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5、料与方法1.材料本试验中以花楸成熟种胚为外植体,种子采于黑龙江植物园的花楸成熟果实,调制后在4℃冰箱中贮存。将材料用自来水浸泡18h,然后用70%的酒精浸泡30s,再用2%的NaClO溶液搅拌消毒处理10min,然后在无菌工作台上用无菌水冲洗5~7次,再用解剖刀切破种皮子叶端,剥出成熟胚待接种之用。2.方法1)不定芽的诱导:把成熟胚接种在附加了不同浓度的6-BA(6-苄基氨基嘌呤)、NAA(萘乙酸)的MS和WPM固体培养基上。每组激素组合接种6瓶,每瓶接种5个种胚。观察不定芽生长状况,并在第20天开始统计不定芽诱导率。根据不定芽诱导率,选
6、择最佳培养基与激素组合。2)不定芽的增殖:观察不定芽生长状况,当不定芽生长0.5cm时转接到附加了不同质量浓度的6-BA、IAA激素的MS增殖培养基上进行培养。3)不定芽的生根:将增殖到长度1.0~1.5cm的不定芽接种到附加了不同质量浓度的IBA或NAA的1/2MS培养基上,进行生根培养。4)培养条件:采用日光灯照射进行光照培养,光照16h,黑暗8h,光强2000~3000lx,温度(25±1)℃,湿度70%~80%。5)数据统计:通过统计不定芽和生根的数量,分别计算出不定芽诱导率和生根率。不定芽诱导率=(诱导出不定芽外植体数/接种的外
7、植体总数)×100%;生根率=(生根不定芽数/接入不定芽总数)×100%。结果与分析1.不同处理对花楸种胚不定芽诱导的影响1)不同基本培养基对花楸种胚不定芽诱导的影响:将接种在MS和WPM培养基上的花楸成熟种胚培养7d后,胚芽膨大,3周后部分成熟胚胚芽处出现不定芽。1个月后,不同培养基中花楸成熟胚不定芽诱导率出现差异,诱导不定芽3周后统计诱导情况。在MS培养基中,不定芽诱导率为80.33%;在WPM培养基中,不定芽诱导率为60.00%。经过X2分析得出,MS和WPM培养基上产生的不定芽诱导率之间有显着差异,即η=4.02Xα=3.84。结
8、果指出MS培养基对不定芽的诱导效果优于WPM培养基。7----------------------------------------------------精品文档值得收藏---------
