生物药物基础

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1、填空题1.基因工程又称重组DNA技术或基因克隆技术。2.医药生物技术包括基因工程技术、细胞丁程技术，酶T程技术，发酵T程技术。3.各种限制酶的切割类型各异，切割后形成各种类型的黏性末端和平整末端。4.大肠杆菌DNA聚合酶1具有三种酶活性：5’-3’聚合酶活性、5’-3’核酸外切酶活性，3’-5’核酸外切酶活性。5.Klerww聚合酶的活性：5’-3’聚合酶活性，3’-5’核酸外切酶活性。6.基因工程药物，获得目的基因的三种方法是化学合成法,构建基因文庳法,鹽促合成法O7.重组体分子导入受体细胞的途径有转化、转染、转导、电穿孔、显微注射。8.显微注射应用于转基因动物，基因枪轰击

2、法用于转基因植物。9.常用的促融剂是PEG聚乙二醇。10.杂种细胞形状，按表型可分为互补作用,激活作用，消失作用，激活与消失作用。11.药用酶的生产方法可分为提取分离法、生物合成法、化孚合成法。12.生产药用酶的微生物有鈕直、直直、放线菌、酵母。13.外源0的基因在原核细胞中的表达形式包括：包涵体、融合蛋白、寡聚型外源蛋白、整合型外源蛋白、分泌型外源蛋白。名词解释1.生物制药是指利用生物体或生物过程生产药物的技术。2.生物制药技术是一门讲述生物药物，尤其是生物工程相关药物的研制原理、生产工艺及分离纯化技术的应用学科。3.碱性磷酸酶的共同待性是能够催化核酸分子脱棹5’一p基团。

3、4.穿梭质粒载体是指一类由人工构建的具有两种不同复制起点和选择标记，因而可在两三种不同的寄主细胞中存活和复制，并可以携带着外源DNA序列在不同物种的细胞之间往返穿梭的质粒载体。5.黏粒乂称柯斯质粒，是一类由人工构建的含有入DNA黏性末端cos序列和质粒复制子的杂种质粒载体。6.受体细胞是指在转化和转导（感染）屮接受外源棊因的宿主细胞。7.包涵体是外源基因的高表达产物在源核细胞中积累，并致密地聚集在一起形成的一种水不溶性蛋白质结构。8.流式细胞仪可定量测定某一细胞中的DNA、RNA或某一特异蛋白的含量以及细胞群体中上述成分含量不同的细胞数量。1.原生质体表示植物和微生物细胞除去

4、细胞壁后的一种细胞结构。2.培养基是人们提供微生舞生长繁殖和生物合成各种代谢产物所需要的按一定比例配制的多种营养物质的混合物。3.切U平移反应当双链DNA的一条链产生缺U时，DNA聚合酶T的5’-3’聚合酶将脱氧核苷酸加添到3’-OH末端上，与此同时，其5’-3’核酸外切酶从缺口的5’-P末端切除原有核苷酸，使切口沿着DNA平移，又称为缺口翻译。简答题1.生物药物的性质？（1）在化学构成上，生物药物十分接近于人体内的正常生理性质，进入人体后也要容易为机体所吸收和参与人体的正常代谢与调节；（2）在药理上，生物药物具有更高的生化机制合理性和特异诊疗有效性（3）在医疗上，生物药物具

5、有药理活性、针对性强、毒性低、副作用小、疗效可靠及营养价值高等特点；（4）生物药物的有效性成分在生物材料中的浓度低，杂质的含量相对比较高；（5）生物药物常常是一些生物大分子，它们不仅相对分子质量大，组成结构复杂，而且具有严格的空间构象以维持其特定的生理功能。（6）生物药物对热、酸、碱、重金属及PH变化都比较敏感，各种理化因素的变化易对生物活性产生影响。2.应用基因工程技术生产生物药品的优点？（1）可大量生产过去难以获得的生理活性蛋白和多肽，为临床使用提供有效的保障；（2）可提供足够数量的生理活性物质，以便对其生理、生化和结构进行深入的研究，从而扩大这些物质的应用范围；（3）可

6、以发现、挖掘出更多的内源性生理活性物质；（4）可以改造和去除内源生理活性物质作为药物使用时存在的不足之处；（5）可获得新型化合物，扩大药物筛选来源。3.基因工程技术的步骤？（1）外源目的基因的取得；（2）基因运载体的分离提纯；（3）重组DNA分子的形成；（4）重组DNA引入受体细胞；（5）重组菌的筛选、鉴定和分析；（6）工程菌的获得和基因产物的分离4.基因工程制药中常用的克隆载体？质粒、入噬菌体、黏粒、噬菌粒、病毒、M13噬菌体5.高效表达外源基因的基本策略？（1）优化表达载体的构建；（2）提高稀冇密码子的表达频率；（3）构建基因高效受体菌；（4）提高外源棊因表达产物的稳定性

7、：（5）优化工程菌的发酵过程1.目的基因的设计应考虑的问题?寡核苷酸片段划分的长度；限制酶位点；排除基因内部正反向重复顺序；选择表达宿主偏爱的密码子；加起始与终止密码子；基因表达因素等。论述题（p84）抗生素抗性基因插入失活法根据抗生素抗性基因插入失活原理而设计的插入失活法是重组体常川的筛选A法。如非重组的PBR322质粒DNA上的四环素和氨苄青霉素抗性基因都是正常的，表型为AprTcr。带有这种质粒的受体菌可以在加有四环素和氨苄青霉素的双抗性平板上生长。但是，如果在该质粒的四环素抗性基因A插入外援片段