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《酶法合成芥酸海藻糖酯的分离纯化与表征》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在教育资源-天天文库。
1、酶法合成芥酸海藻糖酯的分离纯化与表征王海霞1,2，李舒生1,2，贾承胜*1,2，张晓鸣1,2，冯骉1,2(1.食品科学与技术国家重点实验室,江南大学,江苏无锡214122;2.江南大学食品学院,江苏无锡214122)摘要：脂肪酶催化合成芥酸海藻糖酯产物中可能存在单酯和二酯。采用薄层层析(TLC)和硅胶柱层析分离纯化反应完成液，然后用高效液相色谱(HPLC)、液质谱(HPLC-MS)和核磁共振(NMR)法鉴定了纯化组分的分子结构。TLC分离芥酸海藻糖酯的最佳条件：点样量2μl，以氯仿/甲醇(4:1,V/V)展开约30min，然后用5%硫酸乙醇溶液喷雾、120℃显色
2、20min。硅胶柱层析分离芥酸海藻糖酯的适宜条件：5ml反应液上12mm×600mm硅胶(100～200目)层析柱，流动相为氯仿/甲醇(4:1,V/V)，流速80ml/h，按1管/200s收集洗出液。两种分离组分分别为6'-O-芥酸海藻糖酯和6,6'-O-芥酸海藻糖二酯。关键词：芥酸海藻糖酯；芥酸海藻糖二酯；薄层层析；硅胶柱层析EnzymaticSynthesis,SeparationandCharacterizationofErucoylTrehalosesWANGHai-Xia1,2,LIShu-sheng1,2,JIACheng-sheng*1,2,ZHA
3、NGXiao-ming1,2,FENGBiao1,2(1.StateKeyLaboratoryofFoodScienceandTechnology,JiangnanUniversity,Wuxi214122,China;2.SchoolofFoodScienceandTechnology,JiangnanUniversity,Wuxi214122,China)Abstract:Erucoyltrehaloseswhichweresynthesizedusingimmobilizedlipasemaycontainmonoesteranddiester.There
4、actionmixturewereseparatedandpurifiedbythethinlayerchromatography(TLC)andsilicagelcolumnchromatography,thenthepurifiedproductswereanalyzedbyHPLC,HPLC-MS,andNMR.TheoptimumconditionsforTLCwereconfirmed:2μlofthereactionmixturewereappliedtosilicagelGplates,developedbychloroformmethanol(4
5、:1,V/V),andthendetectedbysprayingwith5%ofsulfuricacidinethanolandheatedat120oCfor20min.Theoptimumconditionsforsilicagelcolumnchromatographywere:5mlofthereactionmixturewasappliedto12mm×600mmsilicagelcolumn(100～200mesh)andchloroform-methanol(4:1,V/V)wasusedasmobilephase,whoseflowratewa
6、s80ml/h,theeluentof1tube/200swascollected.Thepurifiedproductswere6'-O-erucoyltrehalosesand6,6'-O-erucoyltrehaloses.Keywords：erucoyltrehaloses,dierucoyltrehaloses,TLC,silicagelchromatography基金项目:江苏省自然科学基金项目(BK2008100)；国家863计划项目(2006AA10Z312)。*通讯作者:贾承胜(1968-)，男，安徽太湖人，理学博士，副教授，主要从事食品化学研
7、究。Email:chshjia@jiangnan.edu.cn9海藻糖是由两个葡萄糖分子以α,α,1,1-糖苷键构成的非还原性糖，广泛存在于自然界中许多动植物和微生物体内[1,2]，随着工业化海藻糖年产量的不断增加，其低甜度、稳定性、安全性、抗腐蚀性，抗肿瘤活性等独特的生物学性质为人日渐重视[3,4]，在食品、化工、医药、化妆品工业中的应用日趋广泛[4,5]。市场的需求和发展推动其应用范围的拓展和技术的革新。近年来，各类海藻糖衍生物产品不断上市，其中，海藻糖酯在食品加工中具有很多优越性质，深受市场青睐，因而被大量研究和制备[4,8]。目前，糖酯类非离子型表面活性
8、剂的合成多采用化学法，但
