紫金砂体外抗菌活性的研究

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时间:2018-09-29

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1、紫金砂体外抗菌活性的研究【摘要】目的紫金砂提取物及其提取部位抗菌活性的研究。方法5%乙醇提取,系统溶剂萃取分离得到5个部位,采用纸片扩散法对提取物及提取部位进行体外抗菌活性研究。结果紫金砂提取物对金黄色葡萄球菌、大肠杆菌具有抑制作用,氯仿提取部位对大肠杆菌、枯草芽胞杆菌具有抑制作用,正丁醇提取部位对大肠杆菌、绿脓杆菌具有抑制作用。结论紫金砂提取物及提取部位具有抗菌活性。【关键词】紫金砂抗菌活性提取物提取部位Abstract:ObjectiveTostudytheanti-bacterialactivityoftheextractanditsextractivefractionsof

2、AngelicapolymorphapolymorphaMaxim.wasextractedwith5%ethanol.FivefractionswereobtainedbysystematicallyseparatingtheeffectinvitrowastestedusingdiskdiffusionTheextractshowedantibacterialactivityagainstStaphylococcusaureusandEscherichiachloroformfractionshowedactivityagainstEscherichiacoliandBacil

3、lussubtilis.ThenobutanolfractionshowedactivityagainstEscherichiacoliandPseudomonasextractanditsfractionsofAngelicapolymorphaMaxim.haveanti-bacterialactivitives.Keywords:AngelicapolymorphaMaxim.;Anti-bacterialactivity;Extract;Extractivefraction土家族常用中药紫金砂,为伞形科植物当归属植物白根独活AngelicapolymorphaMaxim.的

4、根[1]。主要分布于湖北、湖南、重庆、陕西省等省区。具有温中散寒、理气止痛的功效。民间一直作为香独活入药,常用其治疗胃痛、腹痛、胸胁痛、风湿关节痛、跌打损伤、毒蛇咬伤等,疗效极佳[2]。其化学成分主要为生物碱[3]、挥发油[4]、香豆素[5,6]、甾醇[7]等。文献报道抗菌植物资源中伞形科较为丰富,这其中又以当归属等植物抗菌活性最强[8]。在上述文献工作的基础上,本实验对伞形科当归属植物拐芹的根,即紫金砂进一步进行体外抗菌实验(纸片扩散法[9,10])的研究,发现紫金砂初提物及不同萃取部位具有不同的抗菌活性。为进一步活性追踪其化学成分提供了依据和导向。1器材仪器N-1001型旋转蒸

5、发器、ss-325型压力蒸气灭菌锅、SPX-1508B型恒温培养箱、AL204万分之一电子天平(METTLWRTOLEDO)、SW-CJ-1F型超净工作台。药材自采药材,XX0709采于神农架林区木鱼镇。经鉴定为伞形科植物当归属植物拐芹的根。试剂5%乙醇、石油醚、三氯甲烷、醋酸乙酯、正丁醇等;10型滤纸。培养基营养肉汤,琼脂粉。菌种金黄色葡萄球菌、大肠杆菌和绿脓杆菌由湖北省宜昌市中心医院提供,枯草芽孢杆菌由湖北省宜昌市三峡大学化学与生命科学学院微生物室提供。 2方法与结果.1供试液的制备取干燥的紫金砂根,研磨成细粉,过20目筛。用95%乙醇回流提取,提取液减压浓缩得总浸膏。总浸

6、膏用适量水溶解后,依次用石油醚、氯仿、醋酸乙酯、正丁醇分别反复萃取。各萃取液及最后水溶液减压回收溶剂,浓缩得不同极性部位浸膏。精密称取所得各部位浸膏g,依次将浸膏配制成10ml,即10g/100ml浓度的药液备用。具体过程及结果见图1。.2固体培养基的制备称取营养琼脂置于三角烧瓶中,用去离子水将其充分溶解,取适量脱脂棉塞住瓶口并用滤纸包扎好放入高压灭菌锅中,121℃灭菌1min,待冷却到0℃后取出,在无菌操作台上倒入一次性培养皿中。待冷却凝固后放入冰箱中,4℃保存备用。.3菌悬液的制备取只试管,分别倒入等量生理盐水至试管的1/处,于紫外灯下灭菌20min,然后用无菌棉签蘸取新鲜菌种

7、少量~5个菌落放入生理盐水充分搅动使细菌分散均匀。校正菌液浓度与标准比浊管相同,即达01号麦氏比浊管浊度,所有步骤均在无菌操作台上完成。.4纸片的制备将无药纸片放入高压灭菌锅中,121℃灭菌1min,取出后置恒温培养箱中干燥备用。在无菌操作台上用移液器移取0μl已配制好的药液均匀注入已灭菌的纸片上,使药液完全被纸片吸收,待药片上的溶剂挥干后,在紫外灯下灭菌0min备用。.5提取物的抑菌实验分别用无菌移液管吸取上述制备的种供试菌悬液ml添加到平板培养基上,用无菌三角玻璃

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