细菌感染的病原学诊断ppt课件

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1、2021/9/11第三章细菌感染的病原学诊断褚云卓2021/9/12本章内容第一节标本的采集和处理原则第二节细菌的形态学检查第三节细菌的分离培养和鉴定第四节细菌的非培养检测方法2021/9/13第一节标本的采集和处理原则一、标本采集的一般原则1．早期采集2．无菌采集3．根据目的菌的特性用不同的方法采集4．采集适量标本5．安全采集2021/9/14第一节标本的采集和处理原则二、标本的处理1.对环境敏感的细菌如脑膜炎奈瑟菌、淋病奈瑟菌和流感嗜血杆菌等应保温并立即送检2.其他所有的标本采集后最好在2h之内送到实

2、验室3.若不能及时送检，标本应置于一定环境中保存4.一般情况下，用于细菌培养的标本保存时间不应超过24h2021/9/15５.病人标本中可能含有大量致病菌，必须注意安全防护６.标本切勿污染容器的瓶口和外壁，容器必须包装好，防止送检过程中倒翻或碰破流出７.对于烈性传染病标本运送时更要特别严格，必须按规定包装，由专人运送８.厌氧性标本应放在专门的运送瓶或试管内运送，有时可直接用抽取标本的注射器运送2021/9/16第二节细菌的形态学检查1.包括不染色标本检查法和染色标本检查法2.镜检可以了解有无细菌及大致的菌量

3、3.根据细菌形态、结构和染色性有助于对病原菌的初步识别和分类4.通过形态学检查可得到初步诊断，对临床早期诊断和治疗疾病有一定的参考意义2021/9/17第二节细菌的形态学检查一、不染色标本1.细菌不经染色直接镜检，主要用于检查生活状态下细菌的动力及运动状况2.常用的方法有压滴法和悬滴法有动力：可看到细菌自一处移至另一处，有明显的方向性位移无动力：细菌呈现布朗运动，只在原地颤动而无位置的改变2021/9/18第二节细菌的形态学检查3.有些病原菌通过不染色标本的动力检查可作出初步鉴定如疑似霍乱患者，镜下观察到来

4、回穿梭似流星状运动的细菌，制动试验阳性，可初步推断为“疑似O1群霍乱弧菌”。2021/9/19第二节细菌的形态学检查二、染色标本（一）常用染料1．碱性染料：碱性复红、结晶紫、美蓝等2．酸性染料：有伊红、刚果红等3．复合染料（中性染料）及荧光染料：复合染料有瑞氏染料（伊红美蓝）、姬姆萨染料（伊红天青）等；荧光染料有荧光标记的抗体2021/9/110第二节细菌的形态学检查（二）常用的染色方法1．革兰染色（gramstain）革兰阳性球菌革兰阴性杆菌2021/9/111第二节细菌的形态学检查2．抗酸染色（acid

5、-faststain）可将细菌分为两大类：即-抗酸性细菌-非抗酸性细菌2021/9/112第二节细菌的形态学检查3．荧光染色（1）荧光染色法敏感性强，效率高而且容易观察结果，在临床细菌鉴定中有很大的实用价值。（2）主要用于结核分枝杆菌、麻风分枝杆菌、白喉棒状杆菌及痢疾志贺菌等的检测。2021/9/113第二节细菌的形态学检查4.鞭毛染色可观察到菌体上有无鞭毛、鞭毛的位置及数量，在细菌鉴定中，特别是非发酵菌的鉴定中很重要。5.异染颗粒染色用于白喉棒状杆菌染色。2021/9/114第二节细菌的形态学检查6.芽胞

6、染色：绿色部分为芽胞2021/9/115第二节细菌的形态学检查7.墨汁染色:一般用于新型隐球菌检查2021/9/116第三节细菌的分离培养和鉴定一、培养基的种类和选择培养基的组成成分、培养基种类、培养基的选择二、分离及培养细菌的分离、细菌培养方法三、生化反应和鉴定碳水化合物的代谢试验蛋白质和氨基酸的代谢试验碳源和氮源利用试验2021/9/117第三节细菌的分离培养和鉴定一、培养基的种类和选择培养基（culturemedium）是由人工方法配制而成的，专供微生物生长繁殖使用的混合营养物制品。2021/9/11

7、8第三节细菌的分离培养和鉴定(一)培养基的组成成分1．营养物质蛋白胨、肉浸液、牛肉膏、糖类、醇类、血液、无机盐类、鸡蛋和动物血清生长因子2．凝固物质琼脂、明胶、卵白3．抑制剂和指示剂2021/9/119第三节细菌的分离培养和鉴定（二）培养基种类1．基础培养基（basedmedium）2．营养培养基（nutrientmedium）3．鉴别培养基（diferentialmedium）4．选择培养基（selectivemedium）5．特殊培养基（specialmedium）2021/9/120第三节细菌的分离培

8、养和鉴定1．基础培养基含有基础生长所需的基本营养成分，最常用的是肉浸液，俗称肉汤（broth），主要成分含牛肉浸液和蛋白胨。2021/9/121第三节细菌的分离培养和鉴定2．营养培养基（nutrientmedium）最常用的是血琼脂平板、巧克力血平板等2021/9/122第三节细菌的分离培养和鉴定3．鉴别培养基（diferentialmedium）糖发酵管、克氏双糖铁琼脂（KIA）、伊红-镁蓝琼脂和动力-吲哚-尿