肌酸激酶测定sop_ck临床意义

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1、1检测原理CK催化磷酸从磷酸肌酸到腺昔二磷酸(ADP)的转磷酸过程，产生腺昔三磷酸(ATP)o这种方式形成的ATP用于在己糖激酶(HK)催化的反应中使葡萄糖磷酸化，生成的葡萄糠-6-磷酸盐由葡萄糖-6-磷酸脱氢酶(G-6-PDH)氧化,同时还原磷酸烟碱腺嚓吟二核昔酸(NADP)。形成的NADPH引起的在340nm处发生的吸光度变化，与CK活性直接成比例，因为其他反应物以不限制比率的数量存在,可以使用双波长(340,405nm)技术来测量。磷酸肌酸+ADPCK肌酸+ATP►Mg++,DTE,EDTAATP+葡萄糖HKADP+葡萄糖-6-磷酸盐AMg++葡萄糖-6-磷酸盐+NADPfG-6-PD

2、H-6-磷酸葡萄糖内酯+NADPH+(H)►2标本采集与处理2.1采血方法空腹采不抗凝静脉血2〜3ml。2.2标本保存采集后应及时送检。如杲不能及时送检，应将标本及时离心后分离血清，避光置冰箱保存。室温4h、4°C8〜12h、冰冻3〜4天能维持活性不变。2.3注意事项推荐选用血清。酶活性的高低易受标本采集时间的影响较大。避免溶血、脂血、黄疸。3试剂和设备3.1试剂采用酋门子医学诊断产品(上海)有限公司提供的试剂盒。3.1.1试剂组成试剂船广6孔为己糖激酶4500U/L,G-6-PDH2800U/L,ADP1.88Mm,磷酸肌酸18.1mM,葡萄糖11.65mM,NADP2.88n)M,缓冲液

3、,AK抑制物,激活剂物,片剂。3.1.2试剂准备直接使用。3.1.3试剂保存试剂2-8°C保存，有效期内稳定。3.2质控品美国BIORAD液体多项质控品。3.3校准品西门子校准品。3.4仪器SIEMENSDIMENSIONXpandPlus/RxLMax全自动生化分析系统。4操作程序4.1检测过程流程签收样品一离心一上机检测一审核报告一签发报告一标本保存。4.2样品签收严格按照标本接收程序签收标本。4.3标本处理以2500〜3000r/min,离心6〜l（）min,分离血清上机测定。如不能及时检测，分离血清于2-8°C保存。4.4标本检测3.4.1手工编排测试项目：样品按编号装入样品架，主屏

4、幕按FkENTERDATA,在Position处输入样品所在样品架字母及所在位置号，按enter,在PatientName处选择性输入病人名字，按enter,在SampleNo处输入样品号，按enter,在Tests处使用检验键或检验组合键选择相应项目,根据需要选择相应的按键改变Mode（按F7:MEXTMODE选择样品管类型）、Priority（按F4:NEXTPRIORITY选择样品的处理模式）、Fluid（按F8:NEXTFLUID选择标本类型）。3.4.2双向条形码标本分离血清后直接运行仪器。2.4.3运行：输入完毕后按F3:LOADLIST,确认样品已经装载在样本盘上，按Run键，

5、仪器开始进行样品检测。2.4.4检验后标本保存标本检验完成后用采血管原盖盖紧，保存于标本冷藏库内，按口期放好，保存期为7天。5校准程序3.1校准品准备和储存直接使用，2〜8°C保存。3.2校准条件在室内质控失控、更换试剂批号、更换仪器主要配件或进行大保养后均需校准。无特殊情况校准周期为3个月。4.3校准程序主屏幕按F5:PROCESSCTRL-Fl:CALIBRATION,按enter-*F2:SET-UP&RUN,按项目键选择所需要校准的项目名称METHOD,选屮相应试剂批号LOT,输入操作者姓名Operator.校准液货号CalibratorProduct和批号Lot,以及最低值校准液在

6、样品架上的位置StartatPosition,最后把校准液各个水平的值按照由低到高的顺序输到对应位置，按F4：ASSIGNCUPS指定样品杯，校准液按顺序排列在样品架上按F7：LOAD/RUN-F4：RUN或“RUN”运行键运行校准程序。6质量控制程序3.1质控品准备和储存质控品为液体，可以直接使用。原包装质控品-10〜・70°C可保存到瓶身有效期，未开启2〜&C可保存90山开启后2〜VC可保存30do6.2质控水平和分析批长度每24小至少进行一批，每批2个浓度水平。2.3质控操作程序与4.4标本检测步骤相同，只需要按F4:NEXTPRIORITY将ROUTINE修改成QC状态。7性能参数木

7、法线性范围为0〜800U/L,对于超过测定线性范围的结果，用酶稀释液对标木进行稀释，输入稀释因子后再重新检测。8生物参考区间男性：35〜232U/L女性：21〜215U/L9临床意义肌酸激酶是当今世界上测定次数较多的酶，特别对诊断急性心肌梗死有较高价值。和AST、LDH相比，肌酸激酶最先升高，峰值可达参考上限10余倍，敏感度高。因肝屮儿乎无肌酸激酶，肝胆疾病时，AST、ALT和LDH常升高而肌酸激酶正常，说明