碘化n-正丁基氟哌啶醇对血管紧张素ⅱ诱导的心肌细胞肥大和血管平滑肌细胞增殖的作用及机制的研究

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1、汕头大学硕士学位论文碘化N-正丁基氟哌啶醇对血管紧张素II诱导的心肌细胞肥大和血管平滑肌细胞增殖的作用及机制的研究硕士研究生：李金玉导师：黄展勤副教授专业：药理学研究方向：心血管药理申请学位：医学硕士入学时间：2009年9月中国.汕头2012.05EffectsandmechanismofNn-ButylHaloperidolIodideoncardiacmyocyteshypertrophyandvascularsmoothmusclecellsproliferationinducedbyAngiote

2、nsinIIbyJin-YuLiSubmittedinFulfillmentoftheRequirementsfortheMasterDegreeofMedicineThesisAdvisor:AssociateProf.Zhan-QinHuangDepartmentofPharmacologySHANTOUUNIVERSITYMEDICALCOLLEGEMay,2012汕头大学医学院硕士学位论文摘要第一部分F2对AngII诱导的心肌细胞肥大的抑制作用目的：探讨碘化N-正丁基氟哌啶醇（Nn-butylha

3、loperidoliodide，F2）对血管紧张素II（AngiotensinII，AngII）诱导的H9C2细胞肥大的抑制作用。方法：1.AngII诱导H9C2细胞肥大模型的建立用含10%FBS的高糖DMEM培养基培养H9C2细胞48h，换含有1%FBS的DMEM培养液同步化24h后，分别加入不同药物孵育48h。实验分组：①正常对照组（Control）：-71%FBS的DMEM培养液；②模型组（AngII）：AngII10mol/L。采用ImageProPlus6.1软件测量细胞表面积大小；BCA法测定

4、细胞总蛋白含量。2.F2对AngII诱导H9C2细胞肥大的影响用含10%FBS的高糖DMEM培养基培养H9C2细胞48h，换1%FBS的DMEM培养液同步化24h后，分别加入不同药物孵育48h。实验分组：①正常对照组（Control）：1%-7FBS的DMEM培养液（下同）；②模型组（AngII）：AngII10mol/L；③DMSO+AngII组：-5-7-8-8DMSO10mol/L+AngII10mol/L；④F210mol/L+AngII组：同时加入F210mol/L和-7-7-7-7AngII1

5、0mol/L；⑤F210mol/L+AngII组：同时加入F210mol/L和AngII10mol/L；⑥-6-6-7F210mol/L+AngII组：同时加入F210mol/L和AngII10mol/L；④、⑤、⑥组F2各浓度均预先孵育细胞30min。检测各组H9C2细胞的表面积和蛋白含量的改变（方法同上）。结果：-71．AngII诱导H9C2细胞肥大模型的建立：与Control组相比，AngII（10mol/L）孵育48h后，细胞表面积增加了1.75倍（p<0.01），细胞蛋白含量增加了46%（p<0

6、.01）。模型建立成功，重复性好。2．F2对AngII诱导H9C2细胞肥大表面积的影响：与Control组比较，AngII组和DMSO+AngII组细胞表面积显著性增大（P<0.01），而两组之间差异无统计学意义（P>0.05）；-8-7F210mol/L+AngII组心肌细胞表面积增加至2.29倍，F210mol/L+AngII组心肌细胞的表-8面积增加至1.99倍；与AngII组相比，F210mol/L+AngII组心肌细胞表面积减少了17%I汕头大学医学院硕士学位论文-7（P<0.01），F210m

7、ol/L+AngII心肌细胞的表面积减少28%（P<0.01）。3．F2对AngII诱导H9C2细胞肥大蛋白含量的影响：与Control组比较，AngII组和DMSO+AngII组细胞总蛋白含量显著升高（P<0.01），前两组之间差异无统计学意义-8-7（P>0.05）；F210mol/L+AngII组心肌细胞蛋白含量增加至1.3倍，F210mol/L+AngII组心-8肌细胞蛋白含量增加至1.23倍；与AngII组相比，F210mol/L+AngII组心肌细胞蛋白含量-7减少了10.6%（P<0.01）

8、，F210mol/L+AngII组心肌细胞的蛋白含量减少了16%。小结：1．AngII能诱导H9C2细胞肥大，表现在细胞表面积增大和蛋白含量增加。2．F2可以减少AngII引起的H9C2细胞表面积增大和蛋白含量增加。第二部分F2抑制AngII诱导的心肌细胞肥大的机制研究目的：在培养的H9C2细胞上，探讨F2抑制AngII诱导的H9C2细胞肥大的机制。方法：1．AngII对ERK1/2、p-ERK1/2、CREB和p-CREB蛋