关于简易法红细胞渗透脆性试验的实验建议

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1、关于简易法红细胞渗透脆性试验的实验建议黄显杨(南宁市红十字会医院广丙南宁530012)【中图分类号】R446【文献标识码】A【文章编号】1672-5085(2013)10-0211-02【摘要】目的对传统红细胞渗透脆性试验操作方法进行改进,简化实验流程。方法通过类传统实验方法,调查正常人群红细胞滲透脆性试验的医学决定水平。结果3.2g/L、4.8g/LNaCI溶液分别有占比14%、32.5%部分溶血现象。结论选择3.0g/L和5.0g/LNaCI溶液作为观察红细胞渗透脆性降低和增加的观察点,可满足辅助

2、临床诊断疾病的需要,乂简化了检验流程。【关键词】渗透脆性传统法简易法传统的红细胞渗透脆性试验方法需将5g/LNaCI溶液用蒸馏水稀释成一系列共14管阶梯浓度的盐水溶液,观察红细胞对低渗溶液的抵抗力[1],操作较为繁杂。为此笔者做了相关的实验研究,改进和简化了实验流程,取得了良好效果,现报道如下。1研究设计1.1配制5g/LNaCI溶液:将适量分析纯NaCI放入烧杯中,置100°C烤箱烘烤30分钟,充分去除水分。以分析天平准确称量5gNaCI,用容量瓶准确配制100ml溶液备用。1.2取干燥洁净的小试管

3、5支,依次编号,按表1配制不同浓度的溶液。表1红细胞渗透脆性试验表试管号1号2号3号4号5号5g/LNaCI溶液(ml)0.560.600.640.961.00蒸溜水(ml)0.440.400.360.000.04总体积(ml)1.01.01.01.01.0NaCI终浓度(g/L)2.83.03.24.85.01.3选取HGB、MCV、MCH检测结果都正常,且排除肝病、脾切除术后病人的新鲜血常规标本(EDTA-K3抗凝剂)作为研究对象;将血液标本混匀,分别吸取10ul加入1-5号管,摇匀,室温下静置5

4、分钟后观察结果,如果呈阳性结果则放置到30分钟后核查。1.4结果判断在乳白色背景下,首先以肉眼观察上清液颜色、透明度,然后以2000r/min离心1分钟,观察上清液的颜色,依据以下方式判断结果:不溶血:离心后上清液无红色;部分溶血:肉眼观察全管呈云雾状到浑浊状红色程度不等,离心后管底尚有未溶解的红细胞;完全溶血:肉眼观察全管呈清晰、透明红色,离心后管底己无红细胞或仅奋极少量红细胞残骸。2实验结果实验结果见表2。表2红细胞渗透脆性试验结果(n=157)NaCI溶液(g/L)不溶血部分溶血完全溶血例数比率

5、例数比率例数比率2.800001571003.000001571003.2002214135864.810667.55132.5005.01571000000从实验数据中可以看到红细胞滲透脆性试验3.2g/LNaCI溶液冇14%存在部分溶血现象,而4.8g/LNaCI溶液有32.5%存在部分溶血现象。根据实验结果,笔者建议将3.0g/L和5.0g/LNaCI溶液作为观察红细胞渗透脆性降低和增加的观察点,从而将繁杂的传统实验方法简缩成为简易法。3简易法红细胞渗透脆性试验3.1取干燥洁浄的小试管4支,依次

6、编号,按表3加不冋浓度的NaCI溶液。表3简易法红细胞渗透脆性试验表NaCI溶液1号2号3号4号3.0g/LNaCI溶液(ml)1.01.05.0g/LNaCI溶液(ml)---1.08.5g/LNaCI溶液(ml)1.0—3.2将待测病人血液标本混匀,分别吸取10ul加入1-3号管,摇匀;另外选择血常规检测结果HGB、MCV、MCH都正常,且排除肝病、脾切除术后病人的血液标本作为正常对照,吸取10ul加入4号管,摇匀。3.3室温静置5分钟后观察结果,如果呈阳性结果则放置到30分钟后核查。3.4报告方

7、式3.4.1红细胞渗透脆性降低试验:4号管应呈现完全溶血现象,取1号管与4号管进行比对,1号管呈现无溶血现象、或者呈现部分溶血现象,离心后管底有多量未溶解的红细胞,则报告阳性;呈现部分溶血现象,肉眼观察全管呈薄云雾状红色,离心后管底尚冇少量未溶解的红细胞,则报告弱阳性;呈现完全溶血现象,则报告阴性。3.4.2红细胞渗透脆性增高试验:3号管应呈现无溶血现象,取2号管与3号管进行比对,2号管呈现明显溶血现象则报告阳性;呈现微溶血现象则报告弱阳性;呈现无溶血现象则报告阴性。4讨论临床上检测红细胞渗透脆性试验

8、,是为了观察其增加或降低,辅助诊断一些相关疾病。有相关文献说明,选择浓度为3.2g/L(或3.6g/L)NaCI溶液试验,可观察红细胞渗透脆性降低情况[2],而选择5.0g八NaCI溶液试验,可观察红细胞渗透脆性增加情况[1]。本研究结果表明,选择3.0g/L和5.0g/LNaCI溶液加上各自的正常对照管,用EDTA-K3抗凝全血(血常规标本)做实验,既可满足辅助临床诊断疾病的需要,又简化了检验流程。参考文献[1】叶应妩,王毓三,申子瑜.全国临床检验操作

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