中性蛋白复合酶法提取大枣多糖的研究论文

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1、中性蛋白复合酶法提取大枣多糖的研究论文【摘要】目的考察中性蛋白复合酶法提取大枣多糖的工艺，并验证大枣多糖的部分药理作用。方法对不同提取方法作对比；以多糖的得率和纯度为指标，对效果较佳的中性蛋白复合酶提法安排正交实验，筛选提取工艺；最后进行动物实验。结果确定中性蛋白复合酶法提取的最佳工艺为：酶液浓度0.15%，pH7.5，提取温度37℃；大枣多糖的药理实验表明大枣多糖属无毒级，大枣多糖大、中、小剂量对S180小鼠巨噬细胞吞噬率均有不同程度的提高作用。结论中性蛋白复合酶法提取大枣多糖工艺有效可行。【关键词】大枣多糖；中性蛋白复合酶；提取；药理实验Abstract：ObjectiveTostu

2、dytheextractiontechnologyforpolysaccharidebypoundneutralproteasefromZiziphusjujuba,andtotestthepharmacologicalfunctionofthepolysaccharide.MethodsDifferentmethodsofpolysaccharideextractionethod,thepoundneutralproteaseextraction,theorthogonalexperimentsacologicalexperimentsumconditionsatepharmacolo

3、gicexperimentsaboutZizyphusjujubapolysaccharideshoacrophagephagocytosisofS180tumormice.ConclusionTheacologyexperiment大枣为鼠李科植物枣ZizyphusjujubaMill的成熟果实［1］，营养丰富.freell，每隔4h重复1次，共3次，观察动物死亡数和死亡时间。给与A组灌胃等剂量生理盐水。结果未见动物死亡，亦未见动物有其他反应。表明动物最大耐受量在27.0g·kg-1以上，相当于原生药675g·kg-1，属无毒级。2.3.2大枣多糖对S180实体瘤小鼠巨噬细胞吞噬功能的

4、影响取ICR品系小鼠50只。将接种7d的S180实体瘤腹水型小鼠，消毒腹部皮肤，断头处死，抽取腹水，稀释3倍后，接种于各小鼠左侧腋下，皮下接种，每只0.2ml。接种后第2天，称重，按体重分层随即将小鼠分为A，B，C，D，E5组，A组为S180实体瘤对照组，B，C，D组分别为大、中、小剂量大枣多糖组，E组为环磷酰胺组。分组后开始给药，A组以生理盐水灌胃，B，C，D组分别按剂量为675，225和75mg·kg-1的大枣多糖药液灌胃；E组灌胃剂量为每只0.6mg（30mg·kg-1）。以上各组均连续用药7d。于第7天前72h腹腔注射0.5%无菌淀粉盐水0.1ml/只，于第7天再注射淀粉溶液1次

5、，1h后腹腔注射0.5%鸡红细胞0.1ml/只，6h后脱臼处死小鼠，取腹腔液涂片染色镜检。油镜下计数200个巨噬细胞，观察吞噬鸡红细胞的巨噬细胞数目。结果以吞噬率表示。结果见表4。表4大枣多糖对S180实体瘤小鼠巨噬细胞吞噬功能的影响（略）结果表明，大枣多糖大、中、小剂量对S180小鼠巨噬细胞吞噬率均有不同程度的提高作用，其中大、中剂量组有显著作用，有效剂量为225mg·kg-1，小剂量组提高不明显。3讨论纯酶自身成本较高，酶的介入会直接增加大枣多糖提取的成本费用，而这种复合粗酶使用成本较低，其中还含有少量的纤维素酶、半纤维素酶、果胶酶、淀粉酶、这些酶相互之间可以产生协同作用，无疑对大枣

6、多糖的提取十分有利。其中的主要成分中性蛋白酶主要可以使糖蛋白和蛋白聚糖中游离的蛋白质水解掉，那么，原有的除蛋白工艺步骤可以省略，进而简化了提取工艺，同时也可以达到一个较好的提取效果。【