拉喹莫德对实验性自身免疫性脑脊髓炎的防治作用及其免疫学机制研究

拉喹莫德对实验性自身免疫性脑脊髓炎的防治作用及其免疫学机制研究

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时间:2019-03-07

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1、进趟匡堂院亟±堂焦j金室目录拉喹莫德对实验性自身免疫性脑脊髓炎的防治作用及其免疫学机制研究⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯1中文摘要⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯1英文摘要⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯6前言⋯⋯⋯⋯······⋯⋯·········⋯··⋯······⋯⋯⋯·⋯⋯···⋯⋯⋯12刖舌⋯⋯⋯⋯”一“⋯⋯”一““一⋯”⋯“一”⋯⋯⋯⋯⋯”一⋯⋯一上么材料与方法⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯15结果⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯22讨论·········⋯⋯·····⋯⋯······

2、······⋯⋯······⋯⋯·⋯⋯···⋯⋯⋯36结论·····⋯·⋯·······⋯⋯··········⋯······⋯⋯···········⋯··⋯······52参考文献⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯53英汉缩略词对照表⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯67附图⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯69致谢⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯·⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯··7l调节性B细胞与多发性硬化(综述)⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯72、J,■~1234567891●1l1l1o厶cYu拉喹莫德对实验性自身免疫性脑脊髓炎的防治作用及其免疫学机

3、制研究㈣摘要目的:研究拉喹莫德(LQ)对实验性自身免疫性脑脊髓炎(EAE)的防治作用,探讨LQ对EAE防治作用的免疫学机制。方法:将75只雌性晰star大鼠随机分成5组:正常对照组、EAE对照组、LQ低剂量组、LQ中剂量组、LQ高剂量组,每组动物均15只。在造模开始的前三天,即对LQ低、中、高剂量组进行干预,分别予以LQO.03mg/1(g.d、O.06m眺g.d、O.12m眺g·d灌胃,正常对照组及EAE对照组予以生理盐水2ml/d灌胃。后使用粗制髓鞘碱性蛋白(MBP)加完全弗式佐剂皮下注射制作EAE模型,正常对照组皮下注射等量完全福氏佐剂。在造模后继续对LQ各剂量组进行

4、治疗,连续一周。每天对各组晰star大鼠进行神经功能障碍评分及记录,以神经功能障碍评分连续三天无加重、四肢瘫痪或濒临死亡时作为发病高峰期。同时记录晰star大鼠的发病潜伏期和进展期。在发病高峰期处死动物,未发病和正常对照组在造模4周后处死。留取大鼠脑脊髓组织、眶静脉血和脾脏组织。大鼠脑脊髓组织作髓染色后行光镜观察,通过酶联免疫吸附法(ELISA)测定外周血单个核细胞(PBMC)分泌白细胞介素.4(IL-4)、丫干扰素(IFN吖)、白细胞介素.17(IL.17)能力,通过流式细胞仪测定脾脏组织调节性B细胞(Bregs)的比例,通过ELISA测定脾脏细胞培养上清液中白细胞介素.

5、10(IL.10)、转化生长因子.p(TGF.D)含量。结果:(1)各组实验大鼠发病情况:正常对照组均无大鼠发病;EAE对照组大鼠全部发病,发病率为100%;LQ低、中、高剂量防治组发病率分别为80%、66.67%、60%。EAE对照组发病的潜伏期为10.27士1.67天,LQ低、中、高剂量组大鼠的发病潜伏期均有不同程度的延长,分别为15.67士1.95天、17.27士1.49天、20.73士1.58天,与EAE对照组比较,差异具有统计学意义(尸

6、12天、4.20士1.15天、3.Oo士O.93天,较EAE对照组时间缩短(尸O.05);高剂量组与低剂量组相比差异具有统计学意义(氏O.05),LQ高剂量组发病高峰期神经功能障碍评分与LQ

7、中剂量组相比差异不具有统计学意义(胗O.05);同时中剂量组与低剂量相比差异也不具有统计学意义(胗O.05)。(2)各组实验大鼠脑脊髓组织病理学变化:正常对照组大鼠脑脊髓组织无病理学改变;EAE对照组和LQ低、中、高剂量组大鼠脑脊髓组织都出现了不同程度的白质脱髓鞘改变,大量炎性细胞聚集在脑和脊髓实质内的血管周围,典型者形成“袖套”样改变,伴有血管充血。聚集细胞以淋巴细胞为2主,伴少量单核细胞。LQ各剂量组的白质脱髓鞘和炎性细胞侵润程度较EAE对照组减轻,且高剂量组减轻效果更明显。(3)各组实验大鼠发病高峰期外周血P

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