芽孢杆菌n6的鉴定及其产β甘露聚糖酶最适条件的研究

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1、万方数据中国农业大学学报2006，11(3)：36—40JournalofChinaAgriculturalUniversity芽孢杆菌N．6的鉴定及其产p．甘露聚糖酶最适条件的研究张清霞1周洪友2唐文华1(1．中国农业大学农学与生物技术学院，北京100094；2．内蒙古农业大学农学院，呼和浩特010019)摘要为获得产酶量高、产酶快的菌株，采用碘液染色法从土样分离到1株产B一甘露聚糖酶量高的菌株Bacillussp．N一6，通过16SrDNA序列相似性比较及生理生化性状鉴定为枯草芽抱杆菌；为得到最佳产酶配方进行了发

2、酵条件优化。结果表明：100mL培养基加入2g魔芋粉、1g酵母粉、1g豆饼粉、起始pH8．0、32℃150r／min振荡培养18h。产酶量最高。达316．53U／mL。该酶在pH5．0～9．0和40--55℃下稳定，作用最适条件pH6．0和50℃。C02+对酶有激活作用，Fe”。舨+和EDTA对酶有较强抑制作用。关键词甘露聚糖酶；枯草芽孢杆菌；鉴定中图分类号Q93—331；Q939．124文章编号1007—4333(2006)03-0036—05文献标识码AIndentificatiOnandoptimization

3、．ofBacillussp．N-6for13-mannanaseproductionZhangQingxial，ZhouHongyou2，TangWenhual(1．CollegeofAgronomyandBiotechnology，ChinaAgriculturalUniversity。Beijing100094，China；2．CollegeofAgriculture，AgriculturalUniversityofInnerMongolia，Huhhot010019，China)AbstractN一6strai

4、nofhighextracellularpmannanaseactivitywasisolatedfromsoilsamplesbyiodinedyedmethodinOrderIoobtainfhestrainwhichrapidlyproducedmannanase．ThestrainwasidentifiedasBacillussubtil／sby16SrDNABLASTintheGenbank，morphologicalandphysiologicalcharacteristicsanalysis，There

5、sultshowedthattheactivitywas316．53U／mLinthe100mLculturemedium，containing2gKonjakpowder，1gyeastextract，1gbeancakepowder．TheoptimalpH，temperature。agitationspeedandculturetimewere8．0，32℃，150r／minand18h，respectively．TheactivitywasstableatpH5．0～9．0andbelow55℃．Theopt

6、imalconditionoftheenzymewaspH6．0and50℃。re—spectively．Theenzymeactivitywasenhancedbyc02+andwasinhibitedbyFe3+，Ag+andEDTA．Keywordspmannanase；Bacillussubtilis；identification

7、3一甘露聚糖酶来源广泛，在动植物和微生物中都有该酶存在[1吲。其中芽孢杆菌因产酶量高、产酶周期短、耐热和抗逆性强而受关注。国内报道了许多其产酶菌株的筛选和产酶条件的优化，但绝大多数

8、菌株活力低、产酶周期长r2，91；国外对其产酶条件的优化研究较少r10]。本研究旨在筛选产酶活力高、产酶周期短的菌株，并通过优化发酵条件提高甘露聚糖酶的产量，为生产应用和后续研究提供理论依据。B一甘露聚糖酶(EC3．2．1．78)是内切水解酶，催化水解半纤维素中的半乳甘露聚糖、葡甘露聚糖、半乳葡甘露聚糖和甘露聚糖主链上的B．1，4一甘露糖苷键‘11；另一方面，可降解植物胶的低聚糖可用作双歧杆菌促生长因子等保健食品及饲料工业中抗营养因子的开发等r2训。1材料与方法1．1菌株来源从内蒙、北京、江苏、河北等地采集的土样中，

9、按照Williams报道的多糖染料和多糖底物反应生成收稿Et期：2005—10—14基金项目：澳大利亚国际农业中心资助项目(PHT／1998／140)作者简介：张清霞。博士研究生，E—mail：zqx817@126．corn；唐文华，教授，通讯作者，主要从事植物病害生物防治研究，E—mail：wenhuatang@sohu．corn万方数据第3