实验性自身免疫性脊髓炎模型的建立及cathepsin c在急慢性期模型中的表达

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1、中图分类号实验性自身免疫性脑脊髓炎模型憔立◆、慢性期模型中的表达TheestablishmentoftheMOGinducedEAEmodelandtheexpressionofCathepsinCinacuteandchronicphases计:学位论文:37页表格:O个插图:7幅指导教师:马坚妹教授范斌申请学位级别:硕士学位学科(专业):人体解剖与组织胚胎学培养单位:大连医科大学完成时间:二O一三年四月答辩委员会主席:独创性声明本人声明所呈交的学位论文是本人在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果。据我所知,除

2、了文中特别加以标注和致谢的地方外,论文中不包含其他人已经发表或撰写过的研究成果,也不包含为获得大连医科大学或其他教育机构的学位或证书而使用过的材料。与我一同工作的同志对本研究所做的任何贡献均已在论文中作了明确的说明并表示谢意。学位论文作者签名:蕾斌签字日期:2旦年羔月兰日关于学位论文使用授权的说明本学位论文作者完全了解学校有关保留、使用学位论文的规定,同意学校保留并向国家有关部门或机构送交论文的复印件和电子版,允许论文被查阅和借阅。本人授权大连医科大学可以将本学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索,可以采用影

3、印、缩印或扫描等复制手段保存和汇编本学位论文。本学位论文属于(请在以下相应方框内打“、/”):1.保密口,在一年解密后适用本授权书。2。不保密《/作者签名:施斌V刷醛名3噎嘻影取。上日期:伽73年1月zo日日期:声口侈年厂月即日目录一、摘要⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯IIlO00⋯⋯⋯⋯⋯⋯IOOIll⋯1(一)中文摘要⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯1(二)英文摘要⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯3二、正文⋯⋯⋯⋯⋯IOlIQlIIIOOOqlO0IlO0000000OlO⋯⋯⋯⋯⋯IIII

4、OIOOI⋯⋯⋯5(一)前言⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯5(二)材料与方法⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯71.实验材料⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯71.1主要仪器⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯71.2实验药品⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯72.实验方法⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯8(三)结果⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯111.动物的发病情况、体重变化和神经功能评分⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯112.MOG诱导的EAE小鼠模型的神经病理变

5、化⋯⋯⋯⋯⋯⋯123.CathepsinC在急、慢性期的表达特点和细胞定位⋯⋯⋯⋯15(四)讨论⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯17(五)结论⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯22(六)参考文献⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯23三、综述⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯0000⋯I0000I⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯27(一)综述⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯27(二)参考文献⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯33四、附录⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯36五、致谢⋯⋯

6、⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯·⋯⋯⋯⋯··37大连医科大学硕士学位论文实验性自身免疫性脑脊髓炎模型的建立及CathepsinC在急、慢性期模型中的表达硕士生姓名:范斌指导教师:马坚妹教授指导小组:范凯副教授专业名称:人体解剖与组织胚胎学摘要目的:建立少突胶质细胞糖蛋白多肽35—55(myelinoligodendrocyteglycoprotein,MOG35.55)诱导的实验性自身免疫性脑脊髓炎(experimentalautoimmuneencephalomyelitis,EAE)小鼠模型,研究cathe

7、psinC在急性和慢性期EAE模型中的表达。方法:1.EAE小鼠模型的建立:成年C57BL/6雌性小鼠,采用MOG35-55多肽与完全弗氏佐剂(Freund’Sadjuvantcomplete,CFA)混合的乳化抗原皮下注射免疫,并腹腔注射百日咳毒素建立EAE模型,正常C57BL/6小鼠作为空白对照组,用不含有MOG多肽的混合乳剂作为实验对照组。注射后观察各组小鼠体重变化,并根据小鼠行为学改变进行临床评分。2.组织病理学检测:HE染色观察中枢神经系统(centralnervoussystem,CNS)炎症细胞浸润;髓

8、鞘碱性蛋白(myelinbasicprotein,MBP)免疫组化染色和BlackGold髓鞘染色观察髓鞘脱失情况;Iba-1和髓过氧化物酶(myeloperoxidase,MPO)免疫组化染色分别观察小胶质细胞活化和中性粒细胞浸润情况。3.CathepsinC表达及细胞定位:于MOG诱导模型建立后的第21天(急性期)和第4l天(慢性期),利用

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