羊肚菌多糖体外抗菌活性研究论文

《羊肚菌多糖体外抗菌活性研究论文》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在学术论文-天天文库。

1、羊肚菌多糖体外抗菌活性研究论文龙正海，纪其雄，周惠燕【关键词】羊肚菌；,,多糖；,,抗菌活性摘要：目的对羊肚菌Morchellaesculenta多糖的体外抗菌活性进行初步研究。方法采用改良药基法和K-B法，对子囊果多糖(APS)、菌丝体胞内多糖(IPS)、胞外多糖(EPS)进行体外抗菌实验。结果研究表明羊肚菌多糖对大肠杆菌、枯草芽孢杆菌、金黄色葡萄球菌以及放线菌的抗菌活性都比较强，而对霉菌和酵母菌的抗菌作用不明显。结论3种羊肚菌多糖均具有比较明显的抗细菌、抗放线菌活性。关键词：羊肚菌；多糖；抗菌活性StudyonAnti-microbialActiv

2、itiesofPolysaccharidefromMorchellaesculentainvitroAbstract：ObjectivePrimarystudyonantimicrobialactivitiesofMorchellapolysaccharideinvitroiscarriedon.MethodsTheMICofpolysaccharideeasurededicine-mediumandKirbyBauerMethod.ResultsThetestindicatedthatallthetestedsampleshadanti-microb

3、ialactivitiesagaistE.coli,.freelicroflavus.ConclusionStudyshoM.esculentahadstronganti-bacterialandantiactinomycespoicrobialactivities羊肚菌Morchellaesculenta营养丰富，是珍稀食药用真菌。现代医学研究表明多糖是其重要的活性物质之一，具有抗疲劳、抗肿瘤、抗病毒及提高机体免疫力等作用［1,2］。目前尚未见到有关羊肚菌多糖抗菌作用方面的研究报道，本文将对羊肚菌子囊果多糖以及菌丝体胞内、胞外多糖的抗菌活性进行初步研

4、究。1材料与方法1.1菌种来源1.1.1羊肚菌来源羊肚菌M.esculenta子囊果于200505分别采自浙江丽水和贵州贵阳.freelycesmicroflavus，产黄青霉Penicilliumchrysogenum，米曲霉Aspergillusoryzae，热带假丝酵母Candidatropicalis，啤酒酵母Saccharomycescerevisiae均由本校微生物教研室提供。1.2培养方法和供试菌液制备1.2.1培养基细菌培养基：牛肉膏0.5％，蛋白胨1％，NaCl0.5％，水100ml，pH7.0~7.2。真菌培养基：马铃薯20％，葡萄

5、糖2％，水100ml，自然pH值。酵母、放线菌培养基：葡萄糖5％，蛋白胨1％，KH2PO40.3％，MgSO40.5％，水100ml，pH6.0。1.2.2供试菌培养供试菌种用各自液体培养基在适宜温度下培养后得到各种原菌液。1.2.3供试菌液制备用原菌液分别制备成含菌量约为107CFU/ml的供试菌液，备用。1.3多糖提取与测定1.3.1多糖提取取羊肚菌子囊果干品2g，加人100ml水，煮沸提取30min，冷却后2500r/min离心5min。取上清液于一烧杯中，残渣再加人100ml水，煮沸提取30min，收集上清液于同一烧杯中，残渣再重复提取1次，将

6、3次收集的有提取液的烧杯在电炉上加热、浓缩至30ml左右冷却，再加人100ml乙醇使多糖析出，沉淀30min后2500r／min离心3min，弃去上清液，残渣再加人50ml乙醇搅拌清洗后同样离心弃上清液，残渣再清洗1次后，用约80℃热水70ml溶解残渣，转移至200ml容量瓶中，冷却后定容，得到子囊果多糖液(APS)。再取羊肚菌菌丝体干品2g，同法制备成菌丝体胞内多糖液(IPS)。用真菌培养基接种羊肚菌斜面菌种在25~28℃中培养5~7d，滤去菌丝体的液体培养液于3600r/min离心20min，收集上清液。取5ml上清液，加入3倍体积的95％的乙醇，

7、4℃静置过夜；3600r/min离心10min，收集沉淀，用60℃热水溶解，定容至200ml，即得到胞外多糖液(EPS)。1.3.2多糖含量测定采用蒽酮比色法［3］测定多糖含量，经测定每毫升子囊果多糖液、胞内多糖液、胞外多糖液分别含有多糖2000，2500，100mg。1.4体外抑菌实验1.4.1抑菌圈的测定采取K-B法抗菌实验［4］，用无菌棉签蘸取上述供试菌液分别均匀涂布于不同琼脂平板表面，待平板略干后，在标记位置上贴上含生理盐水及不同浓度多糖的纸片，37℃温箱培养24h后取出，用直尺测量抑菌圈直径。平行做3次实验，取其平均值，以生理盐水做空白对照。

8、1.4.2MIC值的测定采用改良的药基法［5］将上述3种多糖溶液制备成100mg/ml的供试液