微波辅助提取川芎多糖的研究

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1、微波辅助提取川芎多糖的研究【摘要】目的确定在微波条件下提取川芎多糖的优化条件。方法采用单因素实验和正交实验，以微波功率、料液比、萃取时间为因素，每个因素3个水平，选择L9(34)正交表，用蒽酮-硫酸比色法测定多糖含量。结果最佳提取条件为微波功率231W，料液质量比1∶40，萃取时间10min，在此条件下多糖提取率为3.06%。结论微波法萃取川芎多糖时间短，提取效率高，具有广阔应用前景。【关键词】川芎；微波萃取；多糖；单因素实验设计；正交实验川芎LigusticumchuanxiongHort.是一

2、种常见的川产道地中药材，具有活血行气、祛风止痛、开郁燥湿等功效，临床上常用于治疗头痛眩晕、风湿痹痛、跌打肿痛、月经不调以及产后瘀阻腹痛等病症［1］。本研究采用微波法提取川芎多糖，探讨影响提取的因素，确定提取最佳条件，为川芎多糖的深入研究提供一定的依据。　　1仪器与材料　　752型紫外分光光度计（上海光谱仪器有限公司），WD700TL173微波炉（广州格兰仕有限公司），Centrifuge55810R冷冻离心机（美国Eppendorf公司），电子天平BS200S（北京塞多利天平有限公司）。　　川芎

3、购于成都中药材市场，经本学院制药工程系的唐灿博士鉴定，干燥粉碎，过40目筛，待用；葡萄糖、无水乙醇、硫酸、蒽酮（均为分析纯，成都金山化学试剂有限公司）。　　2方法和结果　　2.1蒽酮-硫酸溶液的配制精密称取0.2g蒽酮用100ml浓硫酸定容，现用现配。　　2.2工作曲线的绘制［2］精确称取10mg干燥的葡萄糖，溶解并定容至100ml，摇匀，配成葡萄糖标准溶液。量取标准溶液各0，0.1，0.2，0.4，0.5，0.6，0.8，1.0ml，分别加蒸馏水1.0，0.9，0.8，0.6，0.5，0.4，0

4、.2，0ml，加蒽酮硫酸溶液4ml，混合，置沸水浴中加热10min。取出立即降温至室温，在620nm测定吸光度，作标准曲线，回归方程为Y=14.563X-0.0309，r为0.9972。　　2.3单因素分析　　2.3.1微波功率5　　称取2.0g川芎粉末加入150ml蒸馏水浸润10min。然后分别在119，231，385，539，700W功率下萃取10min，每辐射1min，冰水降温1min。辐射结束后4000r·min-1，离心10min，将所得上清液定容至相同体积。为了方便，选择测定吸光度来

5、反映多糖的溶出量。分别做3次平行实验。结果见图1。从图1可知，231W时吸光度为最大，因此以下的单因素分析和正交实验均选用功率为231W。　　2.3.2萃取时间分别称取2.0g川芎粉末用150ml蒸馏水浸润一段时间，在231W下分别进行5，10，15，20，25min的间歇式萃取，然后离心，定容，测定吸光度，结果见图2。从图2可知，萃取10min时的吸光度达到最大值，因此选择10min进行正交实验。　　2.3.3料液比分别按料液比为1∶20，1∶30，1∶40，1∶50，1∶60加入川芎粉末，在2

6、31W下萃取10min，离心，测定吸光度，结果见图3。由图3可知，料液比为1∶50时吸光度达到最大值，因此选择料液比为1∶50进行正交实验。　　2.3.4萃取次数称取2.0g川芎粉末加入100ml蒸馏水。在231W下萃取10min，然后离心得上清液，测定吸光度，结果见图4。从图4可见，在进行两次提取后，溶液吸光度变化不大，上升趋势平缓。综合考虑，2次提取为最佳选择。　　2.4正交实验选取微波功率(A)、料液比(B)、5萃取时间(C)为考察因素，每个因素分别取3个水平值，见表1。正交实验采用L9(3

7、4)正交表，见表2，重复3次。表1单因素水平表（略）表2正交实验结果（略）　　由表2可知，在微波萃取川芎多糖过程中，影响因素由大到小依次是A＞C＞B，即微波功率对提取影响最大，其次是萃取时间和料液比。根据表2所得最佳工艺条件为A2B1C2，即微波功率为231W，料液比为1∶40，萃取时间为10min。　　将在最佳提取条件下所得溶液浓缩,脱脂，除蛋白，脱色，80%乙醇沉淀多糖，离心并干燥至衡重，即为川芎粗多糖，用蒽酮-硫酸法测定多糖含量，计算得提取率为3.06%。　　3讨论　　采用单因素与正交实验相

8、结合的方法对微波辅助提取川芎多糖的影响因素进行了研究，确定最佳工艺条件为微波功率为231W，料液比为1∶40，萃取时间为10min。5　　多糖具有调节免疫、抗心肌缺血、降血脂、抗炎、抗病毒、抗肿瘤、抗衰老等重要的药理作用，且无毒副作用，现在被作为临床用药或疫苗，是广泛研究的焦点［3］。提取多糖的方法有多种，除了微波法外，还包括超声波法、酶法、超临界萃取法、双水相萃取法和大孔吸附树脂法等，因此研究选用合适的方法提取川芎多糖非常有必要。我们首次采用微波技术从川芎中提取多糖，与其他方法相