脉冲电磁场诱导人骨髓间充质干细胞向成骨细胞分化的研究

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1、中华物理医学与康复杂志2005年1月第27卷第1期 ChinJPhysMedRehabil,January2005,Vol.27,No.1·5··基础研究·脉冲电磁场诱导人骨髓间充质干细胞向成骨细胞分化的研究赵敏 许建中 周强 王序全 朱灏 秦辉 单建林【摘 要】 目的 观察脉冲电磁场(PEMFs)对人骨髓间充质干细胞(hMSCs)向成骨细胞分化的影响。方法 分离并培养hMSCs,取第3代细胞,分为对照组与处理组,处理组细胞接受频率12Hz、场强1.1mT的PEMFs刺激,每日8h;对照组细胞不接受PEMFs刺激。应用透射电镜观察2组细胞超微结构,采用

2、碱性磷酸酶染色、骨钙素免疫组织化学染色、四环素荧光标记等方法进行观测。结果 细胞培养5~6d即可传代,经PEMFs连续刺激3d后,hMSCs细胞形态发生变化,3周后聚集成细胞钙化结节。透射电镜下观察显示:细胞比较成熟,内质网扩张,其碱性磷酸酶染色、骨钙素免疫组织化学染色和四环素荧光标记均为阳性。结论 hMSCs经特定频率和场强的PEMFs体外刺激后,可向成骨细胞分化,符合成骨细胞的形态学和生物学特性,为体外构建组织工程化骨提供自体种子细胞。【关键词】 脉冲电磁场; 骨髓间充质干细胞; 细胞分化; 成骨细胞Theeffectofpulsedelectro

3、magneticfieldsonthecellulardifferentiationfromhumanmesenchymalstemcellsto3osteoblastZHAOMin,XUJian2zhong,ZHOUQiang,WANGXu2quan,ZHUHao,QINHui,SHANJian23lin.OrthopedicResearchCenterofChinesePLA,DepartmentofOrthopedics,SouthwestHospital,the3rdMili2taryMedicalUniversity,Chongqing400

4、038,China【Abstract】ObjectiveToobservetheeffectofpulsedelectromagneticfields(PEMFs)onthecellulardiffer2entiationfromhumanmesenchymalstemcells(hMSCs)toosteoblast.MethodsWeisolatedandculturedthehMSCs,thendividedthepassagethreecellsintothecontrolgroupandthetreatmentgroup.Thetreatmen

5、tgroupwasstimulatedbythePEMFs(12Hzpulseburst,1.1mTpeak,8h/day).Transmissionelectronmicrograph,cyto2chemicalstainingforalkalinephosphatase(ALP),cytochemicalstainingforosteocalcinexpressionandtetracyclinefluorescencelabelwereappliedtomeasurethehMSCsdifferentiation.ResultsPEMFstrea

6、tmentacceleratedcel2lulardifferentiationsignificantly,hMSCscouldbepassedin6or5days,after3daysofexposure.Thecellularformwaschangedandtheygraduallycongregatedintoamineralizedmatrixin3weeks.Atransmissionelectronmicro2graphofthethirdpassageMSCsculturedwithexposuretoPEMFsshowedexpand

7、edendoplasmicreticulum.Cyto2chemicalstainingforALPandosteocalcinexpressionandtetracyclinefluorescencelabelwerepositive.ConclusionPEMFscouldacceleratethedifferentiationofhMSCstoosteoblast,whichservesastheautogenousseedingcellsforinvitroconstructionoftissueengineeringbone.【Keyword

8、s】Pulsedelectromagneticfields;Mesenchymalstemce

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