转移性肝癌诊断、治疗提供更敏感、更高应用价值的一项重要指标。  关键词:甲脂蛋白(AFP);γ-谷氨酰转移酶(GGT);肝癌  本文应用日本岛津L-8000全自动生化分析仪对我院已确诊肝癌患者392例作GGT测定,以及采用免疫学酶法对AFP进行测定,并进行比较分析现报告如下。  1材料和方法  1.1材料  1.1.1检测对象:来自我院外科手术病人和肿瘤科介入治疗病人,还有部分门诊肝癌患者复诊患者,抽取受检者清晨空腹血约6.0ml,分两支真空管,送检。  1.1.2仪器:日本岛津L-8000、芬兰雷勃公司生产WellWash4μk2洗板机,芬兰雷勃公

3、司生产MutisrawMK3酶标仪。  1.1.3试剂:上海复星长征医学科学有限公司生产的γ-谷氨酰转移酶试剂盒,美国EverlongInc.生产的ALPHA-FETOPROTEINCAFP、ENZYMEIMMUNOASSYTESTKIT。质量监控血清为卫生部临床检验中心提供。  1.2方法  1.2.1GGT采用真空管采血,离心分离血清(无溶血),严格按试剂盒使用说明书内技术性能指标,在日本岛津L-8000全自动生化分析仪上机测定,在取血3h内完成测试,并用卫生部临床检验中心提供质量监控血清,结果准确可靠。  1.2.2AFT测定采用真空管采血3ml,离心

4、分离血清(无溶血)按试剂说明要求,根据标本份数取出反应包被反应槽,同时多取七个标准孔和一个空白对照孔,所用试剂从冰藏柜取出回复到室温(18~25℃)具体如下:①用反应孔架按标本份数及标准与空白对照孔取出反应孔数量,并固定于反应孔架上,并编号。②每孔加入标本20ul,标准孔分别加入含量为0、5、20、50、150、300、600、1000ug/ml3AFP,标准液20ul,空白对照加入Ierobutter170ul。③标本孔及标准孔每孔加入Ierobutter150ul,轻轻摇动10次,混匀。④放置室温(18~25℃)反应30min。⑤取出用蒸馏水洗板机上洗涤

5、5次,每次约1min。⑥用干净纱布上拍干。⑦每孔加入酶液(EnzymeLonjugateKeageat)200ul,轻轻摇动5次、混匀,空白孔不加。⑧放置室温(18~25℃)30min。⑨过15min后,把显色剂A、B、(colorReageatA、colorReageatB),根据标本数量按1:1取出A、B液混匀,即成TMB。⑩取出洗板机用蒸馏水洗涤5次,每次约1min,孔。(11)在干净纱布上拍干。⑿每孔加入TMB液200ul,摇匀5次、放置室温20min。⒀每孔加入终止液(2NHCl)50ul,轻轻摇动30次、充分混匀。⒁在芬兰雷勃公司生产的酶标仪上,

6、选波长为450nm,进行OD值测定,并根据标准值得到OD值,得到曲线,计算出样本AFP的值。  2结果  将原发性肝癌转移癌的测定结果的范围、均值及阳性率列表。(GGT正常参考值为0~47u,AFP参考值为0~20ug/ml),当GGT大于47u时为阳性,AFP大于20ug/ml为阳性,并计算出阳性率。结果见表1。  表1392例肝癌患者GGT及AFP结果(略)  3讨论  血清γ-谷氨酰转移酶(GGT)测定人体各器官中GGT含量按下列顺序排列:肾、前列腺、胰、肝、盲肠和脑。在肾脏、胰腺和肝脏中,此酶含量之比约为100:8:4。肾脏中GGT含量最高。但肾脏疾

7、病时,血液中该酶活性增高却不明显。有人认为,肾单位病变时,GGT经尿排出,测定尿中酶活性可能有助于诊断肾脏疾患。    GGT主要用于诊断肝胆疾病。原发性肝癌、胰腺癌和乏特壶腹癌时,血清GGT活力显著升高,特别在诊断恶性肿瘤患者有无肝转移和肝癌术后有无复发时,阳性率可达90%。    嗜酒或长期接受某些药物如苯巴比妥、苯妥因钠、安替比林等者,血清GGT活性常常升高。口服避孕药会使GGT值增高20%。    但是,GGT作为且癌标志物的特异性欠高,急性肝炎、慢性肝炎活动期、阻塞性黄疸、胆道感染、胆结石、急性胰腺炎时都可以升高。    AFP是胚胎发育早期的一种

8、主要血清蛋白,成人由肝细胞产生,含量极微。AFP有很

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