泡桐花总黄酮抗哮喘豚鼠气道炎症的作用机制探讨论文

《泡桐花总黄酮抗哮喘豚鼠气道炎症的作用机制探讨论文》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在学术论文-天天文库。

1、泡桐花总黄酮抗哮喘豚鼠气道炎症的作用机制探讨论文陈保红，李寅超，赵宜红，傅蔓华【关键词】豚鼠；,.freelaticmodel,inducedbyOVAinisteredbyintragastricgavage(ig)berofacidophilsandtheEotaxininbronchoalveolarlavagefluid(BALF)mationsignificantly.Thenumberofacidophilsandtotal.ConclusionTheresultssuggestthatflavonoidsinFructusPaulomationbyinhibitingthe

2、overexpressionoftheEotaxinintracheaepithelium.Keysl.)Hemsl;Flavonoids;Bronchiaasthma气道炎症是支气管哮喘(asthma)的病理基础，有多种炎症细胞、炎症介质和细胞因子参与其炎症过程［1］。研究发现［2］嗜酸性粒细胞（EOS）趋化聚集，在气道炎症的形成过程中起重要作用，Eotaxin是EOS的选择性趋化剂［3］，也是EOS在哮喘发病过程中选择性增加的原因。因此，调控Eotaxin的过度表达，抑制EOS在气道内的募集，消除气道炎症，对治疗哮喘具有关键性意义。根据文献报道［4，5］，少常用草药泡桐花在支气管哮喘

3、的临床治疗上具有一定的效果；泡桐花浸膏能够明显改善哮喘豚鼠肺组织的病理损伤，对哮喘豚鼠有显著的治疗作用；泡桐花主要成分［6］为挥发油、总黄酮、熊果酸等，其中总黄酮含量较丰富（3.081%）。我们以泡桐花总黄酮为研究对象，采用ig给药途径，结合图象分析技术探讨其抗哮喘作用及其机制。1材料与方法1.1动物与分组健康白化豚鼠，雌雄各半，体重（200±50）g，由河南省实验动物中心提供。随机分为模型、阳性、空白对照组和泡桐花总黄酮大、小剂量组。10只/组。1.2药品与试剂卵白蛋白（ovalbumin，OA）：Sigma公司，GradeⅢ；Eotaxin一抗(BA1469，Rabbitanti-E

4、otaxin)武汉博士德生物工程有限公司，相应二抗试剂盒及阳性对照片购自北京中山生物技术有限公司；醋酸地塞米松片，浙江仙琚制药股份有限公司，批号051247。泡桐花总黄酮由郑州大学药学院生药学研究室提供。1.3动物诱喘及用药参照宫兆华［7］方法，常规饲养观察3d无异常后，予10％OA生理盐水(N.S)溶液200mg/kgip致敏，并于当天开始按表1剂量给药。第15天时，予5%OA的N.S溶液雾化吸入诱导哮喘发作。用哮喘发作（动物取出后的表现为咳嗽、呼吸困难、烦躁、抽搐、跌倒甚至死亡)的动物进行实验。1.4用药过程中哮喘防治作用观察用药第5，12天及第15天，3次对豚鼠进行激发实验。予5%

5、OA的N.S溶液雾化吸入激发10s，封闭时间共20s，观察记录各组动物哮喘严重程度，取第15天的引喘潜伏期（自雾化开始至豚鼠腹肌痉挛、腹部凹陷出现的时间作为引喘潜伏期，超过6min者以360s计算）为统计指标。在第5，12天的激发过程中，先后有8只动物（大、小剂量组各2只，模型组3只，阳性组1只）因反应剧烈，抢救不及而窒息死亡。1.5BALF（bronchoalveolarlavagfluidBALF）的采集与细胞计数暴露豚鼠气管肺，用丝线结扎右肺门处，行气管插管灌洗左肺。灌入N.S5ml（抽吸2次）×2次，灌洗回收率大于80%，无菌离心（1500r/min×10min），沉淀细胞以Ha

6、nks液处理后即刻在显微镜下计数细胞总数，细胞浓度调至2×106/ml，涂片，瑞氏染色，计数白细胞总数和EOS数。1.6免疫组化Eotaxin检测摘取右肺中叶，放入乙醇、醋酸和甲醛混合固定液中固定48h。石蜡切片（4μm×3张）脱蜡至水，行免疫组化Eotaxin（EOS趋化性细胞因子）染色。免疫组化操作按说明书进行，DAB显色。另设不加一抗的切片作阴性对照。每只动物在细支气管黏膜各随机选择5个Hot视野，计算机图像分析系统检测每个Hot视野Eotaxin表达阳性信号的积分光密度IOD，以平均值表示该动物气道Eotaxin阳性表达水平。1.7统计学处理所有数据以±s表示，使用SPSS11.

7、0统计软件进行分析。2结果2.1泡桐花总黄酮对豚鼠引喘潜伏期的影响结果表明，各组造模动物的引喘潜伏期均较正常组缩短，表明造模动物皆发生了哮喘反应；各用药组与模型对照组比较具有显著性意义，P0.05或0.01，说明各用药组对哮喘具有不同程度的保护作用。结果见表1。表1泡桐花总黄酮对豚鼠引喘潜伏期的影响（略）与模型对照组比较，*P0.05，**P0.012.2对BALF中白细胞总数与EOS计数的影响结果表明，泡桐花总黄酮大剂量和阳性药对