凝血因子检查课件

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1、项目14凝血因子检查检验科周相益模块1内源性凝血系统的检验基础理论血液离开血管数分钟后，血液就由流动的溶胶状态变成不能流动的胶冻状凝块，这一过程称为血液凝固（blood coagulation）或血凝。在凝血过程中，血浆中的纤维蛋白源转变为不溶的血纤维。血纤维交织成网，将很多血细胞网罗在内，形成血凝块。血液凝固后1-2小时，血凝块又发生回缩，并释出淡黄色的液体，称为血清。血液离体，血细胞下沉。上层析出的黄色清亮液体是血清？还是血浆？血浆：离开血管的全血经抗凝处理后，通过离心沉淀，所获得的不含细胞成分的液

2、体，即血浆。血清：离体的血液凝固之后，经血凝块聚缩释出的液体，即血清。血清与血浆的区别：主要在于血清不含纤维蛋白原。纤维蛋白原能转换成纤维蛋白，具有凝血作用。血液凝固定义：血液由流动的液体状态变成不能流动的凝胶状态的过程。方式：激活凝血系统，使血浆中纤维蛋白原纤维蛋白，形成纤维蛋白网加固血小板血栓（有效止血）。血管损伤暴露血管内皮下胶原血小板激活（粘附、聚集、释放）血小板止血栓血凝块形成血管收缩凝血系统激活纤维蛋白形成（一）凝血因子(bloodclottingfactor)定义：血浆与组织中直接参与血液

3、凝固的物质。种类：13种（其中FVI是FVa，实为12种)。因子凝血因子的特点①除Ca2+和磷脂外，其余凝血因子均为蛋白质②除FIII（组织因子）外，其他凝血因子均存在于新鲜血浆中，FⅡ、Ⅶ、Ⅸ、Ⅹ在肝脏合成，需维生素K参与。③凝血因子以无活性酶原形式存在血液中，经其他酶水解后暴露或形成活性中心，才有活性，这一过程称凝血因子的激活。激活后，在该因子右下角标上“a”④在凝血中起酶促作用的因子有FⅡ、Ⅶ、Ⅸ、Ⅹ、Ⅺ、Ⅻ、XIII、前激肽释放酶。⑤在凝血中被消耗的因子是Ⅱ、Ⅴ、Ⅷ、XIII；最不稳定的是Ⅴ、Ⅷ

4、。a.凝血酶原激活物生成阶段；b.凝血酶原的激活；c.纤维蛋白的生成（二）凝血的过程ⅩⅩaVa、Ca2+凝血酶原凝血酶纤维蛋白原纤维蛋白模块1内源性凝血系统的检验内源性凝血途径定义：参与凝血的因子全部来自血液。表面激活：血液与带负电荷的异物表面接触而启动凝血的过程。凝血使动因子为Ⅻ1、静脉采血2、活化部分凝血活酶时间测定（APTT）【实验原理】在抗凝血中，加入足够量的活化接触因子激活剂（如白陶土）和部分凝血活酶（代替血小板的磷脂），再加入适量的钙离子即可满足内源凝血的全部条件。从加入钙离子到血浆凝固所需

5、的时间即称为活化部分凝血活酶时间（activatedpartialthromboplastintime,APTT）。APTT的长短反映了血浆中内源凝血系统凝血因子（Ⅻ、Ⅺ、Ⅸ、Ⅷ）、共同途径中凝血酶原、纤维蛋白原和因子Ⅴ、Ⅹ的水平。本试验是目前最常用的检查内源凝血系统敏感的筛选试验。【试剂】1．受检血浆以0.109mol/L枸橼酸钠溶液1:9抗凝，3000r/min，离心5～10min，获贫血小板血浆。2．4%白陶土-脑磷脂悬液（同ACT）。3．0.025mol/L氯化钙溶液。【操作方法】1．受检血浆、

6、白陶土-脑磷脂悬液各0.1ml，混匀，37οC水浴3min，其间轻轻振摇数次。2．加入0.025mol/L氯化钙溶液0.1ml，立即启动秒表，不停振摇并观察出现纤维蛋白丝的时间。重复2次，取平均值，同时作正常对照。【参考值】男性：37±3.3(31.5～43.5)s。女性：37.5±2.8(32～43)s。受检者的测定值较正常对照延长超过10s以上才有病理意义。【质量控制】1．抗凝剂与血液的比例要准确。2．标本放置不宜超过3h，温育时间不宜少于3min。3．分离血浆时，离心速度和时间要够，务必除去血小板

7、，特别是用于肝素治疗监测时。4．若正常对照延长，应重新配制试剂。5．APTT测定因所用的激活剂不同，以及部分凝血活酶来源及制备的不同，均可影响测定结果。6．用自动血液凝固仪测定APTT，可提高检测速度和结果精确性，但仪器本身也会产生一定误差，1995年国际血栓与止血委员会（InternationalCommitteeofThrombosisandHaemostasis,ICTH）和ICSH已开始合作研究应用APTT监测肝素治疗时的标准化问题。【临床意义】基本与凝血时间意义相同，但敏感性高。目前所用的大多

8、数APTT测定方法，凡当血浆凝血因子低于正常水平的15%～30%即可异常。1．APTT延长（超过正常对照10s以上）主要用于发现轻型的血友病。虽可检出因子Ⅷ：C水平低于25%甲型血友病，但对亚临床血友病（因子Ⅷ大于25%）和血友病携带者敏感性欠佳。结果延长也见于因子Ⅸ（血友病乙）、Ⅺ和Ⅻ缺乏症；血中抗凝物如凝血因子抑制物或肝素水平增高时；当凝血酶原、纤维蛋白原及因子Ⅴ、Ⅹ缺乏时也可延长，但敏感性略差；其他尚有肝病、DIC、大量输入库存血等。