vaccines-上海交通大学医学院精品课程-laboratorydiagnosisppt

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1、LaboratoryDiagnosis1CategoryofSampleBlood,Urine,Stool,nasalwashing,nasalswab,throatswab,saliva,sputum,rectalswab,vesiclefluid(scrapingorswab),tissue,brainbiopsy,cerebrospinalfluid,etal.2LaboratoryDiagnosisMicroscopyIdentificationVirusisolationandidentificationDetectionofviralproteins(antigensandenzy

2、mes)]DetectionofviralgeneticmaterialSerologicprocedures3MicroscopyIdentificationLightmicroscopyFluorescentmicroscopyElectronmicroscopy4LightmicroscopyCharacteristicCPEInclusionBodies5CelldeathCellroundingDegenerationAggregationLossofattachmentstosubstrateCharacteristichistologicalchanges:inclusionbo

3、diesinthenucleusorcytoplasm,marginationofchromatinSyncytia:multinucleatedgiantcellscausedbyvirus-inducedcell-cellfusion6FluorescentmicroscopyFluorescent-antibodystaining7ElectronmicroscopyDirectdetection:Humanrotavirus;HAV;HBV;Smallpoxvirus;Herpesvirus.ImmuneElectronmicroscopy:Humanrotavirus;HAV;8La

4、boratoryDiagnosisMicroscopyIdentificationVirusisolationandidentificationDetectionofviralproteins(antigensandenzymes)]DetectionofviralgeneticmaterialSerologicprocedures9ViralisolationandIdentificationViralGrowthandCellcultureViralDetectionViralIdentificationInterpretationofcultureresults10Systemsfort

5、hePropagationofVirusesPeopleAnimals:cows,chickens,mice,rats,sucklingmiceEmbryonatedeggsOrganandtissuecultureOrganculturePrimarytissuecultureCelllines:diploidTumoror(immortalized)cellline11ViraldetectionCPEHemadsorptionInterfereMetabolizeofcell12TCID50 (Tissuecultureinfectivedose)TCID50isdefinedastha

6、tdilutionofviruswhichwillcauseCPEin50%ofagivenbatchofcellcultureTCID50=log10ofhighestdilutiongiving100%CPE+1/2–(totalnumberoftestunitsshowingCPE)/(numberoftestunitsperdilution)13ViralidentificationComplementfixation:HemagglutinationinhibitionNeutralizationImmunofluorescence(directorindirect)Latexagg

7、lutinationInsituEIAELISARIA(radioimmuno14LaboratoryDiagnosisMicroscopyIdentificationVirusisolationandidentificationDetectionofviralproteins(antigensandenzymes)DetectionofviralgeneticmaterialSerologicp

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