医药学临床医学毕业论文 荧光金逆行标记大鼠视网膜神经节细胞

《医药学临床医学毕业论文 荧光金逆行标记大鼠视网膜神经节细胞》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在学术论文-天天文库。

1、湖南师范大学本科毕业论文考籍号：XXXXXXXXX姓名：XXX专业：医药学临床医学论文题目：荧光金逆行标记大鼠视网膜神经节细胞指导老师：XXX二〇一一年十二月十日【摘要】目的将荧光金（flurogold，FG）注射于SD大鼠上丘，观察到被FG逆行标记的视网膜神经节细胞(retinalganglioncells，RGC)，以及SD大鼠RGC的数目及分布。方法用3%FG双上丘注射，逆行标记RGC。5天后做视网膜定向铺片，在荧光显微镜下距离视乳头中心上下左右各2mm拍摄照片。利用计算机图像分析系统做RGC计数。结果右眼RGC单位面积数量472.9±54.13，左眼R

2、GC单位面积数量471.5±52.54。双眼RGC单位面积数量相比差异无显著性（P0.05）。视网膜血管自视盘发出呈放射状，血管走行区无标记细胞。距视盘2mm始RGC分布较致密，视网膜周边部细胞分布较为稀疏。结论用荧光金逆行标记上丘方法来标记RGC，是实验条件下研究RGC数量动态变化的可靠、有效方法。【关键词】视网膜神经节细胞；荧光金【Abstract】ObjectiveRetinalganglioncells(RGC)wereretrogradelabeledbyinjectionof3%fluorogoldintobothsideofsuperiorcol

3、liculustoobservethenumbersanddistributionofRGC.Fourphotographsweretakenfromeveryquadrantoftheretina2mmfromthecenterofopticdisc.Retinalganglioncellswerequantitativelyanalyzedbycomputer.MethodsToidentifyRGC，weappliedthe3%fluorogoldtothesuperiorcolliculi.Theretinalwereexaminedthroughaf

4、luorescencemicroscopeafter5days，fourphotographsweretakenfromeveryquadrantoftheretina2mmfromthecenterofopticdisc.Retinalganglioncellswerequantitativelyanalyzedbycomputer.ResultsThenumbersofRGCwerenotsignificantlydifferentbetweentwogroups.Thenumbersofrighteyewas472.9±54.13.Thenumberso

5、flefteyewas471.5±52.54.ConclusionThemethodthatretinalganglioncells(RGC)retrogradelabeledbyinjectionoffluorogoldisreliableandeffective.【Keywords】retinalganglioncells；fluorogold视网膜神经节细胞（retinalganglioncells，RGC）的慢性进行性丢失是青光眼最主要的病理生理学特征。高眼压、缺血等原发性损伤首先引起一部分RGC的丢失，丢失的节细胞产生出许多毒性物质，使其周围RGC的

6、生存环境恶化，细胞膜离子通透性增加，线粒体膜遭受损害，致使细胞进入凋亡程序，导致细胞丢失［1］。因此准确的RGC计数是研究青光眼发病机制及视神经保护治疗的关键指标。该实验将荧光金（flurogold，FG）注射于SD大鼠上丘，观察到被FG逆行标记的RGC，以及SD大鼠RGC的数目及分布。1材料与方法1.1试剂与器械荧光金（荧光金公司，美国），脑立体定位仪900型（DavidKopf仪器公司，美国），荧光显微镜（AH-2，奥林巴斯公司，日本），联想Mustek扫描仪。1.2实验动物Sprague-Dawley大鼠10只，购自北京维通利华实验动物技术有限公司。雄性

7、，重量200~240g，裂隙灯检查大鼠前节，包括角膜、前房、虹膜和晶状体无异常改变。Mydrine散瞳，检眼镜观察眼底，包括视盘、眼底血管及部分视网膜无异常改变者。实验动物在12h光照/12h黑暗的条件下饲养。1.3逆行标记采用双上丘注射法逆行标记RGC。大鼠腹腔注射盐酸氯胺酮与地西泮注射液的等量混合液3ml/kg进行麻醉，将其固定在脑立体定位仪上，0.5%碘伏消毒皮肤，于正中切开皮肤向下分离达颅骨。牙科钻钻开颅骨相应部位，用微量注射器吸取3%FG（溶于0.9%生理盐水中），每侧上丘注射两点（前囟后5.9和6.4mm，旁开1.4mm，深4.0mm），每点注射1

8、.5μl，留针5min。1.4视网膜定