皱皮木瓜总黄酮镇痛作用的机制分析论文

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1、皱皮木瓜总黄酮镇痛作用的机制分析论文【摘要】目的探讨皱皮木瓜总黄酮（FLC）的镇痛作用及其镇痛机制。方法利用小鼠热板、扭体法模型和兔耳皮下K+渗透外周致痛模型，观察FLC的镇痛作用，并分析与Ca2+的关系。结果FLC不仅具有全身镇痛作用，还具有外周镇痛作用；其全身及外周镇痛作用可被CaCl2拮抗，被EGTA所加强。5%，10%和20%FLC呈浓度依赖性抑制50mmol·L-1K+诱导蟾酥坐骨神经Ca2+含量增加；10%FLC抑制10-5mmol·L-1NE诱导蟾酥坐骨神经Ca2+含量增加。结论FLC的镇痛作用机理可能与其抑制神经组织钙通道和非神经组织钙通道，减少致痛介质释放等因素有关。【

2、关键词】皱皮木瓜总黄酮钙离子坐骨神经镇痛作用植物中的黄酮类化合物具有多种药理活性。近年来发现芦丁、银杏叶总黄酮、金丝桃苷和黄芩苷等生物黄酮类化合物均有较强的镇痛作用［1～5］。本实验室以前的研究发现皱皮木瓜的乙醇提取物具有镇痛作用［6］。为了进一步寻找其中的有效部位，本文利用皱皮木瓜总黄酮组分.freelin痛阈值。2.2小鼠扭体法取昆明种小鼠50只，普通清洁级，雌雄不拘，体重18～22g，随机分为5组，每组10只。分组及用药剂量见表2。各组小鼠给药40min后，腹腔注射0.6%冰醋酸0.2ml/只，观察注射醋酸后30min内扭体反应（后肢伸直，背部抬高，腹部凹陷）次数作为致痛的指标。2

3、.3家兔耳皮下K+渗透外周致痛模型实验取家兔30只，体重1.5～2.0kg，随机分5组，分组及用药剂量见表3。置家兔于兔盒中，在耳根部中央动脉顺血流方向用7#针头刺入后，立即注入0.5ml肝素进行局部抗凝处理并固定；将耳背部内、外两侧耳缘静脉近心端分别用7#注射针头沿静脉血流方向逆向刺入并引流至体外，用蛙心夹夹住静脉以阻断其回流。在耳尖部固定一金属圈，直径约0.8cm，充以饱和氯化钾溶液棉球，作为刺激电极正极，在耳根部固定一相同金属圈，充以生理盐水棉球，作为参考电极，两电极连上BL-420E+生物机能实验系统，逐步加大刺激电流，以引起家兔挣扎时的最小刺激电流为痛阈指标,制成兔耳皮下K+渗

4、透外周致痛模型，分别测定并记录给药前后痛阈，按以下公式，求出镇痛效应。镇痛效应（%）=（给药后痛阈－给药前痛阈）/给药前痛阈×100%同法测得给药前后对侧兔耳痛阈值的变化，以排除药物从侧枝循环回流至全身产生的全身镇痛效应。2.4坐骨神经钙含量的测定按文献方法制备蟾蜍坐骨神经标本。标本称重，随即将神经标本浸在4℃的任氏液中1h，分别加入50mmol·L-1KCl和10-5mol·L-1NA，刺激钙通道开放，以增加钙离子内流，继续在4℃任氏液中保存1h后取出标本，用无钙任氏液冲洗2次，以冲去标本表面上的钙离子，滤纸吸干，放入去离子水清洗的坩锅内待消化。FLC组则在未使用激动剂前将标本浸在不同

5、浓度的FLC中30min，再分别放入上述相同的激动剂中，后续处理相同。所有标本分别加入混合酸（硝酸0.9，高氯酸0.1）1.0ml在电热板上徐徐加热，消化至无色，待高氯酸冒烟时取下，加入2%HCl溶解，再加入500ppm镧盐(促钙释放剂)，定溶后待测。采用HITACHIZ-2000型原子吸收分光光度计测定（测定波长42207nm，灯电流10mA，狭缝0.7nm）。见图1～2。2.5统计学处理所有数据依据SPSS10.0版统计软件进行t检验分析处理。3结果3.1FLC对热板法致痛实验小鼠痛阈的影响结果见表1。表1FLC对实验小鼠痛阈的影响（略）与NS比较,.freelolNA+10%FLC

6、与10-5molNA组钙离子比较明显降低（P＜0.05），而NA+10-4molNif组降低并不显著。5%、10%和20%的FLC可浓度依赖性降低由50mmolK+所诱发的坐骨神经钙含量降低（P＜0.05）。见图2。说明FLC对电压依赖性的钙通道的阻滞作用大于受体操纵性钙通道。4讨论皱皮木瓜为蔷薇科植物贴梗海棠Chaenomelesspeciosa(Sentanddisease［J］.CurrOpNeurobiol，2001，11(3):327.