氢生理盐水对大鼠肝大部切除后小肝综合征的保护作用及机制研究硕士学位论文

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1、●夕——，上毒六硕士学位论文氢生理盐水对大鼠肝大部切除后小肝综合征的保护作用及机制研究Hydrogen—RichSalinePreventsSmall—For-SizeSyndrome—InducedLiverInjuryafterPartialHepatectomyinRats研究生姓名：谈运长学号：20091320指导教师：杨甲梅教授第二军医大学第三附属医院学科、专业：外科学(普外)学位类型：临床型学位答辩日期：2012年5月二O一二年三月十五日2独创性声明本人声明所呈交的学位论文是我个人在导师指导下进行的研究工作。除了文中特别加以标注和致谢的地方外，论文中不包含其他人已经发表或撰

2、写过的研究成果。与我一同工作的同志对本研究所做的任何贡献均己在论文中作了明确的说明并表示谢意。本人承担本声明的法律责任。学位论文作者签名：泸敝年月日历-五年6闰；国学位论文版权使用授权声明本人完全了解第二军医大学有关保留、使用学位论文的规定，第二军医大学有权保留并向国家有关部门或机构送交论文的复印件和电子版，允许论文被查阅和借阅。本人授权第二军医大学可以将学位论文全文或部分内容编入《中国学位论文全文数据库》、《中国优秀博硕士学位论文全文数据库》等数据库进行检索。可以采用影印、缩印或扫描等复制手段保存、汇编学位论文。(保密的学位论文在解密后适用本授权书)／学位论文作者签名：废这良导师签名

3、：磊铉日期：庐眸6月岁日魄／锄石4四、参考文献··········一一一一一一．．一一一一一一一一一一9第二部分：氢生理盐水对大鼠90％肝切除后小肝综合征的保护作用及机制研究一、材料和方法·····························一一一””一10二、结果··········································一一．．17三、讨论··········································一··一23四、参考文献································一”一一．．一26综述：氢气预防肝脏损伤的研究

4、进展··············“一．．一”28论文撰写情况···································一·”一．．33氢生理盐水对大鼠肝大部切除后小肝综合征的保护作用及机制研究摘要研究方法1．90％肝切除模型制备：根据Martins等方法进行改良。本实验中，乙醚麻醉，取上腹部正中切口，用丝线分别结扎肝左叶、中叶、右下叶及右上叶，并予90％肝切除，观察剩下的尾状叶无淤血后关腹。2．实验分组及处理：大鼠被随机分成三组：A组(n=60)、B组(n=40)、C组(n=40)。A组大鼠用于观察5天牛存期，B和C组大鼠分别于术后2小时和24小时处死。根据不同的处理，A、

5、B、C三组又分别分四个小组：A1、B1、C1(假手术)，A2、B2、C2(90％肝切除+5ml／kg牛理盐水)，A3、B3、C3(90％肝切除+5ml／kg氢生理盐水)，A4、B4、C4(90％肝切除+10ml／kg氢生理盐水)。术毕和术后每8小时，大鼠腹腔注射氢牛理盐水(5或10ml／kg)或生理盐水(5ml／kg)。3．处死大鼠由下腔静脉取血5ml静置析取血清和液氮冰冻肝组织留待检测：全自动生化分析仪测定大鼠血清TBIL、DBIL、ALT、AST含量；通过特定的化学方法测定大鼠肝组织中的丙二醛(MDA)年I超氧化物歧化酶(SOD)；ELISA法测定大鼠肝组织中促炎因子TNF．a、I

6、L．6和HMGB．1的浓度；通过放射测量法测定血清中透明质酸(HA)的含量；大鼠肝组织病理切片H&E染色观察肝细胞损伤，以及CD31／PECAM．1抗体染色和NF．r,Bp65抗体染色分别观察内皮细胞的损伤和抗炎作用。实验结果1．90％肝切除后，对照组大鼠的5天生存期为20％，氢牛理盐水组(HS，5mg／kg和10mg／kg)分别是53．3％和60％。这些数据表明HS可以明显延长肝大部切除后小肝综合征引起肝衰的大鼠牛存期。2．90％大鼠肝切除后，血清TBIL、DBIL、ALT和AST显著升高，HS可以明显降低血清中TBIL、DBIL、ALT和AST的水平，减轻肝细胞的损伤；HS显著降低

7、血清中透明质酸的含量，减轻内皮细胞的损伤。3．HS显著降低肝组织中的丙二醛(MDA)的含量和增加超氧化物歧化酶(SOD)的活性，具有明显的抗氧化作用。4．HS显著的降低肝组织中的TNF．a、IL．6和HMGB．1，具有明显的抗炎作用。5．NF．rBp65抗体染色显示，HS的抗炎抗氧化的作用可能与减少NF．KB的激活有关。结论氢牛理盐水(HS)通过抗炎抗氧化的作用，可以预防肝大部切除后小肝综合征引学位论文，其机制可能与抑制NF．kB的激活有关。理