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1、石花菜提取物对酪氨酸酶活性的影响研究江苏省高校自然科学研究重大(No.10KJA170003)资助项目唐丽娟钱丽刘玮炜李盈蕾史大华(淮海工学院化学工程学院，江苏连云港222005)摘要：以邻苯二酚为底物，研究了石花菜提取物对马铃薯酪氨酸酶活性的影响。结果表明，石花菜提取物对马铃薯酪氨酸酶具有激活作用，微波辅助水提物激活率高于常规条件下的水提物和醇提物。相对激活率达到50%的水提取物质量浓度(Ic50)约为0.76mg/mL。对酶的催化反应动力学研究结果表明石花菜水提物浓度为0.1、0.5、0.7、1.0mg/mL，得到Km值分别为0.033、0.024、0.017、0.011mmol/L，Vm
2、值分别为4.00、4.62、5.12、5.50umol/L·min。石花菜水提物对酪氨酸酶的激活类型属于混合型激活。作为酪氨酸酶激活剂在医药、化妆品等方面有着潜在的应用价值。关键词：石花菜；酪氨酸酶；提取物StudyontheeffectofedibleseaweedextractonthetyrosinaseactivityTangLi-juanQianLiLiuWei-weiLiYing-leiShiDa-hua(Dept.ofChemicalEngineering,HuaihaiInstituteofTechnology,Lianyungang222005,China)Abstract：
3、Theeffectofedibleseaweedextractonthetyrosinaseactivitywasstudiedwhencatecholasthesubstrat.Resultsshowedthattheextractofedibleseaweedhastheactivationeffectonthetyrosinaseactivity,andactivationrateofthemicrowave-assistedwaterextractwasmorethanthedirect-heatingwater’sandtheechol’s.Themicrowave-assisted
4、waterextractleadingtoIc50is0.76mg/mL.TheactivationkineticsoftheextractanalyzedbyLineweaver-Burkplotswasshowntobemixedactivatorcharacteristicsfortheoxidationofcatechol.Whentheextractconcentrationare0.1,0.5,0.7,1.0mg/mL,theKmvaluesare0.033,0.024,0.017,0.011mmol/L,andtheVmvaluesare4.00,4.62,5.12,5.50um
5、ol/L.Keywords:edibleseaweed;tyrosinase;extract酪氨酸酶（多酚氧化酶，EC1.14.18.10,）是含铜的金属酶，主要来源于微生物、动物和植物，是生物体包括人、动植物黑色素细胞合成黑色素的关键酶，也是促使黑色素细胞和蔬菜水果褐变的酶。无论是对酪氨酸酶起抑制作用还是激活作用的物质在食品、医药、农药、化妆品等方面均具有可研究的价值，如酪氨酸酶抑制剂可用来预防和治疗色素沉着和黑色素瘤等、可用作食品保鲜；可用为杀虫剂及化妆品[1-3]；而有乌发作用的旱莲草、用于治疗白癜风中药方剂中的降香等具有酪氨酸酶的激活作用[4-5]。本文选取地方特产海洋蔬菜石花菜为研究
6、对象，探索其提取物对马铃薯酪氨酸酶活性的影响，以提高其在食品、医药等方面的开发价值。1实验部分1.1主要试剂和仪器石花菜(购于连云港海产品直销市场),马铃薯,市售;无水乙醇、邻苯二酚、氢氧化钠、磷酸二氢钾、维生素C均是市售的国产分析纯；实验用水是蒸馏水；UV759S-紫外可见分光光度计（上海精密科学仪器有限公司），TGL-16高速台式离心机；旋转蒸发仪（PE-2000，浙江舟山市定海区海源仪器厂）,鼓风干燥箱（浙江舟山市定海区海源仪器厂）。1.2实验方法1.2.1石花菜提取物的制备将洗净晾干的石花菜放入80℃烘箱烘干至恒重，粉碎后待用。称取3g石花菜置于圆底烧瓶中，加入300mL蒸馏水，浸软3
7、0min，回流提取约90min，将水提取液抽滤后收集滤液，滤渣重复提取2次，合并三次浸提液，于10000r/min高速离心机中离心15min，取上清液，真空干燥后称量得石花菜水提物。蒸馏水换成无水乙醇按上述方法处理得到石花菜乙醇提取物。微波辅助水提石花菜：在温度80℃，料液比1:40，功率600W，时间5min条件下进行提取，其他同上。1.2.2马铃薯酪氨酸酶的提取及活性的最大吸收波长的测定马铃薯
