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《骨髓间充质干细胞向神经细胞、成骨细胞诱导分化的研究》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在学术论文-天天文库。
1、苏州大学硕士学位论文骨髓间充质干细胞向神经细胞、成骨细胞诱导分化的研究姓名：段祥申请学位级别：硕士专业：生物化学与分子生物学指导教师：张焕相20070501骨髓间充质干细胞向神经细胞、成骨细胞诱导分化的研究作者：段祥学位授予单位：苏州大学相似文献(10条)1.期刊论文王志顺.王江泳.王保芝.王琳.刘长安.王丽.刘贵生.WangZhi-shun.WangJiang-yong.WangBao-zhi.WangLin.LiuChang-an.WangLi.LiuGui-sheng骨髓间充质干细胞向成骨细胞诱导分化的超微结构改变-中国组织工程研究与临床康复2009,13(1)背景:目前尚缺乏骨髓
2、间充质干细胞及其诱导分化后成骨细胞超微结构特点的观察.目的:采用全骨髓培养-贴壁筛选法分离培养骨髓间充质干细胞,诱导其向成骨细胞方向分化,利用光镜和电镜观察诱导和未诱导分化细胞的细微和超微结构特点.设计、时间及地点:观察实验,于2007-03/2008-04在河北医科大学人体解剖教研室和白求恩国际和平医院骨科完成.材料:成年新西兰大白兔由自求恩国际和平医院实验动物中心提供.HitachiS-3500N型扫描电镜和Hitachi-7500型透射电镜.方法:从新西兰大白兔骼后上嵴处抽取骨髓.经原代及传代培养后,取部分第3代细胞加入诱导剂,诱导剂为10mmol/Lβ-甘油磷酸钠,10-8mmo
3、l/L地塞米松,50mg/L维生素C.培养2周后,诱导和未加诱导的骨髓间充质干细胞进行碱性磷酸酶、骨形态发生蛋白和钙化结节检测.主要观察指标:光镜观察骨髓间充质干细胞及其诱导分化后成骨细胞的一般形态学特征;电镜观察骨髓间充质干细胞和成骨细胞的超微结构特点.结果:培养的第3代骨髓间充质干细胞,其碱性磷酸酶染色呈强阳性反应;钙化结节染色和骨形态发生蛋白免疫组织化学检测,均呈现阴性结果.经向成骨细胞诱导分化后,其碱性磷酸酶染色,钙化结节染色和骨形态发生蛋白免疫组织化学检测,均呈现阳性反应.光镜和扫描电镜观察显示,骨髓间充质干细胞大部分呈长梭形,少量呈星形;经向成骨细胞诱导分化后,细胞体积增大,
4、更加饱满,似鱼群样排列.透射电镜观察显示,骨髓间充质干细胞的细胞器较丰富,向成骨细胞诱导分化后,其线粒体明显增多,出现较多的基质小泡、髓样体和空泡状结构.结论:骨髓间充质干细胞成骨诱导分化后细胞的超微结构表现为胞浆中出现增多的基质小泡、髓样体和空泡状结构.2.学位论文梁文杰猪骨髓间充质干细胞成骨诱导分化后免疫原性的实验研究2007研究背景及意义：严重创伤、感染、肿瘤等原因所致的骨缺损在临床治疗中非常常见。目前常用的治疗方法是植骨术，而严重的骨缺损用现有的方法难以获得满意的疗效，骨组织工程的兴起为解决大段骨缺损的难题提供了新的途径。骨髓间充质干细胞(mesenchymalstemcell，
5、MSCs)被认为是骨组织工程最佳的种子细胞。因为这种细胞取材方便，可通过穿刺获得，创伤小，取材后并发症少，细胞培养增殖快，在体内外成骨诱导环境下可分化为骨组织，而且具有多向分化潜能；此外，MSCs也容易分离和培养。尽管自体MSCs或成骨细胞用于动物及临床个体化治疗已经取得了良好的结果，但MSCs在骨髓中含量很少，并随着年龄的增长减少；现有方法体外迅速扩增困难。而且一些自身免疫性疾病患者，其MSCs增殖能力明显减弱。随着培养代数增加可能出现“反分化”现象和致瘤性，从而失去了细胞应有的功能和安全性。因此，自体骨髓间充质干细胞的应用会受来源和数量限制，难以满足临床“随取随用”的要求。建立同种异
6、体MSCs种子细胞库是解决这些问题的捷径，也是组织工程从实验室走向产业化的重要前提。近年来，国内外研究发现MSCs具有免疫调节作用，已往低等级动物模型也证明同种异体种子细胞及其构建的组织工程肌腱、软骨、骨组织植入体内免疫反应轻微，不足以影响工程化组织植入体内后的修复功能。因此，同种异体骨组织工程研究前景充满潜力和希望。目的：(1)猪骨髓分离培养MSCs并在体外诱导成骨细胞，并对其细胞生物学特性进行观察，探讨MSCs最佳的培养方法和条件；(2)研究MSCs成骨诱导分化后在不同条件下对外周血单个核细胞增殖的影响及细胞因子分泌情况；研究MSCs免疫原性及：IFN-γ对其免疫原性的影响，探讨MS
7、Cs免疫调节机制，为体内实验提供依据；(3)成骨诱导分化后MSCs与脱钙骨基质材料复合构建组织工程骨，植入猪皮下并和单纯脱钙骨基质材料植入进行比较，以了解同种异体组织工程骨在体内的免疫排斥反应程度及异位成骨能力。从而了解以MSCs为种子细胞的同种异体组织工程骨移植的可行性。方法：1．猪骨髓间充质干细胞生物学特性(1)无菌条件下在小香猪髂嵴处穿刺抽取2-5ml骨髓，经密度梯度离心分离提纯MSCs，分别培养在含5％胎牛血清的。A-DME
