《脂质体制备方法》word版

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1、微脂体(又称脂质体)及其制备方法一二微脂体(又称脂质体)   微脂体起源于1960年代中期，Bangham博士等人首先提出，在磷酸脂薄膜上加入含盐分的水溶液后，再加以摇晃，会使脂质形成具有通透性的小球；1968年，Sessa和Weissmann等人正式将此小球状的物体命名为微脂体（liposome）并做出明确的定义:指出微脂体是由一到数层脂质双层膜(lipidbilayer)所组成的微小的囊泡，有自行密合（self-closing）的特性。微脂体由脂双层膜包裹水溶液形成，由于构造的特性，可同时作为厌水性（hydrophobic）及亲水性（hydrophilic）药品的载体，厌水性药品可以嵌

2、入脂双层中，而亲水性药品则可包覆在微脂体内的水溶液层中。如同细胞膜，微脂体的脂质膜为脂双层构造，由同时具有亲水性端及厌水性端的脂质所构成，脂双层由厌水性端相对向内而亲水性端面向水溶液构成，组成中的两性物质以磷酸脂质最为常见。微脂体的形成是两性物质在水溶液中，依照热力学原理，趋向最稳定的排列方式而自动形成。微脂体的性质深受组成脂质影响，脂质在水溶液的电性，决定微脂体是中性或带有负电荷、正电荷。此外，磷酸脂碳链部分的长短，不饱和键数目，会决定微脂体的临界温度(transitiontemperature,Tc)，影响膜的紧密度。一般来说，碳链长度越长临界温度越高，双键数越多则临界温度越低，常见的

3、DPPC(dipalmitoylphosphatidylcholine)与DSPC(distearoylphosphatidylcholine)的临界温度分别是42℃与56℃，而EggPC(eggphosphatidylcholine)与POPC(palmitoyloleoylphosphatidylcholine)的Tc则低于0℃。临界温度影响微脂体包裹及结合药物的紧密度，当外界温度高于Tc时，对膜有通透性的药物，较容易通过膜；此外，当外界温度处于临界温度时，微脂体脂质双层膜中的脂质，会因为流动性不一致而使微脂体表面产生裂缝，造成内部药物的释出。在磷脂质内加入胆固醇，会对微脂体性质产生下

4、列影响：增加微脂体在血液中的安定性，较不易发生破裂；减少水溶性分子对微脂体脂膜的通透性；增加微脂体的安定性，使其在血液循环中存在的时间较长。   微脂体可依脂双层的层数或是粒子大小，加以命名或分类：   (1)Multilamellarvesicle（MLV）是具有多层脂双层之微脂体，粒子大小介于100-1000nm，特色是粒子内具多层脂质膜，一般而言，干燥后的脂质薄膜，直接水合后，即形成MLV，体积通常较为庞大，脂质含量较高。MLV的脂双层数，一般在五层以上；小于五层的MLV又称为oligo-lamellarliposomes或paucilamellarvesicle。  (2)Larg

5、eUnilamellarVesicle(LUV)则是单层脂双层所构成的微脂体，一般指1000nm等级(250-2500nm或更大)的微脂体，动物细胞便是一种LUV。  (3)Intermediate-sizedUnilamellarVesicle(IUV)也是单层脂双层所构成的微脂体，一般指100nm等级(25-250nm)的微脂体。不过，目前一般文献已经很少使用IUV，而是将它并入SUV中。  (4)SmallUnilamellarVesicle(SUV）是单层脂双层所构成的小微脂体，早期的分类指特定磷酸脂所能够成的最小微脂体(一般以超音波震荡制成)。如eggPC以生理食盐水(norma

6、lsaline)水合的SUV是15nm；DPPC则是25nm。  制备微脂体最传统的方法是薄膜摇振法。如今已经发展出非常多种制备微脂体的方法，包括：  1.)薄膜摇振法（Thinfilmmethod;Hand-shakingmethod）：又称做Bangham’smethod，将脂质以有机溶剂如氯仿（chloroform）、甲醇（methanol）及乙醇（ethanol）等溶解，均匀混合后，利用旋转真空干燥机(rotaryevaporator)使圆底瓶内的溶剂挥发之后，即可在瓶壁上形成均匀的脂质膜，在临界温度以上的温度条件下，将欲包覆物质的水溶液和脂质膜混合，用手左右摇动，将瓶壁上的脂质膜

7、振下来，脂质在水溶液中即会自动形成MLV。  2.)冷冻-再解冻(freez-thaw)、均质(homogenization)及超音波震荡法（sonicationmethod）：利用微脂体破裂后会再自行密合的特性，以机械性的力量均质或超音波震荡的方式，或者多次冷冻、再解冻的方式，造成微脂体的破裂及重组再密合，最后可形成大小较均匀的单层微脂体。  3.)反相蒸发法（Reversephaseevaporationmethod