二氧化氯对灵芝菌丝生长的影响

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1、二氧化氯对灵芝菌丝生长的影响党建章,朱海兰，杨智伟，黄仕容【关键词】二氧化氯；,,灵芝；,,菌丝生长　　摘要：目的探讨二氧化氯作为消毒剂应用于灵芝栽培和液体培养。方法平板法测定灵芝菌丝的生长和摇瓶发酵法测定灵芝的生物量。结果在未高温灭菌的培养基中添加0.7%（v・v-1）的二氧化氯，灵芝菌丝生长良好；灵芝菌丝液体发酵重量接近对照组。结论为灵芝栽培和液体发酵培养奠定基础。　　关键词：二氧化氯；灵芝；菌丝生长　　TheEffectsofChlorineDioxideontheMyceliumGroaluc

2、idum　　Abstract：ObjectiveToexploretheapplicationofchlorinedioxideasantisepticincultivationandsubmergedculturalofGanodermalucidum.MethodsThemyceliumgroaluciduminedbyplateculturemethodandbiomassbysubmergedculturemethod.ResultsMyceliumofGanodermalucidumgree

3、closetothecontrastediumperature.ConclusionThisprovidesafirmfoundationforthecultivationandsubmergedcultureofGanodermalucidum.　　Keyalucidum；Myceliumgroalucidum作为药用真菌其功效已家喻户晓。近年来灵芝作为保健食品和美容化妆品的添加剂，其应用日益广泛。传统方法栽培灵芝，培养料均要高温灭菌。笔者在筛选灵芝培养的消毒剂时，发现二氧化氯对各类微生物都有较强的

4、杀灭和抑制作用，而且对人畜无害〔1〕，但对灵芝菌生长却作用甚微。本文初步研究了不同浓度二氧化氯对灵芝菌丝生长的影响，以及7种不同灵芝菌耐受二氧化氯的能力。　　1材料与仪器　　1.1供试菌种赤芝（Ganoderma.lucidum）AS.565，由本系提供。美国灵芝、日本灵芝、惠州灵芝、信州灵芝、紫芝、黑芝均购自山东金乡真菌研究所。杨树菇、云芝、茯苓、茶新菇、金针菇均购自华中农业大学。霉菌（黑曲霉、根霉、青霉），细菌（大肠杆菌、枯草杆菌）由本系提供。　　1.2斜面培养基（%）马铃薯（去皮）20；葡萄糖2

5、；KH2PO40.3；MgSO4・7H2O0.15；琼脂2；pH6.5。　　1.3摇瓶种子和发酵培养基（%）葡萄糖20g；蛋白胨10g；酵母膏2g；水1000ml；pH自然。　　1.4药品二氧化氯（ClO2）为深圳市科瑞德消毒用品科技开发有限公司产品，商品制剂ClO2含量为2%（YSS-325TOMYKOGYOCO.LTD.日本，MFS-11多功能三维旋混仪（摇瓶机）深圳潘西诺生物科技有限公司。　　2方法　　2.1ClO2对霉菌和细菌的抑制作用每个培养皿中加入20ml斜面培养基，趁热加入ClO2，摇匀

6、，使ClO2制剂最终浓度为0.1%～1.0%（每100ml培养基中加ClO2制剂0.1～1.0ml），以未加ClO2并经高压灭菌过的培养基作为对照。涂布法接种霉菌和细菌，每个浓度每种菌各接3个培养皿，霉菌置于28℃、细菌置于37℃恒温培养，隔天观察生长情况，培养5d。　　2.2ClO2对赤芝的抑制作用方法同上述，ClO2浓度为0.1%～5.0%，每个浓度设3个重复。接入赤芝菌丝，置于28℃恒温培养，隔天观察菌丝生长情况，培养10d。　　2.3ClO2对其他种灵芝及食用菌的影响根据上述实验结果，确定培养

7、赤芝时ClO2的最适浓度为0.7%。在斜面培养基中，加入ClO2，使其最终浓度为0.7%。接入其他灵芝菌和食用菌，每种菌种设3个重复，培养8～12d。　　2.4ClO2对灵芝摇瓶培养的影响将葡萄糖、蛋白胨培养基1000ml装入3000ml三角瓶中，加入0.7%ClO2，立即用保鲜膜密封,摇匀,放置1h，然后用灭过菌的棉塞替换保鲜膜，另设对照组，接入赤芝液体菌种，接种量10%。放入多功能三维旋混仪中培养，摇瓶温度30℃、转速为150r/min。摇瓶3～4d，发酵液有浓厚的灵芝特有的气味，并伴有大量的菌丝

8、球时，可终止发酵。将发酵液在100目筛网中过滤，用自来水反复冲洗，然后将菌丝体置于80℃烘干至恒重，称重。以每升培养基中含菌丝干重表示（g・L-1）。　　3结果　　3.1ClO2对霉菌、细菌的抑制作用由表1可知，对照管5d之内都长满，而0.1%～1.0%的ClO2对上述微生物有明显的抑制作用。其中真菌比原核微生物耐受ClO2的能力强。　　表1ClO2对霉菌、细菌的抑制作用（略）　　+++表示菌丝或菌落长满平板；-表示无菌丝或菌落生长　　3.2不同浓度Cl