基于膜技术汞离子快速检测新方法建立

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1、致谢时光荏苒，岁月如梭，三年的研究生求学生涯已接近尾声。在毕业之际，回首往昔，这三年来经历的点点滴滴酸甜苦辣都成美好的回忆。心中有着太多的不舍与眷恋，但更多的是无尽的感激，因为在这期问，我得到了许多关怀与帮助，值此毕业论文完成之际，我谨向所有关心、帮助过我的老师和同学表示最诚挚的感谢与最美好的祝愿。衷心地感谢我的导师陈伟教授在这三年来对我学习和科研上的指导，导师渊博的学识，严谨的治学态度，孜孜不倦的工作热情，精益求精的工作作风，对待科研实事求是以及独特创新的学术思维都使我受益匪浅。虽仅历时三载，但恩师以身作则

2、，言传身教，不仅授我以文，而且教我做人，赋予了我终生受益无穷之道。我在此求学阶段的每。+点进步与成绩都离不开老师的谆谆教诲与指导，本论文的顺利完成更是凝集了老师的大量心血!感谢实验室的大师兄梅占龙对我实验的指导，以及同学邓怡、吴晶晶、黄琳、和赵娣萍、滕军、姚丽、钟友好、郑婉丽、程琳等师弟师妹给予的支持与帮助，共同营造了一个充满爱的温暖融洽的实验生活大环境。感谢生物与食品工程学院各平台给我提供的便利条件，特别感谢各位老师对我实验上的意见和帮助。感谢2012级全体同学陪我一起走过这三年难忘的学习生活!感谢初中高中

3、及大学阶段的老师们与同窗好友们对我一如既往的支持与关爱!感谢我的家人们，是他们一直给我无微不至的关怀和默默无闻的付出，使我得以安心投入学习与科研之中。最后我要感谢在百忙之中评审我硕士学位论文的各位专家和学者!作者：朱梦雅2015年4月12日摘要汞离子广泛存在于自然界，是环境中毒性最强的重金属元素之一，影响食品和环境安全，危害人体健康。通常汞离子检测依赖大型仪器，耗时长且价格昂贵，难以满足大量、快速检测的需求，大大限制了它们在实际检测中的应用。为了实现汞离子方便快速的现场检测，本文研发了基于膜技术的两种汞离子检

4、测方法，增敏型核酸层析试纸条法和核酸阵列法。(11增敏型核酸层析试纸条法增敏型核酸层析纸条法是一种直接的超灵敏的现场检测方法。基于T_H92+-T特定的识别系统，以金纳米粒子(AuNPs)作为显色标记物，检测H92+。信号增敏是指将金纳米粒子用两条互补的寡核苷酸探针分别标记，以增强检测线的信号强度。两条探针的存在使传感信号得到放大，由此可以快速和灵敏的检测H92山。其肉眼视觉观察和软件定量分析检测H92十的检测限分别为0．005ppb和O．0015ppb。传统型核酸层析试纸条肉眼可观测的检测限仅为0．2ppb

5、，相比于传统型核酸层析试纸条，增敏型核酸层析试纸条灵敏度提高J，40倍。同时本方法成功应用于实际水样中H92+的检测。f2)核酸阵列法基于膜技术核酸阵列法检测汞离子的方法，实验设计了两条富T的寡核苷酸探针，其中一条作为捕获探针以阵列的形式固定在硝酸纤维素膜(NC膜)上，另外一条通过Au—S键偶联在金纳米粒子上，当检测汞离子时，两条富T的探针，通过形成T-HgZ+-T结构，使两条DNA探针杂交，将金纳米粒子捕捉在NC膜上，显色，肉眼观测检测限仅为0．5ppb。然后，利用金纳米粒子的表面催化效应，银染法使信号增强

6、，此时的检测限有500倍的提高，肉眼观测的检测限到达0．001ppb。关键词：汞离子；核酸层析试纸条；金纳米粒子：核酸阵列；银增强；快速检测IIABSTRACTMercuryion(H92+)isoneofthemosttoxicanddangerousheavymetalsthatcanhaveadverseeffectonhumanhealth，foodandenvironmentalsafety．Detectionofmercuryionsisusuallyhighlydependedoninstrum

7、ents．However,thesemethodsarenotonlytime—consumingandexpensivebutalsodifficulttomeettheneedsofurgentdetectionrequirements．Itgreatlylimitsthewideapplicationsofthesemethods．inordertorealizethedetectionofmercuryionquicklyandconveniently,twokindsofmembranebasedm

8、ethodsincludingthesignalamplifiednucleicacidlateralflowstripmethodandnucleicacidarraymethodweredevelopedforrapiddetectionofmercuryions．(1)SignalamplifiednucleicacidlateralflowstripSignalamplifiednuclei