透骨消痛颗粒对骨性关节炎软骨及软骨下骨影响的组织化学研究2

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1、助。在应用血清药理学阐明中药(解毒消瘾饮)抑瘤作用基础(机制)时，我们认为要规范其含药血清的制备，并从其含药血清的药化学和药理学两方面进行探讨，完善其含药血清的体外药理实验方法，将有利于中药血清药理学的发展。【1】【2】【3】【4】【5】【6】【7】参考文献陈立武，林晶，陈文，等．中药治疗原发性肝癌III期围手术期患者42例．中国中西医结合杂志．2005；25(9)：832-834．1wamaH，AmagayaS，OgiharaYeta1．EffectofshosaikotoaJapaneseandChinesetraditionalherbalmedi

2、calmixtureonthemitogenticactivityoflipopolysaccharid：all@Wpharmacologicaltestingmodel．JEthonpharmacol，1987；21(1)：45-53．贺玉琢．日本汉方药“血清药理学”、“血清药化学”的研究概况．国外医学·中医中药分册．1998；20(5)：3—7．叶永安，朱陵群．中药复方血清药理学在中医药研究中应用的思考．中国中医基础医学杂志，2001；7(5)：34．王宁生，杨奎，雷燕，等．关丁二血清药理学的若干思考．中国中西医结合杂志，1999；19(5)：263

3、—266．钟守琳，周剑涛．释放一氧化氮型阿司匹林防治肿瘤的作用．西北药学杂志，2008；23(3)：184．186．DunlapT'Abdul—HaySO，ChandrasenaRE，eta1．NitratesandNO-NSAIDsinCanCerchemopreventionandtherapy：InvitroevidencequeryingtheNOdonorfunctionality．NitricOxide．2008；19(2)：115—124．透骨消痛颗粒对骨性关节炎软骨及软骨下骨影响的组织化学研究黄云梅1’3’4，一，孝陈文列1，3'4，一，

4、枣宰刘献祥2，3’4，一，黄美雅1’3"，林如辉1’3'4，一，李民21．福建中西医结合研究院重点实验室：2．福建中西医结合研究院骨病研究所；3．福建省中西医结合老年性疾病重点实验室(福建中医学院)；4．福建省高校中西医结合基础重点实验室(福建中医学院)；5．国家中医药管理局三级科研实验室．中药药理(细胞结构与功能)实验室，福州350108摘要目的：探讨透骨消痛颗粒对兔膝骨性关节炎软骨及软骨下骨的影响。方法：取新西兰大白兔72只，雌雄各半，根据改良Hulth法制作骨性关节炎模型，动物随机分成正常对照组、骨性关节炎模型组、透骨消痛颗粒低、中、高剂量组和壮骨

5、关节丸组各，术后第l周、第3周、第6周、第9周、第12周、第15周分批进行取材，采用石蜡切片HE染色、番红．固绿染色、AB—PAS染色和V-G染色法，观察膝关节软骨和软骨下骨的变化，以及PCNA免疫组织化学染色观察软骨细胞和成骨细胞的增殖情况。结果：模型组关节软骨和软骨下骨发生典型的骨性关节炎病理形态变化，软骨基质蛋白多糖尤其是酸性粘多糖和胶原减少，软骨和成骨细胞增殖早期较正常组活跃，晚期软骨细胞增殖能力下降；实验组与模型组相比，组织结构破坏有明显改善，蛋白多糖和胶原的含量增加，细胞增殖较稳定，且呈药物剂量依赖性，高剂量组效果优于壮骨关节丸组。结论：透骨

6、消痛颗粒对实验性兔膝骨性关节炎软骨和软骨下骨病变均有一定的防治作用，这可能与其调节软骨和成骨细胞的代谢和增殖有关。关键词骨性关节炎；透骨消痛颗粒；蛋白多糖；胶原纤维；特殊染色：PCNA；免疫组织化学骨性关节炎(Osteoarthritis，OA)是中老年人常见的慢性进行性骨关节病，严重威胁病人的生活质量，目前尚无根治的方法。我院临床用于防治OA的透骨消痛颗粒是以“肾主骨”、“肝主筋”、“膝为筋之府”等中医理论为指导，针对OA组方，效果肯定。本实验通过建立兔OA模型，采用常规石蜡切片和多种特殊染色法，从组织形态学上观察和分析透骨消痛颗粒的作用，并应用免疫组

7、织化学染色法检测细胞增殖抗原PCNA的表达，探讨该方对OA软骨和软骨下骨的影响，为临床运用提供基础理论依据。结果1一般形态观察正常组关节软骨表面光滑，四层结构清晰可辨，各层次排列规律，软骨细胞大而饱满，呈圆形或椭圆形，表层呈梭形，细胞核清晰，均匀深染，胞质均匀红染；软骨基质染成蓝色，以放射层为中心往上、下层染色渐淡，潮线清晰完整；软骨下骨致密层厚度适中，骨松质层骨小梁宽度和密度适中，骨细胞呈梭形，分布均匀，骨基质均匀红染(如图1)。模型组第1．3周即出现关节软骨层局部破坏，可见纤维肉芽组织填充。3-9周局部软骨细胞明显增值，呈簇状，层次结构紊乱，软骨基质

8、染色浅而无规律，局部纤维化明显，并出现裂缝(如图2)，可见骨髓血管肉芽组织侵入软