《gas6在重度子痫前期患者胎盘组织中的表达及意义》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在学术论文-天天文库。
．．，Ｘｗ■？＂＇一—如？‘？、？《－．＂Ｔ，．＇＊．、、、－．？．ｃｅｌＨ—一？Ｊ、＇一‘、：－一＇１一’，－．Ａ－山．’－．、ＪＶ．＇．．Ｎ＾．ｓｔ每．一！Ｖ，ｔ＇＇＇‘■．；：：—．：弁長Ｘ车．－．－八一一－‘＇‘：＇占乂－．、？，＇？一，：ｖ？心；守Ａ看／和卢：：片讀；｝／ｒ，沪Ｉ．７．’．－－．＊．＊■．；、一．－一－，？－一？，－一‘．＇，．、、？一：．．二．古叩。单位代码分类号：Ｒ７１４．２巧Ｊ學常：１０４２２＾＂－八甘器学号密级：公开：２０１２１３＇６４１讀晏．．．Ｉ．．．声．皆：／＇Ｖ‘．听：八乂乂芝支－硕±学位论文ＴｈｅｓｉｓｆｏｒＭａｓｔｅｒＤｅｒｅｅｇ论文题目：ｇａｓ６在重度子痛前期患者胎盘组织中的表达及意义Ｔｈｅｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎｌｅｖｅｌｓａｎｄｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｃｅｏｆｇａｓ６ｉｎｌａｃｅｎｔａｏｆｓｅｖｅｒｅｒｅｅｃｌａｍｓｉａｐｐｐ．乂＇、／餐；作者姓名，Ｖ．，巧洪爱式＇、．苦輯汽馬扣－‘—■一一、－－＇‘－．＇‘－－：—Ｖ‘Ｖｆ－式兴培养单位医学院＾也編變尚＾苗．－娘若专业名称妇产巧学為；读祭；姆扭传指导教师马玉燕教巧■＾‘．＇．’气ｉ．Ｉ．：－＾合作导师■－？；＞７，苗吟＇、‘＊？■＊‘‘’‘－．－｜Ｖ！兴Ｖ己—：Ｖ如一軒—．＇＂？、＇巧：货．宗紀鑛：織铺‘■■＇■＇■：：、－人．．．气心，二社Ｖ．．心皆ｖ：…；Ａ＇．严；：．：：立龍辨護；＇範＇—雜游—＇－＇＇、．：＾．媒－．２０１５５８：％兴３滿年月日－；二嫉，告為■＇■．■■：：、．．教兴於封．．：：＇“丫古免７心Ｖ束＇■’、一、’．．ｙ吟如‘＾．一三＇；二＞／、■．．换Ｖ＞，．：戎一？■’？、■－？．，Ｉ—、、、一：—．、＞— ７．１０４２２分类号：Ｒ１４２５９单位代码；密级：公开学号：２０１２１３６４１鶏山ｉ巧硕±学位论女ＴｈｅｓｉｓｆｏｒＭａｓｔｅｒＤｅｒｅｅｇ论文题目：ｇａｓ６在重度子痛前期患者胎盘组织中的表达及意义Ｔｈｅｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎｌｅｖｅｌｓａｎｄｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｃｅｏｆｇａｓ６ｉｎｐｌａｃｅｎｔａｏｆｓｅｖｅｒｅｒｅｅｃｌａｍｐｓｉａｐ作者姓名桑洪爱培养单位医学院专业名称妇产科学指导教师马玉燕教授合作导师２０１５年５月８曰 原创性声明：所呈交的学位论文本人郑重声明，是本人在导师的指导下，独立进行研究所取得的成果。除文中己经注明引用的内容外，本论文不包含任何其他个人或集体已经发表或撰写过的科研成果。对本文的研。究做出重要贡献的个人和集体，均己在文中Ｗ明确方式标明本声明的法律责任由本人承担。玉‘王＇口／论文作者签名：日期：关于学位论文使用授权的声明本人完全了解山东大学有关保留、使用学位论文的规定，同意学校保留或向国家有关部口或机构送交论文的复印件和电子版，允许论文被查阅和借阅；本人授权山东大学可将本学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索，可［＾采用影印、缩印或其他复制手段保存论文和汇编本学位论文。（保密论文在解密后应遵守此规定）化‘以。：论文作者签名：导师签名；办曰期 目录中文摘要１英文摘要４符号说明及缩略语表７前Ｂ９树料与方法１２２结果３龍２９结３２参考文献３３综述３７综述参考文献４５－致谢５０５攻读学位期间发表论文１ ＣＯＮＴＥＮＴＳＣｈｉｎｅｓｅＡｂｓｔｒａｃｔ１ＥｎｌｉｓｈＡｂｓｔｒａｃｔ４ｇＳｙｍｂｏｌＩｎｓｔｒｕｃｔｉｏｎ７Ｉｎｔｒｏｄｕｃｔｉｏｎ９ＭａｔｅｒｉａｌａｎｄＭｅｔｈｏｄｓ１２Ｒｅｓｕｌｔｓ２３Ｄｉｓｃｕｓｓｉｏｎ２９…Ｃｏｎｃ？ｌｕｓｉｏ打３２Ｒｅｆｅｒｅｎｃｅ３３Ｒｅｖｉｅｗ３７ＲｅｖｉｅｗＲｅｆｅｒｅｎｃｅ４５Ａｃｋｎｏｗｌｅｄｅｍｅｎｔ５０ｇＰａｅｒｕｂｐｐｌｉｓｈｅｄｄｕｒｉ打ｇｔｈｅｄｅｒｅｅｐｅｒｉｏｄ５１ｇ 山东大学硕±学位论文ｇａｓ６在重度子痛前期患者胎盘组织中的表达及意义一硕±研究生：桑洪爱专业：妇产科学胃成家导师：马玉燕中文摘要研巧背景及目的一５－妊娠期高血压疾病是种妊娠与高血压并存的疾病，发病率约为２０％，可严重危害孕产妇及围产儿的生命健康。妊娠期高血压疾病分为日类，包括妊娠合并慢性高血压、妊娠期高血压、子痴前期（ｐｒｅｅｃｌａｍｐｓｉａ，Ｐ巧、子痛、慢性高血压并发子痴前期。其中，子痴前期是妊娠期（孕２０周后）特有的累及孕妇多器官多系统的疾病，、水肿主要表现为突发高血压、蛋白尿，严重者可出现头晕、视物模糊、严重低蛋白血症及血小板减少等。子痴前期的严重并发症包括胎盘早剥、一步发展胎儿生长受限、低体重儿、早产等，子痛前期进，导致神经系统功能障（ｈｅｍｏｌｓｉｓ碍、肝功能受损及血液系统病变时可伴有子痛发作或者肥化Ｐ综合征ｙ，ｅｌｅｖａｔｅｄｌｉｖｅｒｅｎｚｙｍｅｓ，ａｎｄｌｏｗｐｌａｔｅｌｅｔｓｓｙｎｄｒｏｍｅ，ＨＥＬＬＰｓｙｎｄｒｏｍｅ），严重危害孕产妇及围产儿的生命安全。国外文献报道，在所有孕产妇死亡病因中，妊娠期高血压疾病可达１８％。另外，大量证据表明，有子痴前期病史的孕妇及其，今后发生也脑血管及代谢性疾病的风险增加新生儿。终止妊娠是目前重度子痴前期最有效的临床治疗措施，但提前终止妊娠常导致孕妇流产率、早产率的升高，増加围产儿发病率及死ｔ率。妊娠期高血压疾病重在提前预防及早期治疗。然而，子楠前期的确切发病机制于今仍不明确。早期胎盘形成不良（血管生成因子、炎症介质的介导参与）、母胎界面炎症介质的失衡等假说是目前研巧的热点。生长ｔ－一停滞特异性蛋白６（ｇｒｏｗｔｈａｒｒｅｓｓｐｅｃｉｆｉｃｐｒｏｔｅｉｎ６，ｇａｓ６）是种生长停，可表达于多种组织、细胞，如滞特异性基因编码的分泌性蛋白：小庶、肺、腎、，ａ，而肝脏则几乎不表达该蛋白。胎盘、内皮细胞等，其中胎盘等组织富表达ｇｓ６ａｘ一ａｓ６ｌ是ＴＡＭ受体酪氨酸激酶亚家族的成员，作为ｇａｓ６的受体之，对ｇ具有高度亲和性ｓ６－ＴＡＭ通。ｇａ路通过多条途径在不同的组织细胞中发挥不同的生物学效１ 山东大学硕女学位论文应，，ａｓ６可能与子，与血管的稳态、炎症及免疫调节密切相关。因此我们推测ｇ贿前期的发病存在一定的关系。本研巧通过检测子痛前期及正常妊娠孕妇胎盘组织中ｇａｓ６的表达情况，探讨ｇａｓ６在重度子痛前期患者胎盘组织中的表达变化及在子痛前期发病中的意义。方法选取我院行剖宫产单胎分娩的６２例孕妇作为本次实验的研究对象，其中，重度子痴前期患者３２例，作为实验组，正常晚期妊娠孕妇３０例，作为对照組。收集研究对象的胎盘标本、部分銳膜标本，对标本中ｇａｓ６的表迭情况进行测定分析：采用酶联免疫组化法定位检测两组实验对象胎盘及蚁膜组织中ｇａｓ６的表达；采用ＲＴ－ＰＣＲＷｅｓｔｅｒｎＢ法及ｌｏｔ方法对两姐实验对象胎盘组织中ｇａｓ６的表达进行基因一步分析胎盘中水平及蛋白水平的定量检测。并进ｇａｓ６的基因表达水平与多个临床指柄的相关性。结果１．相对于正常妊娠孕妇，子痴前期患者平均孕周及胎儿体重较小，血小板、白蛋白平均值较低，而血压、游离脂肪酸、肌酌则明显升高。２．ａｓ６在胎盘及；ａｓ６在正ｇ脱膜组织中的定位表运ｇ常及子贿前期孕妇胎盘及晚膜姐织中均有表达，胎盘组织中主要定位表达于胎盘合体滋养细胞的胞浆及胞核，蚁膜姐织中主要定位于蚁膜细施的胞浆及胞核内。重度子癖前期患者胎盘组织中ｇａｓ６蛋白的染色程度更深。３．ａｓ６ｍＲ化在两组研ｇ巧对象胎盘组织中的定量表达；重度子痛前期患者胎盘组织中ｇａｓ６ｍＲＮａ表法水平（０．５９６＋０．３８０）较正常妊娠孕妇表达水平（０．３３７±０．２２３）増加，差异具有统计学意义（八０．０５）。４．ｇａｓ６蛋白在两组研巧对象胎盘组织中的定量表达：重度子滿前期患者胎盘组织中ｇａｓ６蛋白表达水平较正常妊娠孕妇胎盘组织中ｇａｓ６蛋白表达明显升高，差异具有统计学意义（八０．０５）。５．ｓ６ｍＲＮａ的表达水平与各临床指标的相关性ｓ６ｍＲＮａ胎盘中ｇａ：ｇａ的表达水平与其体重指数、血压、游离脂肪酸呈正相关，而与白蛋白等呈负相关。结论１．ｇａｓ６在正常及子痛前期孕妇胎盘及蚁膜姐织中均有表达且重度子痴前期，患者胎盘组织中ｇａｓ６蛋白的染色程度更深，提示ｇａｓ６可由胎盘及贼膜细胞分泌，并参与正常妊娠及子痴前期的发生、发展过程。２ 山东大学硕±学位论文２．重度子痴前期患者胎盘组织中ｇａｓ６蛋白及ｇａｓ６ｍＲｉ＾ａ的表达量较正常妊娠一孕妇显著增加ａｓ６可能通过、发展过程。，提示ｇ定的机制参与了子痛前期的发生３．胎盘中ｇａｓ６ｍＲＮａ的表达水平与其体重指数、血压、游离脂肪酸正相关，而与白蛋白等呈负相关，提示ｇａｓ６可能通过调节代谢参与子滿前期的发生与发展过程。：ｓ６蛋白ｓ６ｍＲＮａ关键词ｇａ；ｇａ；重度子痛前期；胎盘组织３ 山东大学硕±学位论文Ｔｈｅｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎｌｅｖｅｌｓａｎｄｓｉｇｎｉ巧ｃａｎｃｅｏｆｇａｓ６ｉｎｐｌａｃｅｎｔａｏｆｓｅｖｅｒｅｐｒｅｅｃｌａｍｐｓｉａＡＢＳＴＲＡＣＴＢａｃｋｒｏｕｎｄａｎｄＯｂｅｃｔｉｖｅｓ：Ｇｅｓｔａｔｉｏｎａｌｈｅｒｔｅ打ｓｉｖｅｄｉｓｏｒｄｅｒｓｒｅｆｅｒ１；ｏｔｈｅｇｊｙｐ〇ｃｏｎｃｏｍ－ｉｔａｎｃｅｏｆｒｅｎａｎｃａｎｄｈｅｒｔｅ打ｓｉｏｎｄｉｓｅａｓｅｗｉ化化ｅｒａｔｅｏｆ５２０／〇Ｔｈｅｐｙｐ．ｇｙ，ｄｉｓｅａｓｅｃａｎｂｅｈａｒｍｆｕｌｔｏｔｈｅｍａｔｅｒｎａｌａｎｄｆｅｔａｌｈｅａｌｔｈｓｅｖｅｒｅｌｙ．Ｈｙｐｅｒｔｅｎｓｉｖｅｄｉｓｏｒｄｅｒｓｉ打ｐｒｅｇｎａｎｃｙｉｎｃｌｕｄｅｆｉｖｅｓｕｂｇｒｏｕｐｓ：ｃｈｒｏｎｉｃｈｙｐｅｒｔｅｎｓｉｏｎｃｏｍｐｌｉｃａｔｉｎｇｒｅｎａｎｃｅｓｔａｔｉｏｎａｌｈｅｒｔｅｎｓｉｏｎｒｅｅｃｌａｍｓｉａｅｃｌａｍｐｓｉａａｎｄｒｅｅｃｌａｍｓｉａｙ，，ｐｇ，ｇｙｐｐｐｐｐｓｕｐｅｒｉｍｐｏｓｅｄｕｐｏｎｃｈｒｏ打ｉｃｈｙｐｅｒｔｅｎｓｉｏｎ．Ｐｒｅｅｃｌａｍｐｓｉａｏｆｔｅｎｏｃｃｕｒｓａｆｔｅｒ２０ｗｅｅｋｓｏｆｇｅｓｔａｔｉｏ打ａｎｄｉｓａｍｕｌｔｉｐｌｅｏｒｇａｎｓｙｓ化ｍｄｉｓｅａｓｅｐｅｃｕｌｉａｒｔｏｐｒｅｇ打ａｎｃｙ．Ｔｈｅｍａｉｎｃ打ｉｃａｓｍｓｗｅｒｅｅｎｈｔｅｎｓｎｔｅａａｎｄｅｄｅｍａｒｓｅｒｅｌｉｌｙｐ化ｍｓｕｄｄｙｐｅｒｉｏ，ｐｒｏｉｎｕｒｉ，．Ｆｏｖｅｃａｓｅｓａｔｉｅｎｔｓｍａａｅａｒｓｍｔｏｍｏｆｄｉｚｚｉｎｅｓｓｂｌｕｒｒｅｄｖｉｓｉｏｎｓｅｖｅｒｅ，ｐｙｐｐｙｐ，，ｏ－ａａｔｒｏｍｍｈｌｂｕｍｉｎｅｍｉｈｂｏｃｔｏｅｎｉａｅｔｃ．Ｔｈｅｒｅｌａｔｅｄｓｅｒｉｏｕｓｃｏｌｉｃａｔｉｏｎｓｏｆｙｐ，，ｙｐｐｒｅｅｃｉａｃｅｎｔｏｎｔａｕｔｅｏｗｔｈｉｏｗｐｌａｍｐｓｉｎｃｌｕｄｅｐｌａｔａｌａｂｒｕｐｉ，ｉｎｒｒｉｎｅｇｒｒｅｓｔｒｉｃｔｏｎ，ｌｂｉｒｔｈｗｅｉｔｒｅｔｅｒｍｄｅＵｖｅｒｅｔａｌ．Ｔｈｅｆｕｒｔｈｅｒｄｅｖｅｌｏｍｅｎｔｏｆｒｅｅｃｌａｍｓｉａｍａｂｅｇｈ，ｐｙｐｐｐｙａｓｓｏｃｉａｔｅｄｗｉｔｈｒｅｅｃｌａｍｓｉａｏｎｓｅｔｏｆＨＥＬＬＰｓｎｄｒｏｍｅｈｅｍｏｌｓｉｓｐｐｙ（ｙ，ｅｌｅｖａｔｅ过ｌｉｖｅｒｅｎｚｙｍｅｓ，ａｎｄｌｏｗｐｌａｔｅｌｅｔｓｓｙｎｄｒｏｍｅ）ｗｈｅ打ｎｅｕｒｏｌｏｇｉｃａｌｄｙｓｆｕｎｃｔｉｏ打，ｉｍｐａｉｒｅｄｌｉｖｅｒｆｕｎｃｔｉｏｎａｎｄｂｌｏｏｄｓｙｓ化ｍｄｉｓｅａｓｅｓｏｃｃｕｒｒｅｄ，ｓｅｒｉｏｕｓｈａｒｍｔ＾ｏｔｈｅｍａｔｅｒｎａｌａｎｄｅｒｉ打ａｔａｌｌｉｆｅｓａｆｅｔ．ＳｏｍｅｆｏｒｅｉｎＨ化ｒａｔｕｒｅｒｅｐｏｒｔｓｔｈａｔｐｙｇｈｙｐｅｒｔｅｎｓｉｏｎｄｉｓｏｒｄｅｒｓｏｆｐｒｅｇｎａｎｃｙａｃｃｏｕｎｔｆｏｒ１８％ｍｏｒｔａｌｉｔｙｏｆｐｒｅｇｎａｎｔｗｏｍｅｎｔｔｗｏｒｌｄｗｉｄｅ．Ａｄｄｉｉｏｎａｌｌｙ，１１１〇化ａｎｄｍｏｒｅｅｖｉｄｅｎｃｅｓｉｎｄｉｃａｔｅ化ａｔｈｅｒｉｓｋｓｆｏｒｃａｒｄｉｏｖａｓｃｕｌａｒ，ｃｅｒｅｂｒｏｖａｓｃｕｌａｒａｎｄｍｅｔａｂｏｌｉｃｄｉｓｅａｓｅｉ打ｐａｔｉｅｎｔｓｗｉｔｈａｈｉｓｔｏｒｙｏｆｇｅｓｔａｔｉｏｎａｌｈｙｐｅｒｔｅｎｓｉｏｎｄｉｓｅａｓｅａｎｄｔｈｅｉｒ打ｅｗｂｏｍｓｉｎｃｒｅａｓｅｉｎｔｈｅｆｕｔｕｒｅ．Ｔｅｒｍｉｎａｔｔｒ．ｔｉｏｎｏｆｒｅｎａｎｃｉｓｔｈｅｍｏｓｔｅｆｆｅｃｔｉｖｅｅａｔｍｅｎｔｆｏｒｓｅｖｅｒｅｒｅｅｃｌａｍｓｉａＹｅｐｇｙｐ，ｐｎｃｒｅａｓｅｄｒａｔｅｓｏｆａｂｏｒｔｏｎａｎｄｒｅｔｅｒｍｔｅｎａｃｃｏｍａｎｔｅｔｅｒｍｎａｔｏｎａｎｄｉｉｐｂｉｒｈｏｆｔｐｙｈｉｉ，ｆｉｎａｌｌｙｔｈｅｐｅｒｉｎａｔａｌｍｏｒｔａｌｉｔ：ｙａｎｄｍｏｒｂｉｄｉｔｙｉ打ｃｒｅａｓｅ．Ｗｅｓｈｏｕｌｄｓｔｒｅｓｓｅａｒｌｙｐｒｅｖｅｎｔｉｏ打ａｎｄｅａｒｌｙｔｒｅａｔｍｅ打ｔ．Ｈｏｗｅｖｅｒ，ｔｈｅｄｅｆｉｎｉｔｅｅｔｉｏｌｏｇｙｏｆｒｅｅｃｌａｍｐｓｉａｉｓｐｅ．ｔｌｕｓｉｖｅＰｌａｃｅｎａｌｄｙｓｆｕｎｃｔｉｏｎｉｎｄｕｃｅｄｂｙａｎｇｉｏｇｅｎｉｃｆａｃｔｏｒｓａｎｄｍｅｄｉａｔｏｒｓｏｆ（ｉｎｆｌａｍｍａｔｉｏｎｍａｉｎｖｏｌｖｅｉｎｒｅｅｃ．Ａｔｔｏｎｌａｍｓｉａｎｄｈｅｉｍｂａｌａｎｃｅｏｆｉｎｆｌａｍｍａｉ）ｙｐｐｒｅａｔｅｄｆａｃｒｔｏｒｓｈａｓｂｅｅｎｆｏｕｎｄｉｎａｔｉｅｎｔｓｗｌｌａｓｉａ．ｓ６ｒｏｗｔｈｌｐｉ；ｈｐｒｅｅｃｍｐＧａ（ｇ＊－－ａｒｒｅｓｔｓｅｃｉｆｉｃｒｏｔｅｉｎ６ｉｓａｋｉｎｄｏｆｓｅｃｒｅｔｅｄｒｃＫｅｉｎｃｏｄｅｄｂｒｏｗｔｈａｒｒｅｓｔｓｅｃｉｆｉｃｐｐ），ｐｙｇｐ４ 山东大学硕±学位论文ｇｅ打ｅ．Ｇａｓ６ｃａｎｂｅｄｅｔｅｃｔｅｄｉ打ｖａｒｉｏｕｓｔｉｓｓｕｅｓａ打ｄｃｅｌｌｓｗｉｔｈｏｖｅｒｅｘｒｅｓｓｉｏｎｉｎｋｉｄｎｅ，ｐｙ，ｐｌａｃｅｎｔａｅｔｃａ打ｄａｌｍｏｓｔｎｏｓｅｃｒｅｔｉｏ打ｉ打ｌｉｖｅｒ．Ａｘｌ，ａｓｏｎｅｏｆｔｈｅＴＡＭｒｅｃｅｐｔｏｒｔｙｒｏｓｉｎｅｆａｍｉｌｙｍｅｍｂｅｒｓ，ｈａｓｈｉｇｈｃｏｍｐａｔｉｂｉｌｉｔｙｆｏｒｉｔｓｌｉｇａｎｄｇａｓ６．Ａｗｉｄｅｖａｒｉｅｔｙｏｆ－ｂｉｏｌｏｉｃａｌｅｆｅｃｔｓｃａｎｂｅｉｎｄｕｃｅｄｂｙｔｈｅａｓ６ＴＡＭａｔｈｗａｉｎｄｉｆｅｒｅｎｔｔｉｓｓｕｅｓａｎｄｇｇｐｙｔｈｅａｔｈｗａｃｌｏｓｅｌｒｅｌａｔｅｓｔｏｔｈｅｖａｓｃｕｌａｒｈｏｍｅｏｓｔａｓｉｓｉｎｆｌａｍｍａｔｉｏｎｒｅａｃｔｉｏｎａｎｄｐｙｙ，ｉｍｍｕｎｅｒ色ｇｕｌａｔｉｏ打．Ｓｏｗｅｈｙｐｏｔｈｅｓｉｚｅｔｈａｔｇａｓ６ｍｉｇｈｔｉ打ｖｏｌｖｅｔｈｅｉ打ｃｉｄｅ打ｃｅａｎｄｐｒｏｇｒｅｓｓｏｆｒｅｅｃｌａｍｓｉａ．Ｓｏｏｕｒａｉｍｉｓｔｏｅｘａｍｉ打ｅ化ｅｓｉｎｉｆｉｃａｎｃｅｏｆａｓ６ｉｎｓｅｖｅｒｅｐｐｇｇｐｒｅｅｄａｍｐｓｉａｂｙｉｎｖｅｓｔｉｇａｔｉｎｇｔｈｅｌｏｃａｔｉｏ打ａｎｄｅｘｐｒｅｓｓｉｏ打ｌｅｖｅｌｃｈａｎｇｅｓｏｆｇａｓ６ｉｎｔｈｅｔｐｌａｃｅｎａ．Ｄｅｓ－ｗｅｒｅｉｎａｎｄｍｅｔｈｏｄｓｘｔｙｔｗｏｃａｓｅｓｉｖｅｒｅｃｅｓａｒｅａｎｉｎｏｕｒｓｉｔａｇ；Ｓｉ过ｅｌｄｂｙｈｏｐｌｅｄｎｃｏｔｅｖｅｒｅｉｎｃｌｕｄｉ化ｅｓｅｏｆ化ｉｓｓｕｄｉ打加ｄｉｎ３２ａｔｉｅｎｔｓｗ她ｓｒｅｅｃｌａｍｓｉａＳＰｐｙ，ｇｐｐｐ（）ａｓｔｈｅｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔａｌｇｒｏｕｐａｎｄ３０ｃａｓｅｓｏｆｎｏｒｍａｌｌａｔｅｐｒｅｇｎａｎｔｗｏｍｅｎ（ＮＰ）ａｓｔｈｅｃｏｎｔｒｏｌｇｒｏｕｐ．Ｔｈｅｌａｃｅ打ｔａｌａｌｏ打ｗｉｔｈａｒｔｏｆｄｅｃｉｄｕａｌｓｅｃｉｍｅ行ｓｗｅｒｅｃｏｌｌｅｃｔｅｄ．ｐｇｐｐＥ打ｚｙｍｅｌｉ打ｋｅｄｉｍｍｕｎｏｈｉｓｔｏｃｈｅｍｉｃａｌｔｅｃｈｎｉｑｕｅｗａｓａｄｏｐｔｅｄｔｏｉｄｅｎｔｉｆｙｇａｓ６ｐｒｏｔｅｉｎｌｏｃａｌｉｚａｔｉｏｎｉｎｌａｃｅｎｔａａｎｄｄｅｃｉｄｕａｗｈｉｌｅｒｅａｌｔｉｍｅｕａｎｔｉｔａｄｖｅＰＣ民ｗａｓｐ，ｑａｄｍｉｎｉｓｔｅｒｅｄｆｏｒｑｕａｎｔｉｔａｔｉｖｅａｎａｌｙｓｉｓｏｆｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎｌｅｖｅｌｓｏｆｇａｓ６ｍＲＮａａｎｄｗｅｓ化ｍＢｌｏｔｗａｓｃａｒｒｉｅｄｏｕｔｆｏｒｑｕａ打ｔｉｔａｔｉｖｅａｎａｌｙｓｉｓｏｆｅｘｐｒｅｓｓｉｏ打ｌｅｖｅｌｓｏｆｇａｓ６ｐｒｏｔｅｉ打ｉｎｌａｃｅｎｔａ．Ｆｕｒｔｈｅｒｗｅａ打ａｌｚｅｄｔｈｅｃｏｒｒｅｌａｔｉｏｎｂｅｔｗｅｅ打ａｓ６ｌｅｖｅｌｉ打ｔｈｅｌａｃｅｎｔａｐ，ｙｇ各ｐｗｉｔｈｖａｒｉｅｔｙｃｌｉｎｉｃａｌｉｎｄｉｃａｔｏｒｓ．Ｒｅｓｕｌｔｓ；１．ＣｏｍｐａｒｅｄｔｏｔｈｅＮＰｇｒｏｕｐ，ｔｈｅｇｅｓｔａｔｉｏ打ａｌａｇｅ，ｓｅｒｕｍａｌｂｕｍｉｎａｎｄｌａｔｅｌｅｔｗｅｒｅｍｕｃｈｌｏｗｅｒｗｈｉｌｅｔｈｅｂｌｏｏｄｒｅｓｓｕｒｅｆｒｅｅｆａｔｔａｃｉｄｓｓｅｒｕｍｃｒｅａｔｉｎｉｎｅｐｐ，ｙ，ｗｅｒｅｈｉｇｈｅｒｉｎｔｈｅＳＰｇｒｏｕ．２．Ｔｈｅｌｏｃａｔｉｏｎｅｘｐｒｅｓｓｉｏ打ｓｏｆｇａｓ６ｐｒｏｔｅｉｎ：ｇａｓ６ｐｐｒｏｔｅｉ打ｓｅｘｐｒｅｓｓｅｄｍｏｓｔｌｙｉ打ｔｈｅｃｙｔｏｐｌａｓｍａｎｄｎｕｃｌｅｕｓｏｆｓｙ打ｃｙｔｉｏｔｒｏｐｈｏｂｌａｓｔｉｎｐｌａｃｅ打ｔａｌｔｉｓｓｕｅａｎｄｄｅｃｉｄｕａｌｃｅｌｌｓｉ打ｄｅｃｉｄｕａｌｔｉｓｓｕｅａｎｄｇａｓ６ｐｒｏ化ｉｎｓｔａｉ打ｅｄｄｅｅｐｅｒ打ａｃｅｎｔａｏｆａｔｅｎｔｓｗｔｓｅｖｅｒｅｅｅｃａｍｓａｅｕａｎｔｔａｔｖｅｅｘｒｅｓｓｏｎｓｏｆｉｐｌｐｉｉｈｐｒｌｐｉ．３．Ｔｈｑｉｉｐｉｇａｓ６ｍＲＮａ：ｔｈｅｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎｌｅｖｅｌｓｏｆｇａｓ６ｍＲＮａｗｅｒｅｅｌｅｖａｔｅｄｄｉｓｔｉｎｃｔｌｙｉｎＳＰ＜ｒｏｕ０．５９６±０８０ｃｏｍａｒｅｄｔｏ１：ｈｅＮＰｏｕ．２（戶）Ｔｈｅｇｐ．３ｒ０．３３７±０２０．０５．４．（）ｐｇｐ（＾ｑｕａｎｔｉｔａｔｉｖｅｅｘｒｅｓｓｉｏｎｓｏｆｇａｓ６ｐｒｏｔｅｉｎ：ｇａｓ６ｐｒｏｔｅｉ打ｅｘｒｅｓｓｉｏｎｌｅｖｅｌｓｗｅｒｅｐｐｒｅａｓｅｄｉｎｒｏｕｃｏｍａｒｅｄｔｏｔｈｅｒｏｗｉｈ巧ａｔｔａｌｄｉｆｅｅ（戶＜０．０）ｉｎｃＳＰｇｐｐＮＰｇｕｐｔｉｓｉｃｒｅｎｃ５＊５．Ｃｏｒｒｅｌａｔｔｌｉｏｎｂｅｗｅｅｎｐｌａｃｅｎ化１ｇａｓ６ｍＲＮａｅｘｐｉｅｓｓｉｏｎｅｖｅｌｓａｎｄｖａｒｉｏｕｓｃｌｉｎｉｃａｌａ＊ｐｒａｍｅｔｅｒｓ：ｃｏｒｒｅｌａｔｉｏｎａｎａｌｙｓｉｓｉｅｖｅａｌｅｄｌ；ｈａｔｇａｓ６ｍ民ＮａｌｅｖｅｌｓｗｅｒｅｐｏｓｉｔｉｖｅｌｙＤ 山东大学硕±学位论文ａｓｓｏｃｉａｔｅｄｗｉｔｈｂｏｄｙｍａｓｓｉ打ｄｅｘ，化ｅｂｌｏｏｄｐｒｅｓｓｕｒｅ，ｆｒｅｅｆａｔｔｙａｃｉｄｓｗｈｉｌｅｎｅｇ如ｉｖｅｌｙｃｏｒｒｅｌａｔｅｄｗｉ化过化ｕｍｉｎ．Ｃｏ打ｅｌｕｓｉｏｎｓ；１．Ｂｏｔｈｔｈｅｌａｃｅ打ｔａｌａｎｄｄｅｃｉｄｕａｌｔｉｓｓｕｅｓｓｈｏｗｅｄｓｔａｉｎｉｎｆｏｒａｓ６ｉｎｐｇｇｗｏｍｅ打ｏｆＳＰａｎｄＮＰｒｏｕｓａｎｄａｓ６ｒｏｔｅｉ打ｓｔａｉ打ｅｄｄｅｅｅｒｉｎｌａｃｅ打ｔａｏｆａｔｉｅｎｔｓｇｐｇｐｐｐｐｗｉｔｈｓｅｖｅｒｅｐｒｅｅｃｌａｍｐｓｉａ．Ｔｈｅｓｅｒｅｓｕｌｔｓｓｕｇｇｅｓｔｅｄｔｈａｔｇａｓ６ｃａｎｂｅｓｅｃｒｅｔｅｄｂｙｔｈｅｌａｃｅｎｔａａｎｄｄｅｃｉｄｕａｃｅｌｌｓａｎｄｍａａｒｔｉｃｉａｔｅｉｎｔｈｅｏｃｃｕｒｒｅｎｃｅｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔｐ，ｙｐｐ，ｒｓｓｏｆｔ．Ｔｈｐｏｃｅｒｅｇｕｌａｉｏｎｏｆｎｏｒｍａｌｐｒｅｇｎａｎｃｙａｎｄｐｒｅｅｃｌａｍｐｓｉａ２．ｅｇａｓ６ｍＲＮａａｎｄｐｒｏｔｅｉ打ｅｘｐｒｅｓｓｉｏ打ｉｎｃｒｅａｓｅｄｍａｒｋｅｄｌｙｉｎｐｌａｃｅｎｔａｔｉｓｓｕｅｓｏｆｐｒｅｅｄａｍｐｓｉａｐａｔｉｅｎｔｓｔｈａｎｉｎｎｏｒｍａｌｐｒｅｇｎａｎｔｗｏｍｅｎ，ｗｈｉｃｈｓｕｇｇｅｓｂｄｔｈａｔｇａｓ６ｐｏｓｓｉｂｌｅｉｎｖｏｌｖｅｄｉｎｔｈｅｏｒｉｇｉｎａｎｄｐｒｏｇｒｅｓｓｏｆｐｒｅｅｃｌａｍｐｓｉａｔｈｒｏｕｇｈｓｏｍｅｍｅｃｈａｎｉｓｍ．３．Ｔｈｅｇａｓ６ｍＲＮａｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎｌｅｖｅｌｓｗｅｒｅｐｏｓｉｔｉｖｅｌｙｒｅｌａｔｅｄｔｏｂｏｄｙｍａｓｓｉｎｄｅｘ，ｔｈｅｂｌｏｏｄｐｒｅｓｓｕｒｅ，ｆｒｅｅｆａｔｔａｃｉｄｓｅｔｎｅａｔｉｖｅｌｃｏｒｒｅｌａｔｅｄｔｏａｌｂｕｍｉｎ．Ｔｈｅ巧ｎｄｉｎｓｓｕｅｓｔｅｄｔｈａｔａｓ６ｙ，ｙｇｙｇｇｇｇｍｉｇｈｔｉｎｆｌｕｅｎｃｅｔｈｅｂｏｄｙｍｅｔａｂｏｌｉｓｍａ打ｄｆｕｒｔｈｅｒｉｎｖｏｌｖｅｄｉ打ｔｈｅｏｃｃｕｒｒｅｎｃｅａｎｄｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔｏｆｒｅｅｃｌａｍｐｓｉａｐＫｅｙｗｏｒｄｓ：ｇａｓ６ｐｒｏｔｅｉｎ；ｇａｓ６ｍＲＮａ；ｓｅｖｅｒｅｐｒｅｅｃｌａｍｐｓｉａ；ｐｌａｃｅｎｔａ６ 山东大学硕±学位论文符号说明及缩略语表符号英文名称中文名称ＰＥＰｒｅｅｃｌａｍｐｓｉａ子痛前期ＨＥＬＬＰｈｅｍｏｌｙｓｉｓ，ｅｌｅｖａｔｅｄｌｉｖｅｒｅｎｚｙｍｅｓ，ａｎｄＨＥＬＬＰ综合征ｓｙｎｄｒｏｍｅｌｏｗｐｌａｔｅｌｅｔｓｓｙｎｄｒｏｍｅ￥６ｒｏｗｔｈｔ－ｏｔｅＧａｇａｒｒｅｓｓｐｅｃｉｆｉｃｐｒｉｎ６生长阻滞特异性蛋白６－－ａＨＩＦ－ｌｅｆａｃｔｏｒａ１ａｈｙｐｏｘｉａｉｎｄｕｅＡｌｌ低氧诱导因子ＴＡＭＴｙｒｏ３／Ａｘｌ／ＭｅｒｒｅｃｑｒｔｏｒｔｙｒｏｓｉｎｅｋｉｎａｓｅＴＡＭ受体酪氨酸激酶亚家ｍＲＴＫｓＲｅｃｅｐｔｅｒｔｙｒｏｓｉｎｅｋｉｎａｓｅｓ受体酷氨酸激酶家族－ｔｔ２ＤＷＤｏｕｂｌｅｄｉｓｉｌｌｅｄｗａｅｒ双蒸水－ｄｗａｔｅｒ三蒸３ＤＷＴｒｉｐｌｅｉｓｔｉｌｌｅｄ水ＰＢＳＰｈｏｓｐｈａｔｅＢｕｆｆｅｒｅｄＳａｌｉｎｅ磯酸盐缓冲液ＣＢＣｉｔｒａｔｅＢｕｆｆｅｒ构機酸盐缓冲液ＣｒｅＣｒｅａｔｉｎｉｎｅ肌酌ＬＤＨＬａｃｔａｔｅｄｅｈｄｒｏｅｎａｓｅ乳酸脱氮酶ｙｇＡＪＬＴＡｌａｎｉｎｅａｍｉｎｏｔｒａｎｓｆｅｒａｓｅ谷丙转氨酶ＡＳＴＡｓｐａｒｔａｔｅａｍｉｎｏｔｒａｎｓｆｅｒａｓｅ谷草转氨酶ＤＥＰＣＤｉｅｔｈｙｐｙｒｏｃａｒｂｏｎａｔｅ焦碳酸二乙酉旨Ｈ２０２ＨｙｄｒｏｇｅｎＰｅｒｏｘｉｄｅ过氧化氨－－Ａｒｃ．ｂｉｓＡｃｒｌａｍｉｄｅｂｉｓａｃｒｙａｍｉｄｅｙｌ丙赚醜胺甲叉双丙締醜Ｋ７ 山东大学硕－上学位论文Ｔｒ－ｍｅ化ｉｓＨＣｌ扣Ｓｈｄｒｏｘａｍｉｎｏｍｅｔｈａｎｅ三（超甲基）氨基甲烧（ｙｙ州ＳＤＳｓｏｄｉｕｍｄｏｄｅｃｙｌｓｕｌｆａｔｅｓｏｄｉｕｍｓａｌｔ十二烧基硫酸钢，ＧｌＧｌｙｃｉｎｅ甘氨酸ｙ８ 山东大学硕±学位论文ｇａｓ６在重度子痛前期患者胎盘组织中的表达及意义硕±研究生：桑洪爱专业：妇产科学导师：马玉燕．Ｗ，刖旨ｅ－ｅｃ２０子痛前期（ｐｒｌａｍｐｓｉａ，Ｐ巧是妊娠期（孕周后）所特有的累及孕妇多器官多系统的疾病，主要表现为突发高血压、蛋白尿、水肿，严重者可伴有头痛、头晕，、眼花等烦内水肿的表现分娩后症状可在短时间内迅速减轻或消失。近年Ｗ来发病率有稳步上丹的趋势。各地报道的子痴前期的发病率略有不同，美国入院分娩的孕产妇，重度子痛前期及子痛的总发病率从１９９８年的０．９４％上升至２００６＾＂１的１．２４％，２０１３年印度报道当地孕产妇子贿前期的发病率约为５．２４％，而据ｗ近期报道２％－６％。，国内孕产妇子痛前期的发病率为子痴前期可增加孕产妇及围产儿发病率及死亡率一。子痛前期进步发展，导致肝功能受损及血液系统、神经系统功能障碍时可伴有子痴发作或者ＨＥＬＬＰ综合征，严重危害孕产妇及围产儿的生命安全。国外文献报道，在所有孕产妇死亡病因中，妊娠期高血压疾病所占＾化例高达１８％。另外，大量国内外证据表明，有子病前期病史的孕妇及其新生了３儿，今后发生必脑血管及代谢性疾病的风险明显增加。目前，终止妊娠是重度子痴前期最有效的临床治疗方式，但终止妊娠使得产妇病情迅速好转的同时也Ｗ伴随着流产率、早产率的升高，围产儿的发病率Ｗ及死亡率大大增加。因此子痛前期，特别是重度子痛前期的诊治及预防是目前产科面临的重大课题。然而一，子痛前期的确切病因至今仍未明确。国内多数学者认同子痴前期是种由不同的外界环境与自身因素共同作用导致的疾病，致病因素包括；胎盘局部血管内皮细胞损伤、局部或全身免疫机制异常、胎盘滋养细胞侵袭异常、自身遗Ｗ一传易感因素等。随着研究的进步深入，目前多数研究更倾向于Ｗ下的结论：轻度子痛前期的发生与母体本身的因素，如血脂代谢、饮食方式、体重指数等相Ｗ＂关；而重度子痴前期的发生多与胎盘形成异常、免疫、炎症等密切相关。其中，９ 山东大学硕±学位论文早期胎盘形成不良（血管生成因子、炎症介质的介导参与）、母胎界面炎症介Ｍ质的失衡等假说是目前研巧的热点。，促使其重塑正常植入期，晩膜细胞侵蚀子宫动脉肌层，血管直径增大，，妊娠囊处于低氧环境供应胎盘充足的血氧。植入初期，利于滋养细胞的増殖。但孕ＴＧＦ－目３下调异常等因素将导致滋养细胞不能成功９周后持续的低氧状态及Ｗ一的从増殖型转化为侵袭型，导致植入异常。异常植入可进步导致胎盘低灌注。胎儿方面，胎盘低灌注导致胎儿宫内生长受限、胎儿窘迫等；母体方面，胎盎的低灌注导致胎盘局部缺血一、缺氧环境，活性氧及自由基增多，胎盘因子释放，系列炎症及相关因子发生改变，造成内皮细胞损伤内皮损伤导致多种血液成分漏出，血小板及纤维蛋白原等正常血液成分于内皮下聚集，单核巨旌细胞吞唆１１５１’Ｗ一，漏出的血液成分形成泡沫细胞进步进展最终形成动脉粥样硬化斑块；另－方面，内皮损伤，，血管紧张性增加舒血管物质分泌减少，血压升高，最终导Ｗ致子痛前期的发生。部分观点认为子煽前期的发病可能与母体对外来妊娠囊或胚胎的过度免疫Ｗ。ｌ２为主的免疫耐受炎性反应有关正常妊娠时母体表现为＾Ｔｈ，Ｔｈ２细施主要分泌白细胞介素６、１０等，与体液免疫密切相关，而Ｔｈｌ细胞则主要参与细胞免ＵＷ疫应答。正常妊娠的维持不仅需要Ｔｈｌ细胞、Ｔｈ２细胞的相对平衡，也需要辅助性Ｔ细胞１７（Ｔｈｌ７）及调节性Ｔ细胞（Ｔｒｅｇ）的对获得性及固有免疫的调节，ｕｉ’ｗ同时树突状细胞在正常免疫调节中也发挥重要的作用。Ｔｈ２为主的免疫利于正常妊娠的维持，而ＷＴｈｌ为主导的免疫与炎症、内皮细胞的损伤及植入异常相Ｋ＂。Ｔｏｌｌ关，参与妊娠并发症树突状细胞可通过下调，如子滴前期的发生发展ｏＵ－样受体（ＴｌｉｋｅＲｅｃｅｐｔｏｒｓ，ＴＬＲｓ）及晚膜佩细胞（在胎盘植入及螺旋动脉Ｕ＂重塑中发挥重要作用），促进炎症的发展。部分研究表明，子痛前期患者体内－－单核细胞过度激活，激活的单核细胞合成更多的促炎症因子，如ＩＬ化、比６、－８等比。与正常巧娠妇女相比，重度子痛前期患者外周血及胎盘沮织中存－－在多种炎症因子失衡－，如子爛前期患者外周血及胎盎组织中化６、比８、ＴＮＦＵ＂ａＦＮ－、Ｉ丫等炎症因子升高。越来越多的证据显示多种炎症因子参与重度子痴前期的发生发展，因此调控细胞因子的表达成为防治重度子痛前期的重要策略之〇一ｇａｓ６是种生长停滞特异性基因编码的维生素Ｋ依赖性分泌蛋白，可表达于多种组织、细胞，女日：小肠、肺、肾、胎盘、内皮细胞等，其中，ｇａｓ６在胎１０ 山东大学硕±学位论文ＥＷ盘等组织中高表达，而肝脏则几乎不表达该蛋白。ＴＡＭ受体酪氨酸激酶（Ｔｙｒｏ３／Ａｘｌ／Ｍｅｒｒｅｃｅｐｔｏｒｔｙｒｏｓｉｎｅｋｉｎａｓｅ）是受体酪氨酸激酶家族的亚家族，主要包括Ａｘｌ、Ｔｙｒｏ３及ＭｅｒＨ个成员，均为阱ｓ６受体，其中Ａｘｌ对ｇａｓ６有高ＵＷ－ＴＡＭ度亲和性。Ｇａｓ６通路通过多种途径在不同的组织细胞中发挥不同的生物Ｍ＂＂学效应，与血管的稳态、炎症及免疫调节密切相关。如：研究表明，内皮细＂＂胞表达组织因子需要ｇａｓ６通路的介入，故ｇａｓ６在凝血过程中发挥了重要作用，在血管损伤小鼠模型中，ｇａｓ６可促进组织因子的释放，促进血小板血栓的形成＂５１，可检测到血管内皮细胞、血管平；而在人类及小鼠的动脉粥样硬化斑块中滑肌细胞及单核－巨随细胞高表达阱ｓ６且ａ，ｇｓ６的表达水平与血管动脉粥样斑块的严重程度密切相关。而ｇａｓ６敲除小鼠粥样斑块内炎症因子减少、粥样斑块ｔｗ更加稳定，，抑制ｇａｓ６表达可增加粥样斑块稳定性通过帮向治疗，预防斑块破裂后血小板血栓的形成，有较好的应用前景ａｓ６ｘｌ基；ｇ及ａ因及其多态性与肥胖、系统性炎症、膜岛素抵抗、内皮细胞损伤等密切相关血浆ｇａｓ６水ＵＷ平可用于脏测系统性红斑狼疮疾病的治疗疗效及复发情况。综上，ｇａｓ６参与炎症、免疫及血栓形成等生理病理过程的调节。因此，我们推测，Ｇａｓ６可通过参与胎盘血管重塑及母胎界面炎症因子调节等多个过程，从而参与子痛前期的发生发展。在本研究中，我们通过检测子痛前ｓ６期及正常妊娠孕妇胎盘组织中ｇａ蛋白及基因水平的表达情况，并将其与多个临床指标做相关性分析，探讨ｇａｓ６在子痛前期发病及疾病进展中的作用。ＩＩ 山东大学硕±学位论文材料和方法１１１４．研究资料与分组将２０１３年０月至２０年６月期间于我院产科行剖宫产分娩的６２例单胎孕妇纳为研究对象。其中，重度子痴前期患者３２例，作为实验组，正常晚期妊娠孕妇３０例，作为对照组。实验组患者年龄（３１．６６＋３．２８）岁，分娩孕周（３５．７３＋２．５７）周；对照姐孕妇年龄（３０．１０＋５．巧５）岁，分娩孕周＋（３９．６７１．０４）周，实验组患者与对照组孕妇在年龄方面相比较，两者无统计学差异；但实验组患者的分娩孕周显著小于对照组孕妇分娩孕周，两组间差异有统计学意义（；Ｘ〇．０５）。重度子痛前期的诊断标准参考乐杰主编的第７版《妇产》，血压＞１６０１１０ｍｍＨ、２４ｈ２．０ｇ／２４ｈ科学重度子痴前期是指：／ｇ尿蛋白＞或者随机尿蛋白＞（＋＋）或者伴有其他脏器损害的症状（如ＰＬＴ＜１００Ｘ１０７ｌ，Ｃｒｅ＞１０６ｕｍｏｌ／ｌ，谷丙转氨酶／谷草转氨酶升高，现酸脱氨酶升高，持续性上腹部不适。入选对象均无烟酒等不良嗜好，亦，持续性头痛或其他脑神经或视觉障碍）无慢性高血压疾病、糖尿病、胎膜早破、系统性红斑狼疮或其他妊娠并发症及合并症。所有研究对象均己签署知情同意书。２．标本采集及处理剖宫产娩出胎盘后无菌纱布擦拭子宫腔，取约４００ｍｇ的蚁膜组织ｌＯｍｉｎ，避，，并在内于胎盘母体面近中央处开出血区域和巧化点取体ＸＸ’２．．ｍ，ＰＢＳ（积约．０２０２０ｃ大小的胎盘组织用预冷的碟酸盐缓冲液）充分清洗干净（肉眼淡红或近苍白色），，后无菌纱布拭干两种组织分别取部分放入一４％的中性福尔马林液中固定段时间，Ｌ义备石蜡包埋剩余部分分装，组织切片；’５ｍ－ｌ排ＮＡ８０Ｃ。于多个１．管（无Ｒ酶）中，做好标记，于冻存备用３．采用酶联免疫组化技术检测胎盘及税膜组织中ｇａｓ６的定位表达情况３．１主要试剂和仪器３．１．１主要试剂１）兔抗人生长停滞特异性蛋白６（ｇａｓ６）多克隆抗体ＩＧｇ；购自美国ａｂｅａｍ公司。１２ 山东大学硕±学位论文２）（ＳＡＢＣ）免疫姐化染色试剂盒：购自北京中杉金桥生物技术有限公司０．３％札０法离子水试剂Ａ；正常山羊血清封闭液试剂Ｂ；生物素化二抗工作液（生物素标记山羊抗兔ＩｇＧ）试剂Ｃ一过氧化物酶复合物；链酶亲和素３）ＤＡＢ显色试剂盒；购自北京中杉金桥生物技术有限公司试剂Ａ；ＤＡＢ缓冲液试剂Ｂ；ＤＡＢ底物试剂Ｃ；ＤＡＢ显色剂４）酶联：双蒸水Ｓ（ｐＨ７．４）、中性福尔马免疫组化实验其他常用试剂、ＰＢ林溶液二甲、、盐酸酒精等、石蜡、苯梯度酒精、构機酸盐缓冲液３．１．２主要仪器１）包埋机：孝感市宏业医用仪器有限公司２）切片机：德国袜卡公司３）烤箱：日本ＳＡＮＹＯ公司４）微波炉５）移液器：Ｔｈｅｒｍｏ公司’６４Ｃ冰箱－）、８０度冰箱：山东青岛海尔集团７）免疫组化的常规用品：载玻片、盖玻片、载玻片染色架、抗原修复盒、湿盒、无菌枪头、ＥＰ管等８）光学显微镜：日本尼康公司９Ｎ－）ＩＳＥｌｅｍｅｎｔｓＦ思微镜图像采集软件：日本Ｎｉｋｏｎ公司３．１．３主要溶液配制１）憐酸盐缓冲液（ＰｈｏｓｐｈａｔｅＢｕｆｆｅｒｅｄＳａｌｉｎｅ，ＰＢＳ）：首先配制Ｏ．ｌｍｏＶＬ？州典，的ＰＢＳ；４ｇＮａ札ＰＯ、９０ｇＮａＣｌ、４０Ｎａ２ＨＰ０，ｌ州化放于１０００ｍｌ烧杯中，称取，ｇ加少量（小于１０００ｍｌ），加入少量双蒸水定容至１０００ｍｌ双蒸水充分揽拌至溶解；后取１００ｍｌ源合均匀的０．Ｉｍｏｌ／Ｌ的ＰＢＳ，加双蒸水９００ｍｌ稀释成Ｏ．Ｏｌｍｏｌ／Ｌ的ＰＢＳ，°将溶液ｐＨ调整至７．４，后放置于４Ｃ冰箱中预冷备用。１３ 山东大学硕±学位论文２）中性福尔马林溶液（１０％）：４０％的甲醒溶液１份与０．Ｏｌｍｏｌ／Ｌ的ＰＢＳ９份混合均匀，密闭保存，放置各用。３）构機酸盐缓冲液（ＣｉｔｒａｔｅＢｕｆｆｅｒＣＢ）；称取巧樣酸０．４３，ｇ，梓樣酸钢ｇ，于９００ｍｌ双蒸水中磁拌溶解，后补加双蒸水定容至１０００ｍｌ，调整ｐＨ值至６．０，混匀后于室温放置备用。３．１．４实验方法注意事项：于切片正反面做标记；整个实验过程中，切片组织不能干燥。１）石蜡包埋的胎盘及晚膜組织分别连续４ｕｍ厚度切片。°Ｃ２）烤片：石蜡切片放入７０恒媪烤箱约３０分钟。３）脱蜡、水化：将烤好的石蜡切片取出，立即依次放入通风榻中二甲苯Ｉ、一二甲苯ＩＩ中各ｌＯｍｉｎ脱去石蜡１００％酒精ＩＩ，紧接着放入梯度酒精（１００％酒精Ｉ一一一一９５％酒精８０％酒精７０％酒精５０％酒精）脱水，各梯度酒精分别脱水３分钟，０分钟，洗去脱水完成后，将切片置于自来水流水中冲洗１切片及组织表面酒精。４）微波抗原修复：向抗原修复盒中加满拘株酸盐缓冲液，畳微波炉内加热煮沸后取出，将切片浸入修复盒缓冲液中（注意液体没过切片，防修复过程中’５Ｃ液体蒸发后组织干燥），继续间断加热１分钟（使修复盒内液体温度保持在９５左右）。于室温下放置直至自然冷却至室温。后用ＰＢＳ液冲洗３次，３ｍｉｎ／次。５）消除内源性过氧化物酶；拭干切片上组织周围残存的ＰＢＳ液，将切片平铺，３％的过（ｍ于湿盒中每张切片滴加２滴氧化氨巿化）液体，置于室温下赔育２０ｉｎ，灭活内源性过氧化物酶活性。ＰＢＳ冲洗同上。６）封闭非特异性抗原：同上将切片组织周围的液体拭干，滴加试剂Ａ（血清封闭液），于室温进行脾育３０ｍｉｎ，充分封闭组织非特异性抗原Ｗ尽量消除纽织切片的非特异性染色，将多余液体倾去。无需ＰＢＳ再次冲洗。７一）加抗：提前数分钟将ｇａｓ６抗体按１：５０的比例稀释，后用移液器向每张°？切片组织滴加５〇ｕｌ稀释后的抗体，置于湿盒中，４Ｃ冰箱过夜（１２１６小时）。８）复温；次日，将切片取出于室温中避光复温化，ＰＢＳ液冲洗３次，５ｍｉｎ／次。９）加二抗：拭干组织周边的残存的ＰＢＳ液，将切片平铺于湿盒中，每张切片滴加试剂Ｂ（二抗）２滴于沮织上，而后室媪下进行二抗脖育２０ｍｉｎ，Ｐ化液冲洗３次，３ｍｉｎ／次。１４ 山东大学硕±学位论文１０）辣根酶标记链霉卵白素：将組织周围的液体擦干，后平放于湿盒中，每张切片滴加２滴试剂Ｃ，室温下进行腊育２０ｍｉｎ，ＰＢＳ液冲洗同上。１１）ＤＡＢ显色：按说明书提示的１ｍｌ双蒸水步驟，在避光条件下，分别依次向中滴加试剂Ｂ、Ｃ各１滴，混合均匀，再滴加１滴试剂Ａ，充分震荡混匀。每张切片滴加混合均匀的ＤＡＢ试剂ｌＯＯｕｌ在姐织上进行显色，控制显色时间（１分钟），显色完成后立即放入自来水中冲洗终止。注意：ＤＡＢ工作液避光保存，需现用现配，整个操作过程注意避光，且该液体有毒，需做好防护工作。１２）苏木素染液复染：３０ｓ，自来水冲洗。１３）：３ｓ，自来水冲洗盐酸酒精分化。Ｈ）：１５ｓ，自来水冲洗氨水返蓝；一一１５）脱水透明：将载玻片按序置入梯度酒精巧０％酒精７０％酒精８０％酒一一一一精％％酒精７０％酒精１００％酒精Ｉ１００％酒精ＩＩ）中各３ｍｉｎ进行脱水，后依次浸入二甲苯Ｉ与二甲苯ＩＩ各ｌＯｍｉｎ。一１６）封片；于姐织处滴加中性树胶，沿侧缓慢放置盖玻片，注意整个过程不要产生气泡。义１．５结果判定阳性染色指的是胎盘或蚁膜组织中细胞的胞浆或者胞核内出现黄色、踪黄色或者褐色染色颗粒，染色高于背景颜色。阴性染色指细胞浆基本不着色，而细胞核呈蓝色染色一。最终染色结果由同观察者判定。４－．采用ＲＴＰ抓技ａｓ６ｍＲＮａ在胎盘组织中的定量表达情况术检测ｇ。４．１．１主要试剂Ｉ）ＲＮＡ提取中所用试剂；ＤＥＰＣ、Ｔｒｉｚｏｌ（日本Ｔａｋａｒａ、氯仿公司）、；蒸水等２）反转录过程所用试剂：ｋａｒａ公司）３ＤＷ（兰逆转录试剂盒（购自日本化、蒸水）３）巧光定量ＰＣＲ过程中所需试剂：ＳＹＢＲＧｒｅｅｎＰｒｅｍｉｘ试剂盒；（购自日本Ｔａｋａｒａ－ａｃ公司）内参基因目ｔｉｎ及目ｓ６（上海生工生物工程股份有限公；的基因阱引物司），引物序列见下图：１５ 山东大学硕±学位论文目的及内参基因引物序列基因引物序列＇＇上游－－日ＴＧＣＴＧＴＣＡＴＧＡＡＡＡＴＣＧＣＧＧ３＇＇－ＣＡＴＧＴＡＧＴＣＣＡＧＧＣＴＧＴＡＧＡ－３ｇａｓ６下游５＇＇－上游５－ＴＧＧＣＡＣＣＣＡＧＣＡＣＡＡＴＧＡＡ３＇＇０－ａｃｔ－－ｉｎ下游５ＣＴＡＡＧＴＣＡＴＡＧＴＣＣＧＣＣＴＡＧＡＡＧＣＡ３４．１．２主要仪器１）超净工作台２）超高速低溫离也机３）电动匀浆机°‘４－２０Ｃ－）、８０Ｃ冰箱巧移液器、、冰盒、ＥＰ管、滤纸、手套、口罩、锡纸慑子、组织剪等６）基因扩増仪４．１．３主要溶液配制。７５＾艺醇ＤＥＰＣ水：每１份ＤＥＰＣ水加３份无水己醇混匀备用。４．１．４实验方法４．１．４．１提取组织中总的ＲＮＡ；实验中所用吸头及ＥＰ管均处理去除ＲＮＡ酶，组织剪、０１１．％的ＤＥＰＣ水浸泡２ｈＲＮＡ酶，后应用高压蒸汽灭菌达２０分钟，辕子等均用，灭活一使得ＤＥＰＣ得Ｗ挥发，并使用，最后烘千备用。操作过程中带双层口罩次性无菌手套：，具体操作步骤如下‘－１）准备好所需要的１．５ｍｌ的ＥＰ管，处理好的组织剪、摄子等。将组织从８０Ｃｌ冰箱取出，向每个阱管中加入ｔｒｉｚｏＨ式剂１ｍｌ，放于冰上，后用姐织剪剪取约ＯＯｍｇ，ｚｏｌ试ＥＰ管中，匀浆，至匀浆液接近透明色的组织放入含ｔｒｉ剂的，室湿静置５分钟，Ｗ上操作均于冰上进行。°、２ｉ＇）４Ｃ１２０００ｒ／ｍｎ，于冰冻离。机上离必巧分钟。注意提前打开冰冻离屯，机预冷。一ＥＰＥＰ２００３）吸取上层上清液至另标记好的管，后向每个管加入ｕｌ氯仿，振荡器上充分震荡１目Ｓ至整个液体颜色呈现均匀的粉红色（无分相），后室温静置５，分钟。１６ 山东大学硕±学位论文°４于冰冻离也机上再次离屯、）４Ｃ１ｉｎ１，２０００ｒ／ｍ，５分钟，取出离瓜后的ＥＰＰ管中管（注意勿晃），可见Ｅ液体出现分层现象：最上层为无色上清液，含ＲＮＡ等物质，，；中间层为白色主要含蛋白质等成分主要；最下层是有颜色的有机相为组织纤维成分等。５）沿管壁少量多次吸取上清巧Ｏｕｌ／次，宁少勿多，勿巧破中间白膜层，ＵＮＡ纯度一标记好的ＥＰ管提高Ｒ），至另（无ＲＮＡ酶）中，后加入与所取上清液相同体积的异丙醇，将ＥＰ管至少上下颠倒１０次混匀，室温静置１０分钟。°于冰冻离必机上进行离也６）４Ｃ，Ｉ２０００ｒ／ｍｉｎ１０分钟。，７ＥＰ、，可见管底少量沉淀，）取出管，小屯倾去上清每个ＥＰ管加入１ｍｌ乙醇ＤＥＰＣ，水，上下颠倒洗涂ＥＰ管及沉淀后室温静置日分钟。°４ｉ、８）再次Ｃ，１２０００ｒ／ｍｎ，于冰冻离也机上进行离也１０分钟９）、弃去上清小屯，将ＥＰ管倒扣于滤纸上，待ＲＮＡ干燥后，加适量（视沉淀体积而定）ＤＥＰＣ水，室湿下静置１０分钟，使ＲＮＡ充分溶解，测量ＲＮＡ浓度（应用紫外？１．分光光度计测量ＲＮＡ浓度，０Ｄ值在．８２２之间表示ＲＮＡ纯度及浓度均在较为合０Ｄ－，则需再次提取ＲＮＡ并且做好详细记录８（ＴＣ适的范围，若值超出该范围，放置于冰箱中存备用，减少ＲＮＡ降解。４．１．４．２配制反转录体系，反转录合成ｃＤＮＡ：所用试剂盒为反转录试剂盒（日本ＴａＫａＲａ公司），按下列组分配制ｌＯｕｌ反转录体系（其中每ｌＯｕｌ体系中ＲＮＡ的使用量不超过５（Ｘ）ｎｇ）：ｌＯｕｌ反转录体系试剂使用量ＳＸＰｒｉｍｅＳｃｒｉｐｔＢｕｆｆｅｒ４ｕｌＰｒｉｍｅＳｃｒｉｐｔＲＴ巨ｎｚｍｅＭｉｘＩｌｕｌｙ０１ｉｇｏｄＴＰｒｉｍｅｒｌｕｌＲａｎｄｏｍ目ｍｅｒｓｌｕｌＴｏｔａｌＲＮＡ＋３ＤＷＳｕｌｉ，先按反应数＾的量配制ｂｕｆｆｅｒｍｉｘ，ｐｒｍｅｒ及反应液的配制于冰上进行，ｒａｎｄｏｍ的混合体系，２００ｕｌ的小ＥＰ管中ＲＮＡ，最后分装到，再分别加入适量后用３ＤＷ定容至ｌＯｕｌ。ＥＰ管置于基因扩增仪中将配制好的装有反应液的，设置调整反应条＂。件：ｓｔａｇｅｌ．反转录反应过程：３７Ｃ１５ｍｉｎ；ｓ１：ａｇｅ２．促进反转录酶的失活：８５０１７ 山东大学硕±学位论文ＰＣ一５ｓｅｃ。１０倍２ＣＴＣ反应停止后，取出反应液，用ＤＥ水稀释，做好标记，于保存备用。４．１．４．３实时巧光定量Ｐ抓所用试剂盒为ＳＹ抓扣ｅｅｎＰｒｅｍｉｘ试剂盒日本ＴａＫａＲａ公司）。配制反应液时（应注意避光，且整个配制过程应于冰上进行。按照下列试剂组成成分于冰盒上配制ｌＯｕｌＰＣＲ反应体系：ｌＯｕｌＰＣＲ反应体系试剂使用量ＳＹ抓ＰｒｅｍｉｘＥｘＴａｑ日．Ｏｕｌ上游引物〇．２ｕｌ下游引物〇．２ｕｌＲ０ＸＲｅｆｅｒｅｎｃｅＤｙｅ０．２ｕｌｃＤＮＡ模板ｌ．Ｏｕｌ３ＤＷ３．４ｕｌ总共ｌＯｕｌ按试剂盒说明配制如上反应体系，每个反应体系所用试剂及用量见上表，Ｗ－ｔ＋１ｅｒｍ、ｒ目ａｃｉｎ作为内参基因，先按反应数的量分别配制上、下游ｐｒｉｍ、ｉｘｏｘ及３ＤＷ的混合体系，分装到反应管中（于冰盒上进行），再依次加入相应的ｃＤＮＡ，每个标本多设两个副孔（取平均值，减少误差），后ｌＯＯＯｒ离必２分钟，放入巧光°°°一５定量ＰＣＲ仪中进行反应，设置反应条件：９５Ｃ３０秒（预变性）９５Ｃ秒，６０Ｃ３１秒（ＰＣＲ反应），共４０个循环。设置溶解曲线，Ｗ检测扩增终产物是否具有特异性。４．１．５结果判定２－ＲＴ－ＰＣＲ的最终实验数据采用ＡＡＣｔ法分析，并将阱ｓ６ｍＲ化的表达水平与各临床指标做相关性分析。５．采用ｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔ技术检测ｇａｓ６蛋白在胎盘组织中的定量表达水平５．１．１主要试剂１８ 山东大学硕±学位论文１）细胞裂解液２）ＢＣＡ蛋白浓度测定试剂盒、标准蛋白３）ＰＶＤＦ膜４）蛋白ｍａｒｋｅｒ５）兔抗人生长停滞特异性蛋白６（ｇａｓ６）多克隆抗体ＩＧｇａｂｅａｍ：购自美国公司。６）鼠抗兔单克隆抗体ＩＧｇ７）化学发光试剂盒８Ａｒｃ－）．ｂｉｓ、ＴｒｉｓＨＣｌ、Ｇｌｙｃｉｎｅ甘氨酸）等常用试剂（５．１．２主要仪器１）摇床、匀浆器２）电泳仪３）半干转膜仪４）酶标仪５）恒温水浴箱°°６）４Ｃ－－、２０Ｃ、８ＣＴＣ冰箱５．１．３主要溶液配制１）１２％的分离胶ｌＯｍｌ成分体积（ｍｌ）双蒸水３．２６Ａｒｃ．ｂｉｓ４Ｔ－：ｒｉｓＨＣｌ（８．８）２．５３４１０％ＳＤＳ０１．ＡＳＰ０．１ＴＥＭ即０．００４２）６％的浓缩胶成分体积（ｍｌ）双蒸水２．２Ａｒｃ．ｂｉｓ０．８１９ 山东大学硕±学位论文Ｔｒｓ－ｉＨＣｌ（８．８）１１０％ＳＤＳ０．０４ＡＳＰ０．０２ＴＥＭ防０．００４３）电泳缓冲液ｓ－ｂａｓｅ１４称取Ｔｒｉ（Ｈ楚甲基氨基甲烧）３０．２ｇ，ＧｌｙｃｉｎｅＣ甘氨酸）４．Ｏｇ，ＳＤＳ（十二搞基硫酸钢）ｌＯｇ于ｌＯＯＯｎｎｌ烧杯中，加双蒸水（少于１０００ｍｌ）充分震荡使其溶解，后用双蒸水定容至１０００ｍｌ。使用时１份上述溶液加９份双蒸水，稀释混匀后备用。４）转膜缓冲液－取５８ｇＴＹｉｓｂａｓｅ，３７ｍｌ１０％ＳＤＳ，２９ｇ甘氨酸，加入双蒸水（少于１０００ｍｌ）中充分震荡使其溶解１０００ｍｌ。使用时１２，后用巧蒸水定容至，每份上述溶液，加７份甲醇溶液，后溶于份量的双蒸水混匀备用。日）１０％Ｓ肪ｌＯｇＳＤＳ加双蒸水定容至１００ｍｌ。６）ＴＢＳ溶液Ｉｄｓ－ｂａｓｅ２４．２ｇ，化Ｃ１８０ｇ加少量双蒸水震荡至充分溶解，向溶液中加入浓盐酸１０ｍｌ，双蒸水定容至１０００ｍｌ。使用时，应用双蒸水稀释１０倍。７）ＴＢＳＴ溶液ｌＯＯＯｍｌＴＢＳ溶液中加入ｌｍｌＴｗｅｅｎ２０（用移液器口剪大于吸取每，将吸头，利Ｔｗｅｅｎ２０），震汤混匀备用。８）封闭液巧％的脱脂牛奶）每１００ｍｌ混合均匀的ＴＢＳＴ溶液，加入日ｇ脱脂奶粉震荡漏匀，４Ｃ下保存备用，使用前提前取出室温复温。５．１．４实验方法５．１．４．１胎盘组织提取蛋白质（此步骤尽量在冰上操作，Ｗ降低蛋白质的降解）－８１）将组织从（ＴＣ取出后冰上溶解，取约３０ｕｇ胎盘组织置于ＥＰ管中，用剪刀尽量将其剪碎。２０ 山东大学硕±学位论文２）每个ＥＰ管中加入细胞裂解液（含ＰＭＳＦ，用于抑制蛋白酶）４００ｕｌ，使用匀浆器于冰上进行匀浆，直至匀浆液呈现近透明色。３）室温静置裂解３０ｍｉｎ、、，于高速低湿离屯日ｍｉｎ（１２０００ｒｐｍ后机（预冷）中离屯，°一４Ｃ上清于另－），勿晃动，取标记好的离私管中并置于２（ＴＣ保存备用。５．１．４．２蛋白质巧度测定化ＣＡ法）＝１）根据待检测样品Ｗ及掠准蛋白的数目，按照Ａ：Ｂ加：１的体积比配置适当总体积的ＢＣＡ工作液。２）．５ｍｍｌ山１如１１将标准品稀释至０ｇ／，按０，１１１２。１８。１１２１）１６１１１２０川体，，，，，，积量按序分别加入到９６孔板相应孔中，用ＰＢ巧ｈ齐到２０ｕｌ。３）向９６孔板相应孔内加入ｌｕｌ及０．５ｕｌ待测蛋白样品，共设置３个重复，随后用ＰＢＳ补齐至２０ｕｌ。４）分别向待测蛋白样品及杨准品的相应孔内加入２００ｕｌ己配置好的ＢＣＡ工作’液，３７Ｃ摇床上解育３０分钟。５）冷却至室温，用酶标仪测定波长Ａ５６２ｎｍ处的吸光度值，根据所测吸光度值绘制标准蛋白曲线。，计算出待测蛋白的浓度随后将蛋白与ＳＤＳ比例为４：１潑匀°°ｌ〇〇Ｃ金属浴－稀释后，加热５ｍｉｎ使蛋白变性。８０Ｃ冷藏各用。，置于冷却后放入．５．１．４．３ＷｅｓｔｅｒｎＢｌｏｔ－１）ＳＤＳＰＡ犯电泳、①将玻璃板梳子、小烧杯用肥皂水洗净，双蒸水冲洗后，瞭干备用。：．１．３中试剂配制１２％②配制分离胶在小烧林中按５的分离胶，混匀后迅速加入两玻璃板间，注意所加液体高度在梳子尺从下，再缓慢加满Ｈ蒸水，静置，胶凝固的表现为液体中上方看见折线一，此时可进行下步实验。：将浓缩胶上方的水倒出。按５１６％③配制浓缩胶．．３中试剂配制的浓缩胶，并移至分离胶上方，向浓缩胶中垂直插入对应梳子，静置。④待浓缩胶凝固，放入电泳槽相应位置，加入适量电泳液。⑤拔出梳子，并向相应的上样孔内加入蛋白样（８０ｕｇ），两端上样孔内各加入日ｕｌ蛋白ｍａｒｋｅｒ作为对照。，：Ｓ１，７５Ｖ，３０ｍｉｎ２１５０Ｖ５０ｍｉｎ⑥将电泳仪与电泳槽相连接；Ｓ，，设置程序，观察到漠酌盛向下靠近分离胶底部时可终止电泳。２１ 山东大学硕ｄ：学位论文２）转膜（半干转）５ｓ、将０，．２２ｕｍ的ＰＶＤＦ膜在新的甲酸溶液中浸泡１置于转膜液中备用。小屯取出玻璃板间的分离胶置于转膜液中。在半干转仪上加入适量转膜液，从上到下依次放好滤纸、ＰＶＤＦ膜、分离胶、滤纸，随后设置电压１５Ｖ转膜Ｉｈ。注意：操作过程中避免产生气泡，自此步骤后，避免ＰＶＤＦ膜干燥。３）封闭转膜完成后，将ＰＶＤＦ膜右上角剪角标记好正反，放在封闭液中，摇床上封闭２ｈ。４一）抗赔育’一ＰＶＤＦ４：２００，膜上Ｃ冰箱解育过夜。取适量稀释好的抗（１）滴加于相应的，ＶＤＦ一，注意；避免Ｐ膜正面接触其他物质，抗脾育前用滤纸吸去膜上多余的封闭液Ｗ免抗体的稀释。５）二抗赔育将ＰＶＤＦ膜的正面向上放于ＴＢＳＴ液体中，于摇床上进行冲洗，ｌＯｍｉｎ／次，共３次。用封闭液靖释二抗（１：５０００），将膜转入其中，摇床上解育化，随后用ＴＢＳＴ３次ｌＯｍｉｎ。溶液摇床上冲洗，每次６）曝光将化学发光试剂盒中Ａ：１比：Ｂ按１例充分混匀后滴加到膜上（注意ＰＶＤＦ膜正Ｉｔ反，ｍａｇｅＱｕｎＬＡＳ程序进行曝光。，避光条件下进行）放入曝光仪器中，采用５．１．５结果判定结果通过比较分析目的蛋白Ｗ及内参蛋白的相对灰度值取得。采用ＩｍａｇｅＪ软件分析测定两种蛋白的相对灰度值。５．统计学分析应用ＳＰＳＳ１７．０统计软件对数据进行统计分析，采用Ｋｏ－ｌｍｏｇｏｒｏｖＳｍｉｒｎｏｖ法对实验数据进行正态分布检验，服从正态分布的结果均Ｘ±Ｓｎｎ－Ｗ采用表示；应用独立样本ｆ检验Ｗ及Ｍａｈｉｔｎ巧Ｕ检验进行组间数据差异性的比较；采用Ｐｅａｒｓｏｎ简单相关系数来进行实验数据与临床数据的相关性研究，齡认为数据之间有统计学差异。２２ 山东大学硕±学位论文结果１．研究对象的基本资料表１：两組研巧对象的基本资料实验组对照组Ｐ值年龄（岁）３１．６６＋３．２７６３０．１＋５．１５５０．１７４＋＜０＊孕周（周）３５．７３２．５６５３９．６７＋１．０３６．００１＋＋＜＊胎儿体重（ｇ）２４８７．５９３６．０２４３５４５５６８．１７２０．００１收缩压（ｍｍＨｇ）１６０．９＋１６．６４８１１６．１７＋８．１３７＜０．００１＊舒张压（ｍｍＨｇ）１０２．０＋１２．６９７７３．７７＋８．０３３＜０．００１＊Ｄ－二聚体（００．５ｕｇ／ｍｌ）２．６３１２＋３．０９７６４１．９９巧±２．８１６９４０．４３５血糖－＋３．９６．ｌｍｍｏｌ１４．０６７９＋．（／）０．７１０２１３．９４６５０．：３別４７０２４６〇－８５ｕｍｏ１＜＊游离脂肪酸（ｌｌ／ｄｌ）７３．５８＋１６．７９５４３＋２．１３４０．００１－＋３９７頭〇１１５８１１＋＜肌巧巧／）．８３．０１６４３．０７９．９７１０．００１＊４０－１＋＜巧／１３０１１１白蛋白（ｇ）．５７５．２８４３５．３７＋４．３０４０．００１＊９血小板－＋＋（（１２５３５０）Ｘｌ〇）１６４．３９５６．５３２巧５．５５１２９．１３９０．００６＊－＋７ｍｒａｏ＋１甘油Ｈ醋（０．３１．ｌ／ｌ）３．９６３５１．４１４８６２．７６８４．１６％０．０５＊ｐ＜０．０５表１示两姐研巧对象的基本资料，可Ｗ看出，两组间年龄、血糖、甘油Ｈ酷等无统计学差异，但孕周、血压、白蛋白、血小板等指标明显不同。实验组平均孕周及胎儿体重较小，血小板、白蛋白较低，但血皮、游离脂肪酸、肌酌指标均显著高于对照组人群。，两组间数据有统计学差异２．ｇａｓ６在胎盘及魄膜组织中的定位表达健康孕妇组及重度子痛前期组孕妇胎盘及晚膜组织中均有ｇａｓ６里白表达，且两组孕妇ｇａｓ６蛋白的表法部位相同，在胎盘组织中表化主要定位于胎盘合体滋养细胞的胞质及胞核中，在晚膜组织中表达主要定位于晚膜细胞的胞质及胞核中。但与健康孕妇组比较，重度子滴前期组孕妇胎盘及蚁膜组织中的ｇａｓ６蛋白－１Ｆ染色程度更深。（见图１Ａ）２３ 山东大学硕±学位论文＂，Ａｒ／＞束如、：＊辱縫ｒ裝鳴絲图１Ａ：ｇａｓ６在重度子痛前期孕妇胎盘组织中的表达。重度子楠前期组孕妇胎盘组织中合体滋养细胞胞质及胞核中可见ｇａｓ６蛋白染成栋黄色、褐色颗粒状物质。（ＳＰＸ４００）、？飞ｒ：‘卢？去沪乂户？Ｖ少、＞？Ｖ？乂＾安？＇１Ｖ、々１Ｖ，？六；Ｃ女＾、１皆巧、资ｒ义私＊卿１Ｂ图：ｇａｓ６在正常妊娠孕妇胎盘组织中的表达。健康孕妇组孕妇胎盘组织中合体滋养细胞胞质及胞核中可见ｇａｓ６蛋白染成惊黄色、褐色颗粒状物质，但染色程度较重度子痛前期组略浅。（ＳＰＸ４００）２４ 山东大学硕壬学位论文＾：＇’＇＇戸神＊．卢ｓ－／？識；成方：．？乂＾然ｆ％二苗＊户常掉細．户气？，＊巧在３．？＾，５－戸％，ＴｗＶ．Ｖ圓１Ｃ：ｇａｓ６在重度子痛前期孕妇蚁膜组织中的表达。重度子滴前期组孕妇蚁膜组织中晚膜细胞胞质及胞核中可见ｇａｓ６蛋白的黄色、踪黄色染色颗粒，其中胞核染色程度较胞质加深。（ＳＰＸ４００）？．？■？Ｗｍｒｙ＂—／乃，．癸２ｆＶ．句乃一＊矜严＇一＾ｔ，－外－．書．ｖ户，；Ｖ：ｙ煮，式＊舍獻、．：＾，‘－芳．ＶＶ，罕＊．，％，＇＾三＊＇Ｘ＇、＾Ｖ、ｔｉ＊－＇去‘，，ｖ？．Ｄ：ｇａｓ６在正常妊娠孕妇脱膜组织中的表达。健康孕妇组蚁膜组织中蚁膜细胞胞质中可见ｇａｓ６蛋白的黄色染色颗粒，偶可见胞核呈现ｇａｓ６蛋白的踪黄色染色，多数胞核不着色（呈蓝色染色）。（ＳＰＸ４００）２５ ．＇山东大学硕±学位论文＾？，？＇八户Ｅ？；公；，，：ｖ，；：；Ｉ、、？，乂？，＇，Ｖ、，＂、＊？：气、＾＞、）、ｔ／＾ｉＶ、？巧ｊ产＇、Ｖ＼八＾、、，‘＇给＼占导＞Ｖ、＾、、？、，Ｅ：重度子搁前期组孕妇胎盘组织的阴性对照，未见胎盘滋养细胞的胞质及胞核内有ｇａｓ６蛋白染色颗粒。（ＳＰＸ４００）一＊—？－－、＊＊＊Ａ＊ｒ＊？？？？，＊《．＊？＞Ｘ、Ｆ＊？９？不＞、、呼一咕＊？ｇ，电、、冉ｔ、？＊、＞＊—＊、餐？＾＾＞＊、＇？？？＊？？妻、、＊＊＃、－海Ｓ＊Ａ＃？？＊＼＊？乐，．％＊？？？％＞，，、３－？．兴？．＇？＇．４＞％ｄｆ、—＊’、＃＾－，？’＊，’蓋八Ｖ：＇ｒ，；；；＾＊？‘＊？Ａｆ；，；？？、Ｆ；重度子搁前期组孕妇蚁膜组织的阴性对照，未见悦膜组织中蚁膜细胞胞质及胞核内有ｇａｓ６蛋白染色颗粒。（ＳＰＸ４００）２６ ＩＩ学硕上学位论文Ｉ东大义ｇａｓ６ｍＲＮａ在胎盘组织中的表达水平图２；子滴前期患者及正常妊娠孕妇胎盘组织中ｇａｓ６ｍＲＮａ的表达＝０ｐ．００２ｔｏＩ２．０Ｉ１］Ａ器１－Ｉ．５０＞ＡＡＩ－１－０管▲▲▲ＣＤ▲▲▲０－．５ＡＩ恶命■＂－〇．〇？一言１病例组对照组图２中可ｗ看出，重度子楠前期孕妇胎盘组织中ｇａｓ６ｍＲ化表达水平（０．５９６０平（０．＋０２３±．３８０）较正常妊娠孕妇表达水３３７．２）增加，差异显著，具有统计学＜意义（戶０．０５）。４．ｇａｓ６ｍＲＮａ的表达与各临床指掠的相关性分析表２；ｇａｓ６ｍＲＮａ的表达水平与各临床指标的相关性分析ｒ值Ｐ值年龄（岁）０．０９２０．４８７＾体重指数巧ＭＩ，ｋｇ／ｍ）０．２８００．０３７＊收缩压（ｍｍＨｇ．３１２０．０１６＊）０Ｈ２９２０２５＊舒张压（ｍｍｇ）０．．０－Ｄ００．５ｕｇ／ｍｌ０１二聚体（）．０３３０．８３－ｌ游离脂肪酸ａ〇８５ｕｍｏ／ｃｌｌ）０．４３５０．００４＊－５３９７ｕｍｏｌ／Ｌ０．３１８０１肌酢（）．０６＊－－０白蛋白（４０巧ｇ／Ｌ０．３５２．００７＊）３－－甘油Ｈ醋他１．７ｍｍｏｌ／Ｌ）０．０２１０．８９７＊＜？０．０日／２７ 山东大学硕ｄｒ学位论文表２示ｇａｓ６在ｍＲＮａ水平的表这与各临床指标的相关性．从上表可Ｗ看出，ｇａｓ６基因水平的表达量与患者的体重指数、血压、游离脂肪酸、肌巧、白蛋白等相关，其中，与体重指数、、，、游离脂肪酸舒张压收缩压及肌巧水平正相关与白蛋白水平负相关。５．ｇａｓ６蛋白在胎盘组织中的表达水平图３（Ａ／Ｂ）：ｇａｓ６蛋白在胎盘组织中的表达水平ＮＰＳＰＮＰＳＰＮＰＳＰＧａｓ６齡＇乃蝴＊＾立。觀－、－巧＾子－＇＇Ｉ－．－１＇贴＾晒Ｊ１呂－ａｃ寒晒ｉｌ難麵Ｉ＇ｔｉｎＩ麵ＩＰ－ｔ图３（Ａ）：ｇａｓ６及目ａｃｉｎ电泳结果二ｐ０．０３０７ｃｏ０－．８１／）Ｉ＜〇＞！立■■■■■■■■０－：６押曲巧胡：ｗ■爱■■？■■■■？■■■■Ｉ■■■■■■■■■■？■曲含口■：：：：：：：：弘巧巧巧：：：排：：：巧记：踞：强：苗苗冉巧与抵资－０ｉｉ．２轟鬻語ｉ隱請鹽賴語－填坦；苗古聞吉；５巧？３；置：：：：誦．画｜堂字：：：：咕：：与巧：：早：小：？：：心：：１！货结呈度货贾置菌里里１焉００护ＮＰＳＰＮ＝Ｎ＝９９（）（）ＮＰ：对照组；ＳＰ：实验姐；Ｎ：病例数圏３（Ｂ）：正常妊娠孕妇、重度子痛前期孕妇胎盘组织中ｇａｓ６蛋白的表达水平＾心看出ｓ６从上图可，重度子滿前期患者胎盘组织中阱蛋白表达水平较正常妊娠孕妇表达水平增加，差异有统计学意义（／Ｋ０．０５）。２８ 山东大学硕古学位论文讨论子痴前期是妊娠期（孕２０周后）特有的累及孕妇多器官多系统的疾病，表现为突发高血压、蛋白尿、水肿，严重者可出现重度低蛋白血症、持续性头痛、视觉障碍、血小板减少等症状，分娩后症状可迅速减轻或消失。近年来妊娠期高Ｗ血压疾病，包括轻／重度子痴前期的发病率有稳步上升的趋势。子痴前期与母胎的发病率及死亡率密切相关，其严重并发症包括胎盘早剥、早产、低体重儿、一胎儿宫内生长受限等，子痴前期进步发展导致患者肝脏、血液系统、神经系统等功能障碍可出现肥ＬＬＰ综合征、子痴等，严重危害了母儿生命安全。另外，大、血管及代谢性疾病量证据表明，有子痴前期病史的孕妇及其新生儿，今后发生也Ｗ７’＾的风险增加。故其诊治是目前产科面临的重大课题。本研究中从实验对象的一般资料中可レッ看出，相对于正常妊娠孕妇，子痛前期患者平均孕周（３５．７３＋２．５６５周）及胎儿体重（２４８７．５＋９３６．０２４ｇ）较小，早产儿及低出生体重儿的发生率明显増加，新生儿的发病率及死亡率也随之增加；子痴前期患者血小板、白蛋白平均值较低，可能与患者合并有不同程度的血小板减少及血清蛋白质的丢失有关，更增加了子痴前期患者治疗的难度。同时，子痴前期患者舒张压、收缩压、游离脂肪酸及肌酢水平明显髙于正常妊娠孕妇，可能与子疵前期患者糖脂、水盐代谢异常及肝肾功能损伤有关。Ｗ目前子痴前期病因仍未明确，早期胎盘形成不良（血管生成相关因子失Ｍ衡）、母胎界面炎症介质的失衡等假说是目前研究的热点。首先，，正常植入期蚁膜细胞侵蚀子宫动脉肌层，促使其重塑，血管直径增大，Ｗ供应胎盎充足的血氧，妊娠囊处于低氧环境，；植入初期利于滋养细胞的增殖，但孕９周后持续的低氧状态及ＴＧＦ－目的下调失败将导致滋养细胞不能成功的从増殖型转化为侵袭Ｗ＂一一型，导致植入异常。植入异常可进歩导致胎盘缺血，胎盘因子的释放，系Ｍ列炎症及相关因子的改变，造成内皮细胞损伤。内皮损伤后导致正常血液成分漏出管壁，加之损伤部位活性氧及自由基增多，血小板及纤维蛋白原成分于内皮下聚集，单核巨嗤细胞吞喧后转化为泡沫细胞，最终形成动脉粥样硬化；且血管，可减少舒血管物质的分泌内皮细胞损伤，使得血管紧张性增加，甚至全身血管Ｉ了ＩＷ血管疫擎，长期血压升高，最终导致子痛前期的发生。其次，多数观点认为，＂Ｗ部分子痴前期的发病是由于母体对妊娠囊或胚胎的过度免疫性炎性反应。正常妊娠时母体表现为ＷＴｈ２细胞为主的免疫耐受，正常妊娠的维持不仅需要体内２９ 山东大学硕±学位论文Ｔｈｌ细胞、Ｔｈ２细胞的相对平衡，也需要辅助性Ｔ细胞１７（Ｔｈｌ７）的参与及调Ｕ＂节性Ｔ细胞（Ｔｒｅｇ）的对获得性及固有免疫功能的调节。与正常孕妇相比，重度子痴前期孕妇的血清及胎盘组织中存在多种炎症因子失衡。而越来越多的证据显示多种炎症因子参与重度子痴前期的发生发展。因此调拴细胞因子的表达成为一防治重度子痴前期的重要策略之。Ｇａｓ６于１９９３年首次被Ｍａｎｆｉｏｌｅｔｔｉ在缺少血清的培养基中培养小鼠ＮＩＨ３Ｔ３＂￡＂一细胞系时发现，是种具有维生素Ｋ依赖性的分泌蛋白，由生长停滞特异性基因编码。其氨基酸序列与抗凝血相关蛋白Ｓ约有４４％的同源性，但与蛋白Ｓ不同ＵＷ的是，无凝血酶识别位点，故无抗凝血活性。ＴＡＭ受体酪氨酸激酶（Ｔｙｒｏ３／Ａｘｌ／Ｍｅｒｒｅｃｅｐｔｏｒｔｙｒｏｓｉｎｅｋｉｎａｓｅ）是受体酪氨酸激酶家族（Ｒｅｃｉｔｅｒ＂ｔｒｏｓｉｎｅｋｉｎａｓｅｓＫｓ］〇３、Ａｘｌｅｒ，ｙ，ＲＴ）的亚家族，包括巧和ＭＨ个成员均为Ｗａｓ６受体Ａｘ－ｌ对ｇａｓ６亲和性最。Ｇａｓ６ＴＡＭ通路通过多种途径在不ｇ，其中，高、同的组织细胞中发挥不同的生物学效应，与血管的稳态炎症及免疫调节密切相！。－乂：关［。一本研究针对子痛前期的发病机制假说及ｇａｓ６的生理功能，进步对子楠前期患者及正常妊娠孕妇胎盘及蚁膜组织中ｇａｓ６蛋白的表达情况进行检测，试探讨ｇａｓ６与子痴前期疾病发生、发展的相关性。实验发现：ｇａｓ６在正常及子痴前期孕妇胎盘及脱膜组织中均有表达，且主要定位表达于胎盘合体滋养细胞的胞一ｆ浆ｉｏｌｅｔｔｉ、胞核内及蚁膜细胞的胞浆、胞核内。这发现符合Ｍａｎ及’ＭａｒｃａｎｄａｌｌｉＳ的报道：ｇａｓ６可表达于多种组织、细胞，如：小腸、肺、肾、ａｓ６在，其中，而肝脏则几乎不表达胎盘、内皮细胞等，ｇ胎盘等组织中高表达ｗ＇ｔｗ一该蛋白。但本研究在前报道的基础上，进步测定了ｇａｓ６在胎盘及蚁膜组织中具体定位，属于开创性研究。同时本研巧分别从ｍＲＮａ基因及蛋白水平测定了ｇａｓ６在胎盘中的表达变化，，６ｍＲ发现：相比于对照组实验组患者胎盘组织中ｇａｓ化及ｇａｓ６蛋白表这水平明昆增高ｓ６－ＴＡＭ通路可通过多种途径在不同的组织细胞中发挥不同的生。因Ｇａａｓ６－－物学效应，如ｇＡｘｌ通路通过减弱Ｖ防ＦＲ２的活性进而抑制血管内皮细胞相关的血管生成过程ｇａｓ６可增强血小板的脱颗粒，促进血小板聚集功能，从＂Ｉ＂Ｗ而介导血栓的形成；ｇａｓ６上调组织因子的表泣，启动外源性的凝血过程，一而进步的动物实验研究表明ｇａｓ６抗体可抑制体内血小板的聚集，保护小鼠免于致命性血管栓塞症Ｌｕｔｇｅｎｓ报道ｇａｓ６敲除小鼠血管中的粥样硬化斑块较３０ 山东大学硕±学位论文正常小鼠中粥样斑块更加稳定Ｔｊｗａ发现ｇａｓ６可加强白细胞、血管内皮细胞及血小板间的相互作用，促进机体内炎症的发生；在化Ｅ、抓等患有免疫性疾病Ｉ【＂ｓ６的患者血清中ｇａ的浓度明显增加。重度子痛前期患者胎盘中ｇａｓ６的高表达可；ｓ６１＾＜通过Ｇａ的这些生理学功能得到解释，然而ａｓ６在重度，ｇ子痛前期发生发一展的具体机制需要进步研究探索。我们推测这与ａｓ６的抗血管生成、促血小ｇ板聚集一、促血栓形成及促进炎症发生的生理作用相关，但其具体机制需要进步实验研究。本研巧在检测ｇａｓ６ｍＲＮａ的表达水平的基础上，探讨其表达水平与不同临床指标的相关性，发现：在妊娠孕妇中，ｇａｓ６基因水平的表达量与患者的体重指数、血压、游离脂肪酸、肌巧、白蛋白等相关，其中，与体重指数、收缩压、舒张压一’、游离脂肪酸及肌巧水平正相关。ｓａｏ，与白蛋白水平负相关这结果与ＨｉＳ的对血清中ｇａｓ６的研究结果相符，提示我们ｇａｓ６可能与体内糖脂的代谢有一一，但是否通过此机制对子痛前期的发生发展产生影响定相关性，还需进步研究。本研究首次检测了阱ｓ６蛋白在妊娠孕妇胎盘及晚膜组织中的定位表达，发现ａｓ６在正常ｇ及子痛前期孕妇胎盘及蚁Ｊ莫组织中均有表达，且主要定位表达于胎盘姐织中合体滋养细胞的胞浆及胞核内及蚁膜组织中脱膜细胞的胞浆及胞核内。同时本研究定量测定显示ｇａｓ６ｍＲＮａ及ｇａｓ６蛋白在重度子痴前期孕妇胎盘沮织中的一表达水平较正常妊娠孕妇增高，并进步测定了目ａｓ６ｍＲＮａ的表达水平与各常用临床指标之间的相关性。最终结果提示；ｇａｓ６可能参与子痴前期的发生发展过程，通过分析其他疾病中阱ｓ６发挥作用的分子通路，为子痛前期疾病发生发展机制的一研究提供了新的切入点，但对其具体机制还需进步研究。３１ 山东大学硕±学位论文结论１．ｇａｓ６在正常及子痴前期孕妇胎盘及晚膜组织中均有表达，且重度子痛前期患者胎盘组织中ｇａｓ６蛋白的染色程度更深，提示ｇａｓ６可由胎盘及脱膜细胞分泌，并参与正常妊娠及子滴前期的发生、发展过程。２．重度子痴前期患者胎盘姐织中ｇａｓ６蛋白及ｇａｓ６ｍＲ化的表达量较正常妊娠一孕妇显著增加，提示ｇａｓ６可能通过定的机制参与了子痛前期的发生、发展过程。３．胎盘中ｇａｓ６ｍＲＮａ的表达水平与其体重指数、血压、游离脂肪酸正相关，而与白蛋白等呈负相关，提示ｇａｓ６可能通过调节代谢参与子贿前期的发生与发展过程。３２ 山东大学硕古学位论文参考文献－１ＡｎａｎｔｈＣＶＩＣｅｅｓＫＭＷａ打ｅｒＲＪ．Ｐｒｅｅｃｌａｍｐｓｉａｒａｔｅｓｉｎｔｈｅ１：ｅｄ［，ｙ，ｐＵｎｉ］－－－Ｓｔａｔｅｓ１９８０２０１０：ａｅｅｒｉｏｄｃｏｈｏｒｔａｎａｌｓｉｓＪ．ＢＭＪ２０１３３４７：ｆ６５６４．，ｇｐｙ［］，，［２］Ｋｕｋｌｉ打ａＥＶ，ＡｙａｌａＣ，ＣａｌｌａｇｈａｎＷＭ．Ｈｙｐｅｒｔｅ打ｓｉｖｅｄｉｓｏｒｄｅｒｓａｎｄｓｅｖｅｒｅ＊－ｏｂ巧ｅｔｒｉｃｍｏｉｂｔｎｅｎｔｅｄｔａｔｅｓｓｔｅｔｎｅｃｏ１：１．ｉｄｉｙｉ化ＵｉＳ？ＯｂＧｙｌ２００９１３６１２９９３０６口］，，（）３Ｓａｃｈａｎ民ＰａｔｅｌＭＬＳａｃｈａｎＰ，ｅｔａｌ．Ｏ山ｃｏｍｅｓｉｎｈｅｒｔｅｎｓｉｖｅｄｉｓｏｒｄｅｒｓｏｆ［］，，ｙｐ－ｒｅｎａｎｃｉｎ化ｅＮｏｒｔｈＩｎｄｉａｎｏｕｌａｔｉｏｎ．ＩｎｔＪＷｏｍｅｎｓＨｅａｈｈ２０１３５１１．ｐ［Ｊ］：０１０８ｐｇｙｐ，，４．．乔宠，子病前期的流行病学研究进展［Ｊ［］，杨小梅林其德］中国计划生－育和巧产科２０１３０６：５８．，（）５Ａｂａｔ－ｌｏｓＥＣｕｅｓａＣＣａｒｒｏｌｉＧｅｔａｌ．Ｐｒｅｅｃｌａｍｓｉａ，ｅｃｌａｍｓｉａａｎｄａｄｖｅｒｓｅ［］，，，ｐｐｍａｔｅｒｎａｌａｎｄｐｅｒｉｎａｔａｌｏｕｔｃｏｍｅｓ；ａｓｅｃｏｎｄａｒｙａｎａｌｙｓｉｓｏｆｔｈｅＷｏｒｌｄＨｅａｌｔｈＯｒａｎｉｚａｔｉｏｎＭｕｌｔｉｃｏｕｎｔｒＳｕｒｖｅｏｎＭａｔｅｒｎａｌａｎｄＮｅｗｂｏｒｎＨｅａｌｔｈＪ．ＢＪＯＧ２０１４ｇｙｙ［］，，Ｓｕ－１２１ｐｐｌ１：１４２４．ＡＶ－６ｌｓｎｅｓＩＪａｎｓｚｋｙＩ，ＦｏｒｍａｎＭ民ｅｔａｌ．Ａｏｕｌａｔｉｏｎｂａｓｅｄｓｔｕｄｏｆ［］，，ｐｐｙａｓｓｏｃｉａｔｉｏ打ｓｂｅｔｗｅｅ打ｐｒｅｅｃｌａｍｐｓｉａａｎｄｌａｔｅｒｃａｒｄｉｏｖａｓｃｕｌａｒｒｉｓｋｆａｃｔｏｒｓＪ．ＡｍＪ［］－ＯｂｓｔｅｔＧｎｅｃｏｌ２０１４２１１６５１．：６６５７ｙ，，（）ｅＪＰ－［７ＢｌｌａｍｙＬ，Ｃａｓａｓ，ＨｉｎｇｏｒａｎｉＡＤ，ｅｔａｌ．Ｐｒｅｅｃｌａｍｓｉａａｎｄｒｉｓｋｏｆ］ｐｓｅａｎｃｅｓ－ｃａｒｄｉｏｖａｓｃｕｌａｒｄｉｓｅａｄｃａｎｒｉｎｌａｔｅｒｌｉｆｅ：ｓｙｔｅｍａｔｉｃｒｅｖｉｅｗａｎｄｍｅｔａａｎａｌｙｓｉｓｐ］ＢＭＪ２００７３３５７６２７：９７４－，，（）８ＥｎｇｌｉｓｈＦＡＫｅｎｎｙＬＣＭｃＣａｒｔｈ．Ｒｉｓｋｆａｃｔｏｒｓａｎｄｅｆｆｅｃｔｉｖｅ［］，，ｙＦＰｔｔ－１２ｅｍｅｎｏｆｒｅｅｃｌａｍｓｉａＪ．ｍａｎａ．ＩｎｅｒＢｌｏｏｄＰｒｅｓｓＣｏｎｔｒｏｌ２０１５８：７ｇ，，ｐｐ［］ｇ－９（．北京乂民卫生出版社９２９３巧杰妇产科学第走版）间．［］，１０ＬａｍｂｅｒｔＧＢｒｉｃｈａｎｔＪＦＨａｒｔｓｔｅｉｎＧｅｔａｌ．Ｐｒｅｅｃｌａｍｓｉａ：ａｎｕｄａｔｅ？！．［］，，，ｐｐ［］Ａｃ－ｔａＡｎａｅｓｔｈｅｓｉｏｌＢｅｌ２０１４６５４：１３７１４９．ｇ，，（）［１１］民ａｎａＳ，ＫａｒｕｍａｎｃｈｉＳＡ，ＬｉｎｄｈｅｉｍｅｒＭＤ．Ａｎｇｉｏｇｅｎｉｃｆａｃｔｏｒｓｉｎｄｉａｇｎｏｓｉｓ，－ｍａ打ａｅｍｅｎｔａｎｄ化５６３的１１ｉｎｒｅｅｃｌａｍｓｉａＪｅｒｔｅｎｓｉｏ打２０１４６３２：１９８２０２．ｇ．Ｈ，ｐｐ［］ｙｐ，，（）＊－Ａ－１２ＭａｒｔｉｎｅｚＶａｒｅａＰｅｌｌｉｃｅｒＢＰｅｉａｌｅｓＭａｒｉ打Ａｅｔａｌ．民ｅｌａｔｉｏ打ｓｈｉｂｅｔｗｅｅｎ［］，，，ｐｍａｔｅｒｎａｌｉｍｍｕｎｏｌｏｇｉｃａｌｒｅｓｐｏｎｓｅｄｕｒｉｎｇｐｒｅｇｎａｎｃｙａｎｄｏｎｓｅｔｏｆｐｒｅｅｃｌａｍｐｓｉａＪ．Ｊ［］ｅ２０１４１２１ＩｍｍｕｎｏｌＲｓ，，２０４：０２４１． 山东大学硕±学位论文１３Ｃｕｎｎｉ打ｇｈａｍＧ，Ｌｅｖｅ打〇Ｋ，ＢｌｏｏｍＳ，巧ａｌ．Ｗｉｌｌｉａｍｓｏｂｓｔｅｔｒｉｃｓ［Ｍ．２４ｒｄ［］］－－ｅｄ．ＮｅｗＹｏｒｋ：ＭｃＧｒａｗＨｉｌｌＰｒｏｆｅｓｓｉｏｎａｌＰｕｂｌｉｓｈｉｎ２０１４：２８９２９０．ｇ，４ｏｈｎｓｅｎｅｃｈｅｎｄ巧ａｌｒｅｅｃａｍｓａａｎｄｕｌ：ｅｒｏａｃｅｎ１：ａ１Ｓｌ；ａｆｆＡＣＪＧＭＤ民．Ｐｌｉｌ［］，，ｐｐｌ，ａｃｕｔｅａｔｈｅｒｏｓｉｓ：ｉｍｍｕｎｅａｎｄｉ打ｆｌａｍｍａｔｏｒｙｆａｃｔｏｒｓ［Ｊ］．Ｊ民ｅｐｒｏｄＩｍｍｕｎｏｌ，２０１４，－－１０１１０２：１２０１２６．［１５］ＭａｔｓｕｂａｒａＫ，ＨｉｇａｋｉＴ，ＭａｔｓｕｂａｒａＹ，巧ａｌ．ＮｉｔｒｉｃＯｘｉｄｅａｎｄＲｅａｃｔｉｖｅＯｘｙｇｅｎＳｐｅｃｉｅｓｉｎｔｈｅＰａｔｉｉｏｇｅｎｅｓｉｓｏｆＰｒｅｅｃｌａｍｐｓｉａＪ．ＩｎｔＪＭｏｌＳｃｉ２０１５］，，［－１６３：４６００４６１４．（）－ｔ１６ＳｃｉｏｓｃｉａＭＫａｒｕｍａｎｃｈｉＳＡｏｌｄｍａｎＷｏｈｌＤ，ｅｔａｌ．Ｅｎｄｏｈｅｌｉａｌ［］，，Ｇｄｙｓｆｕｎｃｔｉｏｎａｎｄｍｅｔａｂｏｌｉｃｓｙ打ｄｒｏｍｅｉ打ｐｒｅｅｃｌａｍｐｓｉａ；ａｎａｈｅｒｎａｔｉｖｅｖｉｅｗｐｏｉｎｔ［Ｊ］．ＪＲｅｒｏｄＩｍｍｕｎｏｌ２０１５．ｐ，１７ＳｔａｆｆＡＣＤｅｃｈｅｎｄＲＲｅｄｍａｎＣＷ．Ｒｅｖｉｅｗ：Ｐｒｅｅｃｌａｍｓｉａａｃｕｔｅａｔｈｅｒｏｓｉｓ［］，ｐ，，ｏｆｔｈｅｓｐｉｒａｌａｒｔｅｒｉｅｓａｎｄｆｔｉｔｕｒｅｃａｒｄｉｏｖａｓｃｕｌａｒｄｉｓｅａｓｅ：ｔｗｏｎｅｗｈｙｐｏｔｈｅｓｅｓＪ．［］－Ｐｌａｃｅｎｔａ２０１３３４Ｓｕｌ：Ｓ７３Ｓ７８．，，ｐｐ１８ＳｈａｒｋｅＡＭＭａｃｋｌｏ打ＮＳ．Ｔｈｅｓｃｉｅｎｃｅｏｆｉｍｌａｎｔａｔｉｏ打ｅｍｅｒｅｓｂｌｉｎｋｉｎ［］ｙ，ｐｇｇｎｏｅ－ｉｔｔｈｌｉｇｈｔＪ？民ｅｐｒｏｄＢｉｏｍｅｄＯｎｌｉｎｅ，２０１３，２７５：４＾４６０．［］（）１９ＭａｔｔｈｉｅｓｅｎＬ目ｅｒＧＥｍｅｍｄｈＪ，ｅｔａｌ．Ｉｍｍｕ打ｏｌｏｏｆｒｅｅｃｌａｍｓｉａ．［］，ｇ，ｇｙｐｐ口］ｅｍｍｍｕｎｏ２００５－１ＣｈＩｌ乂ｌｌｅｒ８９．：４９６ｇｙ，，［２０］Ｒａｇｈｕｐａｔｈｙ民．Ｇｙｔｏｋｉ打ｅｓａｓｋｅｙｐｌａｙｅｒｓｉ打ｔｈｅｐａｔｈｏｐｈｙｓｉｏｌｏｇｙｏｆ－ｐｒｅｅｃｌａｍｐｓｉａＪ．ＭｅｄＰｒｉｎｃＰｒａｃｔ２０１３２２Ｓｕｐｌ１：８１９．［］，，ｐＮａｋａｓｈ－２１ＳａｉｔｏＳｉｍａＡ，ＳｈｉｍａＴｅｔａｌ．Ｔｈｌ／Ｔｈ２／Ｔｈｌ７ａｎｄｒｅｕｌａｔｏｒＴｃｅｌｌ［］，，ｇｙａｒａｄｎａｎＪＩ２０１－６１０ｉｍｉ打ｒｅｃ．ＡｍＪＲｅｒｏｄｍｍｕｎｏｌ１０６３６：６０．ｐｇｐｇｙ［］ｐ，，（）２２ＰｅＺ＇ＳｅｕＭ［］ｒｅｌｖｅｄａＡＴｏｒｒｅｓＭＪ，Ｋｈｏｕｒｅｔａｌ．Ｉｎｎａｔｅｉｍｍｕｎｅｓｓｔｅｍｐ，ｙ，ｙａｎｄｒｅｅｃｌａｍｓｉａＪ．ＦｒｏｎｔＩｍｍｕｎｏｌ２０１４５：２４４．ｐｐ［］，，［２３］ＳａｉｔｏＳ，ＳａｋａｉＭ．Ｔｈｌ／Ｔｈ２ｂａｌａｎｃｅｉ打ｐｒｅｅｄａｍｐｓｉａ［Ｊ］．Ｊ民ｅｐｒｏｄＩｍｍｕｎｏｌ，－２００３５９２１１．：１６７３，（）［２４］ＭｉｓｈｒａＮ，ＮｕｇｅｎｔＷＨ，ＭａｈａｖａｄｉＳ．ｅｔａｌ．Ｍｅｃｈａｎｉｓｍｓｏｆｅｎｈａｎｃｅｄｖａｓｃｕｒｔ－ｌａｒｒｅａｃｔｉｖｉｔｙｉｎｒｅｅｃｌａｍｓｉａＪ．Ｈｅｅ打ｓｉｏｎ２０１１－５８５：８６７８７３．ｐｐ［］ｙｐ，（）２５Ｓａｉｌ：ｏＳＳｈｉｏｚａｋｉＡＮａｋａｓｈｉｍａＡｅｔａｌ．Ｔｈｅｒｏｅｏｆｔｅｉｍｍｕｎｅｓｓｔｅｍｎｌｈｉ［］，，ｙ，ｒｅｅｃＭｅｄ－ｐｌａｍｐｓｉａ［Ｊ］．ＭｏｌＡｓｐｅｃｔｓ２００７，２８２：１９２２０９．，（） 山东大学硕：ｔ：学位论文２６Ｌａｒｅｓｏ－ｉｔｉＳｅｒｖｉｔｅＥ．Ａｌｅａｄｉｎｒｏｌｅｆｏｒｔｈｅｉｍｍｕｎｅｓｅｍｉｎｔｈｅ［］ｇｊｇｙ別ａｓｏｏｏｒｅｅｃａｍｓａＬｅｕｋｏｃｏ２０１－ｉｌｆｌｉＪ：化ｏｐｈｙｇｙｐ．ＪＢｉｌ３９４２４７２５７．ｐ，，ｐ［］口）［２７］ＪａｉｎＡ，ＳｃｈｎｅｉｄｅｒＨ，ＡｌｉｙｅｖＥ，ｅｔａｌ．Ｈｙｐｏｘｉｃｔｒｅａｔｍｅｎｔｏｆｈｕｍａｎｄｕａｌ－ｐｌａｃｅｎｔａｌｐｅｒｆｕｓｉｏ打ｉｎｄｕｃｅｓａｒｅｅｃｌａｍｓｉａｌｉｋｅｉｎｆｌａｍｍａｔｏｒｒｅｓｏ打ｓｅ．ＬａｂＩｎｖｅ巧ｐｐｙｐ［Ｊ〕，２０－１４９４８：８７３８８０．，（）［２８］ＭａｎｆｉｏｌｅｔｉＧ，ＢｒａｎｃｏｌｉｎｉＣ，ＡｖａｎｚｉＧ，ｅｔａｌ．Ｔｈｅｐｒｏ１：ｅｉｎｅｎｃｏｄｅｄｂｙａｅｓ－ｆ－ｒｏｗｔｈａｒｒｔｓｅｃｉｉｃｇｅ打ｅａｓ６ｉｓａ打ｅｗｍｅｍｂｅｒｏｆｔｈｅｖｉｔａｍｉｎＫｄｅｅｎｄｅｎｔｇｐ（ｇ）ｐｒｏ化ｉｎｓｒｅｌａｔｅｄｔｏｒｏｔｅｉ打Ｓａ打ｅａｔｉｖｅｃｏｒｅｕｌａｔｏｒｉｎｔｈｅｂｌｏｏｄｃｏａｕａｔｉｏｎｐｐ，ｇｇｇｌ－ｃａｓｃａｄｅＪＭｏＢｉｏｌ４９７６．．ｌＣｅｌｌ１９％１３８：４９８５［］，，（）［２９］ＮａｇａｔａＫ，ＯｈａｓｈｉＫ，Ｎａｋａ打ｏＴ，ｅｔａｌ．Ｉｄｅｎｔｉｆｉｃａｔｉｏｎｏｆ化ｅｐｒｏｄｕｃｔｏｆｇｒｏｗｔｈｒｅｓｔ－ｓｅｃｃｓａｃｏｍｍｒＡｘｅｒｅ化ａｒｉｆｉｅｎｅ６ａｏ打ｌｉｇａｎｄｆｏｌＳｋｙ，ａｎｄＭｒｅｃｒｒｏｓｉ打ｅｐ呂，ｐ巧Ｊ２７－ｋｉｎａｓｅｓ．Ｊ技ｉｏｌＣｈｅｍ１９９６１４７：３００２２３００２７．［］，，（）［３０］ＧｏｕｌｄＷ氏ＢａｘｉＳＭ，Ｓｃｈｒｏｅｄｅｒ艮，巧ａｌ．Ｇａｓ６ｒｅｃｑ３ｔ；ｏｒｓＡｘｌ，ＳｋｙａｎｄＭｅｒｅｎｈａｎｃｅｌａｔｅｌｅｔａｃｔｉｖａｔｉｏｎａｎｄｒｅｕｌａｔｅｔｈｒｏｍｂｏｔｉｃｒｅｓｏｎｓｅｓＪ．ＪＴｈｒｏｍｂＨａｅｍｏｓｔｐｇｐ［］，２００５３４－７４＾３３１．，（）３１ＧａｌｌｉｃｃｈｉｏＭＭｉｔｏｌａＳＶａｌｄｅｍｂｒｉＤｄ：ａｌ．Ｉ打ｈ化ｉｔｉｏｎｏｆｖａｓｃｕｌａｒ［］，，，－Ａｘｅ打ｄｏｔｈｅｌｉａｌｇｒｏｗｔｈｆａｃｔｏｒｒｅｃｅｊｒｔｏｒ２ｍｅｄｉａｔｅｄｅｎｄｏｔｈｅｌｉａｌｃｅｌｌａｃｔｉｖ如ｉｏｎｂｙｌｔｒｏｓｔＢ２００５１７０－ｙｉｎｅｋｉｎａｓｅｒｅｃｅｐｏｒＪ．ｌｏｏｄ０５５：１９１９７６．［］，，（）＊３２ＭｅｌａｒａｎｏＭＧＷｕｔｈｒｉｃｈＤＡＰｏｐａＶｅｔａｌ．ＩｎｃｒｅａｓｅｄｅｘｉｅｓｓｉｏｎｏｆＡｘｌ［］ｇ，，ｐ，ｐｔｒｏｓｉｎｅｋｉｎａｓｅａｆｔｅｒｖａｓｃｕａｒｎｕａｎｄｒｅｕｌａｔｏ打ｂｒｏｔｅｎ－ｃｏｕｅｄｒｅｃｅｔｏｒｙｌｉｊｒｙｇｉｙＧｐｉｐｌｐｏｎｓｔｓａ－ａｉｉｎｒｔｓＪ．ＣｉｒｃＲｅｓ１９９８８３７：６９７７０４．ｇ［］，，（）＊ｎ［３３］Ｓｔｉ打ＴＮＣｏｎｎＧＧｏｉｅＭｅｔａｌ．Ｔｈｅａｔｉｃｏａｕｌａｔｉｏ打ｆａｃ化ｒｒｏｔｅｉｎＳａｎｄｉｔｓ，，，ｇｐｒｅｌａｔｉｖｅＧａｓ６ａｒｅｌｉａｎｄｓｆｏｒｔｈｅＴｒｏ３／ＡｘｌｆａｒｒｄｌｙｏｆｒｅｃｅｔｏｒｔｒｏｓｉｎｅｋｉｎａｓｅｓＪ．，，ｇｙｐｙ［］－Ｃｅｌｌ１９９８０４．：６６１６７０，５，）（Ａ－３４ＬａｕｒａｎｃｅＳｈｏｕｒｉａｎＪｉｖａＬＺｅｔａ．ｎｄｕｔｓｓｕｅｔＭＮｌＧａｓ６ｉｃｅｄｉｆａｃｏｒ［］，ｇ，，ｅｘｒｅｓｓ－－ｐｉｏｎｉｎｅｎｄｏｔｈｅｌｉａｌｃｅｌｌｓｉｓｍｅｄｉａ１；ｅｄｔｈｒｏｕｇｈｃａｖｅｏｌｉｎ１ｅｎｒｉｃｈｅｄｍ－ｉｃｒｏｄｏｍａｉｎｓＪＪａｅｍｏｔ２０４２３９５４０８．ＴｈｒｏｍｂＨｓ１１３：．［］，，（）［３５］民ｏｂｉｎｓ民Ｓ，ＬｅｍａｒｉｅＣＡ，ＬａｕｒａｎｃｅＳ，ｅｔａｌ．ＶａｓｃｕｌａｒＧａｓ６ｃｏｎｔｒｉｂｉｎｅｓｔｏｔｈｒｏｍｂｏｇｅ打ｅｓｓａｎｄｒｏｍｏ巧ｓｔｉｓｓｕｅｆａ口ｏｒｕ－ｒｅｕａｔｏ打ａｆｔｅｒｖｅｓｓｅｎｕｒｎｍｃｅｉｐｐｇｌｉｌｉｙｉｉｊ９２－Ｊ．．Ｂｌｏｏｄ２０１３１２１４：６６９９［］，，（） 山东大学硕±学位论文－－ａｒｃｏｗ３６Ｆｅｍａ打过ｅｚＦｅｍａｎｄｅ之Ｌ，良ｅｌｌｉｄｏＭａｒｔｉｎＬＧｉａＤＦＰ．Ｇｒｔｈ［］，ａｒｒｅｓ－ｔｓｅｃｉｆｉｃｅｎｅ６ＧＡＳ６．Ａｎｏｕｔｌｉ打ｅｏｆｉｔｓｒｏｌｅｉｎｈａｅｍｏｓｔａｓｉｓａｎｄｉｎｆｌａｍｍａｔｉｏｎｐ呂（）Ｊｍｂｅｍｏｓｔ－１．ＴｈｒｏＨａ２００８１００４：６０４６０．［］，，（）３７ＨｓｉａｏＦＣＬｉｎＹＦＨｓｉｅｈＰＳｅｔａｌ．ＥｆｆｅｃｔｏｆＧＡＳ６ａｎｄＡＸＬＧｅｎｅ［］，，，ＰｏｌｍｏｒｐｈｉｓｍｓｏｎＡｄｏｓｔＳｓｔｅｍｉｃｆｌａｍｍａｔｏｎａｎｄｎｓｕｎＲｅｓｉ巧ａｎｃｅｉｎｙｉｐｉｙ，ｙＩｎｉＩｌｉ，ＡｄｏｌｅｓｃｅｎｔｓＪ．ＩｎｔＪＥｎｄｏｃｒｉｎｏｌ，２０１４，２０１４：６７４０６９．［］［３８］ＫｕｏＦＣ，ＨｕｎｇＹＪ，ＳｈｉｅｈＹＳ，ｅｔａｌ．Ｔｈｅｌｅｖｅｌｓｏｆｐｌａｓｍａｇｒｏｗｔｈｔ－ａｒｒｅｓｓｅｃｉｆｉｃｐｒｏｔｅｉｎ６ｉｓａｓｓｏｃｉａｔｅｄｗｉｔｈｉ打ｓｕｌｉ打ｓｅｎｓｉｔｉｖｉｔｙａｎｄｉ打日ａｍｍａｔｉｏ打ｉｎｐａｂｅｔｅ－ｗｏｍｅｎｉｃｔ１４２４？Ｄｉｓ民ｅｓＣｌｎＰｒａ２０１０３：３０３０９．口］，，（）３９ＮａｍＪＹＪｅｏｎＪＹｅ－ｔＫｉｍＨＡｔａｌ．Ｓｅｒｕｍｒｏｗｔｈａｒｒｅ巧ｓｅｃｉｆｉｃｒｏｅｉｎ６［］，，，ｇｐｐｌｅｖｅｌｓａｒｅａＫｌｉａｂｌｅｂｉｏｍａｒｋｅｒｏｆｄｉｓｅａｓｅａｃｔｉｖｈｙｉｎｓｙｓｌ；ｅｍｉｃｌｕｐｕｓｅｒｔｈｅｍａｔｏｓｕｓＪ．ｙ［］ＪＣ１１４－１５ｌｉｎＩｍｍｉｍｏｌ２０３３３ｌ：３０．，，（）［４０］ＭａｎｆｉｏｌｅｔｔｉＧ，ＢｒａｎｃｏｌｉｎｉＣ，ＡｖａｎｚｉＧ，ｅｔａｌ．Ｔｈｅｐｒｏ１：ｅｉｎｅ打ｃｏｄｅｄｂｙａｒｏｗｔｈａｒｒｅｓｔ－ｓｅｃｏｔｔ－ｇｐｉ巧ｃｇｅｎｅａｓ６ｉｓａｎｅｗｍｅｍｂｅｒｆｈｅｖｉａｍｉ打Ｋｄｅｅ打ｄｅｎｔ（ｇ）ｐｒｏｔｅｉｎｓｒｅｌａｔｅｄｔｏｒｏｔｅｉｎＳａｎｅａｔｉｖｅｃｏｒｅｕｌａｔｏｒｉｎｔｈｅｂｌｏｏｄｃｏａｕｌａｔｉｏｎｃａｓｃａｄｅｐｐ，ｇｇｇ－Ｊ．ＭｏｌＣｅｌｌＢｉｏｌ１９９３１３８４９８：４９７６５．［］，，（）４Ａｎ－１ｅｌｉＵｏＳｃｈｅｒｒｅｒＡｄｅＦｒｕｔｏｓＰａｒｉｃｉｏＣｅｔａｌ．Ｄｅｆｉｃｉｅｎｃｏｒ［］ｇ，，Ａｐ，ｙｉｎｈ化ｉｔｉｏｎｏｆＧａｓ６ｃａｕｓｅｓｌａｔｅｌｅｔｄｓｆｕ打ｃｔｉｏｎａｎｄｒｏｂｃｔｓｍｉｃｅａａｉｎｓｔｔｈｒｏｍｂｏｓｉｓｐｙｐｇＪ－１２２２．ＮａｔＭｅｄ２００７：２１５１．［］，，（）［４２］Ｌｕｔｇｅ打ｓＥ，ＴｊｗａＭ，ＧａｒｃｉａＤＦＰ，ｅｔａｌ．ＧｅｎｅｔｉｃｌｏｓｓｏｆＧａｓ６ｉｎｄｕｃｅｓｐｌａｑｕｅｓ－ｔａｂｉｌｉｔｉｎｅｘｅｒｉｍｅｎｔａｌａ化ｅｒｏｓｃｌｅｒｏｓｉｓＪ．ＪＰａ化ｏｌ２００８２１６ｌ：５５６３．ｙｐ［］，，（）４－－－ｌｃｉａｔｏＦＳａｉｎａｈｉＰＰＳｏａＤｅｔａｌ．Ｔａｌｐｈａ６ａｎｄＩＬ１ｅｘｒｅｓｓｉｏｎ［引Ａ，，ｌ，ＮＦ比，ｇ，ｐｎｈｉｂｋｅｄｂｔｅｓｃｒｏｏｃＢｏｉｓｉｙＧＡＳ６ｉｎｍｏｎｏｃｙ／ｍａｐｈａ呂ｅｓ［Ｊ］．ＪＬｅｕｋｉｌ２０１０，，８５－７：８６９８７５．（）４４Ｂｏｅｅｒ－－ｒｌＤＣｌａｕｓＳＢｏｍｓｔａｉｎＣｅｔａｌ．Ｅｌｅｖａｔｅｄｒｏｗｔｈａｒｒ巧ｔｓｅｃｉｆｉｃ［］ｇ，，，ｇｐｒｏ１；ｅｉ打６ｌａｓｍａｌｅｖｅｌｓｉｎａｔｉｅ打ｔｓｗｉｔｈｓｅｖｅｒｅｓｅｓｓＣｒｉｔＣａｒｅＭｅｄ２００６ｐｐｐｐｉ［Ｊ］．，，－３４ｌ：２］９２２２－（）［４引ＨｓｉａｏＦＣ，ＬｉｎＹＦ，ＨｓｉｅｈＰＳ，ｅｔａｌ．ＥｆｆｅｃｔｏｆＧＡＳ６ａｎｄＡＸＬＧｅｎｅＰｏｌｙｍｏｒｐｈｉｓｍｓｏｎＡｄｉｐｏｓｉｔｙ，ＳｙｓｔｅｍｉｃＩｎｆｌａｍｍａｔｉｏｎ，ａｎｄＩｎｓｕｌｉｎ民ｅｓｉｓｔａｎｃｅｉｎＡｄｏｌｅｓｃｅｎｔｓ＾］．ＩｎｔＪＥｎｄｏｃｒｉｎｏｌ，２０１４，２０１４：６７斗０６９． 山东大学硕±学位论文综述Ｇａｓ６硏究进展一生长停滞特异性蛋白６（ｒｏｗｔｈａｒｒｅｓｔｓｐｅｃｉｆｉｃｒｏｔｅｉｎ６Ｇａｓ６）ｇｐ，是ｗ种由１３号染色体ｑ３４的生长停滞特异性基因编码的维生素Ｋ依赖性分泌蛋白。Ｗ１９９３年由Ｍａｎｆｉｏｌｅｔｔｉ等在应用饥饿血清培养小鼠ＮＩＨ３Ｔ３细胞系及人ＩＭＲ９０一成纤维细胞系时首次发现。Ｇａｓ６，后逐渐被人们进步认识可参与多种生理活动的调节，在血栓形成、血管稳态、炎症、免疫、肿瘤等的发生发展中有重要的作用。现将其相关研巧进展综述如下：１．Ｇａｓ６结构及表达情况Ｇａｓ６蛋白由４个不同的结构域组成，包括６７８个氨基酸，其氨基酸序列从－幾基谷氨酸残基组成的Ｇ氨基端到幾基端依次为①由ｒｌａ区（此区域通常出现在维生素Ｋ依赖性蛋白家族内，与蛋白Ｓ相似，通过与巧依赖性磯脂结合，无凝血酶识别位点介导其与细胞膜的相互作用）区（与蛋白Ｓ不同，故；②环无抗凝血活性）；⑨４个重复的表皮生长因子样区域；④２个层粘连蛋白组成的Ｇ区（其结构与人性激素结合蛋白类似，提示其与胆固醇激素结合的可能性）。Ｇａｓ６的氨基酸结构与抗凝血相关蛋白Ｓ约有４４％的同源性，其中１、３区域同源性最强。Ｇａｓ６可表达于人体的多种组织、、细胞，如；屯肺、小肠、肾、胎盘、内皮Ｍ细胞等，其中，胎盘等组织高表达Ｇａｓ６，而肝脏则几乎不表达该蛋白。２．Ｇａｓ６受体结构及表达情况ＴＡＭ受体酪氨酸激酶（Ｔｙｒｏ３／Ａｘｌ／Ｍｅｒｒｅｃｅｐｔｏｒｌ：ｙｒｏｓｉｎｅｋｉｎａｓｅ）是受体酪氨酸激酶家族的亚家族，主要包括Ａｘｌ（即Ａｒｋ，Ｕｆｏ，Ｔｙｒｏ７）、Ｓｋｙ（即Ｒｓｅ，Ｂｒｔ，Ｔｉｆ，Ｄｔｋ，Ｔｙｒｏ３）、Ｍｅｒ（即Ｅｙｋ，Ｎｙｋ，Ｔｙｒｏｌ２））Ｈ个成员，均为Ｇａｓ６受体。ＴＡＭ２个免疫球蛋白样的氨基末端２１亚家族的结构包括，次纤连蛋白重复，个跨膜区，具有激酶活性域及细胞内信号转导区域，其中细胞内区域即酪氨酸激酶区域，能够催化底物蛋白当中的酪氨酸残基发生磯酸化ＴＡＭ亚家一。族是类将细胞外信号一Ｇａｓ６传递到胞内的蛋白，般与狀类生长因子结合，调节细胞的生长与分化此类蛋白。作为一＞Ｍｅｒ。的受体之，Ａｘｌ对Ｇａｓ６具有更高的亲和性，王者亲和力关系比较为Ａｘｌ＞Ｓｋｙ３７ 山东大学硕±学位论文ＷＨ者主要表达部位不同，与Ｇａｓ６结合后产生的生理作用各有不同的侧重。Ｓｋｙ主要表达于脑部，提示其可能与中枢神经系统的发育与功能相关，此外，Ｓｋｙ还Ｋｉ在肾脏、破骨细胞、肺动脉内皮细胞、睾丸、卵巢等组织细胞中表达。Ｍｅｒ在外周血单核细胞及骨髓中表达。Ａｌｘ首次于１９９１年在白血病细胞系中被发现，位于１９ｌ３．２，Ｉｘｌ可在多种器官和细胞中广泛表这ｑ属于型跨膜蛋白。Ａ，包括上皮细胞、间质细胞、造血起源细胞、未分化细胞等，但不表达于淋己细胞及粒细胞ｔｉ［］〇３．Ｇａｓ６的生理功能Ｇａｓ６、、、参与多种生理活动的调节，如血管的稳态炎症细胞的侵袭转移、调亡等。因此在血管性疾病、免疫性疾病及肿瘤等的发生、发展中具有重要作用，在多种癌症、克隆恩病、胶质瘤、乳腺、甲状腺、肺及肾细胞癌中均有过度表达。３．１Ｇａｓ６参与炎症反应：一目前对于Ｇａｓ６与炎症反应的关系尚存在定的争议性，部分研究表明，Ｇａｓ６最终具有促进炎症发生的作用，也有研究表明ｓ，Ｇａ６可能通过某些机制抑制炎症。Ｔｊｗａ等通过研究基因敲除小鼠模型及体外细胞培养，指出Ｇａｓ６可増强血Ｗ管内皮细胞、白细胞及血小板间的相互作用，促进炎症的发生。Ｇ化ｏｔ等研究发现重度败血症患者全身炎症状态时，血浆Ｇａｓ６水平较正常人群增高，推测ＷＧａｓ６可能参与机体的炎症反应和损伤修复过程。相反，部分学者利用动物实验研巧发现Ａｘｌ，，针对敲除的小鼠，诱导其发生高血压后其血管张力调节功能受，提示Ｇａｓ６／ＴＡＭａｓ６／ＴＡＭ在损甚至消失通路可能参与调节血管的稳态，且Ｇ低氧介导的血管损伤修复中也发挥重要的作用同时，针对Ａｘｌ敲除小鼠的研巧发现，Ｇａｓ６表达增加可降低粒细胞对血管内皮细胞的黏附功能，表明Ｇａｓ６可通过阻滞白细胞的外渗过程而起到抗炎的作用。总之：在炎症小鼠模型中，Ｇａｓ６可导致白细胞的外渗增加，促进炎症的发展及血小板血栓形成。Ｇａｓ６增大了内皮细胞的活性，在加强内皮细胞、血小板、炎症细胞相互作用方面发挥重要作用。Ｇａｓ６及其受体调节血小板的激活及聚集。内皮细胞及白细胞表达Ｇａｓ６及其受体，特别是在炎症及修复阶段。Ｇａｓ６能促进内皮细胞的存活及新生血管的形成。３８ 山东大学硕±学位论文Ｇａｓ６还可通过调节炎症因子的释放参与炎症的发生及发展。研究发现Ｇａｓ６除了调节内皮细胞Ｐ选择素的水平，也调节其他内皮细施分子的表达。例如，在－ＴＮＦａｓ６－刺激下，，Ｇａ缺乏时内皮细胞表达黏附分子下降，且释放更少的比１、ｆ＂比－６等炎症性Ｇａｓ６通过内皮细胞释放炎症因子等途径促进细胞因子，表明炎症的发生发展过程，并介导相关细胞的调亡及损伤血管的重塑。此外，ｇａｓ６参－，在小鼠巨唆细胞中Ｋ与ＴＬＲ信号通路，ＴＬＲ信号通过ＮＦＢ的激活，减少巨嗟细胞表达Ｇａｓ６，而下调的Ｇａｓ６可通过ＴＬＲ信号调节ＴＬＲ介导的炎性细胞因子的Ｗ产生，说明ＴＬＲ信号调节机制通过调节Ｇａｓ６水平发挥作用。３．２Ｇａｓ６与细贿调亡：Ｇａｓ６可抑制血管内皮细胞、血管平滑肌细胞调亡，介导参与调亡细胞吞隨清除一Ｇａｓ６；同时，通过定的机制介导参与损伤的血管平滑肌细胞及血管内皮细胞的修复及再生。１部分学者１２’Ｗ，Ｇａｓ６及Ａｘｌ研究发现在血管机械损伤动物模型中明思增加，而Ａｘｌ敲除的小鼠血管机械损伤模型中，观察到血管新内膜形成明显减少，血管壁细胞构成发生明显变化，除血管平滑肌细胞增殖减弱和调亡增加外，巨幢细胞ｔｗＧａ和中性粒细胞也思著减少，推测ｓ６／Ａｘｌ在血管内皮细胞及血管平滑肌细胞的调亡及血管的重塑过程中发挥着重要调节作用。有学者研究测定了人血浆中Ｇａｓ６的浓度为－１３２３ｎｇ／ｍｌ，服用华法林者血浆中浓度降低ｓ６。虽然姑在外周血浆中浓度低，然而Ｇａｌｌｉｃｘｈｉｏ等报道，Ｇａｓ６在很化的浓度之下（Ｉｎｇ／ｍｌ）也可ＷＷ通过ＭＬ受体抑制血管内皮细胞的再生。ＭＧａｓ６主要通过与细胞膜上的Ｍｅｒ受体相互作用介导吞嗟调亡细胞。调亡细胞表达磯脂醜丝氨酸（ＰＳ），可结合到Ｇａｓ６或蛋白Ｓ的Ｇｌａ区域，后Ｇａｓ６或蛋白Ｓ与巨幢细胞和树突状细胞表面的ｍｅｒ受体结合。，介导调亡细胞的吞唾清除清除调亡细胞可避免了进一，步的坏死而引发的炎性反应和自身免疫的发生。在ｇａｓ６调节调亡的机制方面，化ｓａｎｂａｓｉｃ等研巧指出，Ｇａｓ６与Ａｘｌ相互作用－ＫＢ－－，通过参与核转录因子ＮＦ的活化ｃｌ２（Ｂ２，使基因ｂ淋己细胞瘤）在－组织细胞中的表达水平增高，也可使ｃａｓ３（细胞调亡相关蛋白酶ｐａｓｅ）的活化性降低，从而发挥对人内皮细胞与小鼠成纤维细胞的调及存活的调控和调节６－Ａｘ作用。且Ｇａｓｌ信号通过ＡＫＴ／ＰＫＢ（丙氨酸氨基转移酶／蛋白激酶Ｂ）的憐酸化激活内皮细胞中ＮＯ合成酶，促进血管内细胞生长因子介导的血管重塑、血管＾３９ 山东大学硕±学位论文ｔｗ——－ＫＢ一稳态和炎症反应。此机制可简化为；Ｇａｓ６Ａｘｌ核转录因子ＮＦ活化－２ｓａｓｅ－一ａｓ６一Ａｘ—ｂｃｌ增加及ｃａｐ３减少调节内皮细胞的调亡及存活ｌ；Ｇ一一ＡＫＴ／ＰＫＢ碟酸化激活ＮＯ合成酶促血管形成、血管重塑和炎症反应。在饥饿小鼠胚胎成纤维细胞系（ＮＩＨ３Ｔ３）模型中，研究发现：ｇａｓ６与受体结合后，通过丝氨酸－－苏氨酸激酶磯酸化，激活Ｎ３Ｋ（磯脂酷肌醇３激酶）及其下游核糖－ＫＢ，与核ＤＮＡ的结合能力及转录活性体蛋白激酿ＷＫ等迅速増加ＮＦ，増加－ＫＢ蛋白的表达水平，灭活部分ＧＳＫ３（糖原合成酶）。ＮＦ主要参与调节炎症－ＫＢ介导的抗ＴＮＦ诱导的、免疫应答、细胞的增生及调亡等生理过程，ＮＦＫ３Ｋ一－，调亡需要胳，ＧＳ３是种丝氨酸苏氨酸蛋白酶主要参与调节细胞的命运及ＮＦ－ＫＢ诱导编码的抗调亡蛋白有Ｂｃ－１１肿瘤的发生。ｌｘｌ、Ａ、ＴＮＦ受体相关蛋白、Ｗ２等。而针对人胳带静脉血内皮细胞的研巧表明；人巧带静脉血内皮细胞被Ｇａｓ６处理后ＮＦ－ＫＢｅ－－，发生了磯酸化，Ｂｌ２蛋白增加，激活Ｂｅｌ２抗调亡途径，ｃａｓｐａｓｅ３激活产物Ｐ１２、Ｐ２０的表达减少。３．３Ｇａｓ６与免疫Ｇａｓ６可通过ＴＡＭ受体参与免疫的调节，无论在模型小鼠体内实验或体外细，Ｇａｓ６均表现出了不同的免疫调节功能。在部分免疫相关疾病胞培养实验中，如系统性红斑狼疮、移植物抗宿主病、银屑病等疾病中，ｇａｓ６水平发生变化，ＵＷ部分学者甚至提出将其作为检测部分疾病发展的指标。ｕ＇ｌ３＂Ｃｏｈ’ｅｎ等将小鼠Ｍｅｒ基因敲除后，小鼠表现为巨嗟细胞对己调亡胸腺细胞的吞睡功能减弱，，并且小鼠循环系统中自身抗体数量增加自身免疫应答反应出现异常；当全部敲除小鼠ＴＡＭ受体（即Ａｘｌ、Ｍｅｒ及Ｓｋｙ）基因时，上述表，，Ｔ、Ｂ淋己细胞过度増殖现更为明盈成年期小鼠出现外周淋己组织器官增大。推测由于Ｇａｓ６／ＴＡＭ信号的缺失，导致小鼠体内抗原提呈细胞（ＤＣ细胞、Ｂ淋己）细胞，，、单核巨喧细胞等过度激活引发了小鼠初始免疫反应导致免疫细胞、免疫器官及免疫功能的异常改变，。因此Ｇａｓ６／ＴＡＭ信号通路在自身免疫应答反一应中具有重要作用，步研巧但其机制有待进。Ｇａｓ６可通过单核巨唆细胞、ＮＫ细胞、抗原提呈细胞等发挥免疫调节作用。，Ｇａｓ６参与免疫调节的功能部分是由单核巨噓细胞介导发生的ｃｉａ首先，Ａｌｔｏ等发现Ｇａｓ６抑制ＬＰＳ（脂多糖）刺激下单核／巨唾细胞分泌炎症相关因子的表这将小鼠Ｇａｓ６基因敲除，使其体内Ｇａｓ６保持低水平，可观察到其单核及巨嗟４０ 山东大学硕七学位论文细胞的反应性增加泌更多的Ｔ－－，脂多糖刺激时ａ，单核细胞产生分ＮＦ及化６。ｓ６－其次，，研究发现阻断Ａｘｌ／Ｇａ信号通路会影响两个受体酪氨酸激酶ｃＫｉｔ和ＦＬＴ３的信号转导＋ＮＫ一，降低ＣＤ３４的细胞的成熟及转化，并带来系列下游因子的变化。再次，Ｇａｓ６可表达于抗原提呈细胞的表面，影响抗原提呈过程，影响移植物与宿主之间的免疫排斥反应，动物实验表明，Ｇａｓ６缺陷小鼠具有较低Ｕ＂的移植物抗宿主反应一，可利用ｇａｓ６的送特点，将其应用于抑制移植免疫排斥的範向治疗中。３．４Ｇａｓ６参与血栓的形成；Ｇａｓ６与血浆蛋白Ｓ有高度的同源性，但不具备凝血酶识别位点，故无蛋白Ｓ的抗凝血活性。最近研究发现，Ｇａｓ６可参与调节血小板的活化、聚集；影响组织因子的表达等过程，最终参与血栓的形成及凝血过程。Ｇａｓ６可直接与血小板膜上ＧＰＩＩｂ／ｌｌｌａ结合，引起血小板活化、聚集及血Ｕ＂栓形成。研究发现Ｇａｓ６敲除小鼠可抑制体内血栓的形成同时，Ｇａｓ６敲除；小鼠体内的血小板失去正常的形态，其功能也发生显著减退甚至缺失，且不能受胶原、凝血酶、ＡＤＰ（二磯酸腺昔）等活化剂诱导聚集，表明Ｇａｓ６具有促进血栓＂５３形成、增强血小板的活化Ｗ及聚集的作用。在动脉损伤或发生动脉粥样硬化的ｂ＂小鼠模型中，Ｇａｓ６或Ａｘｌ的缺乏增加血管保护作用，Ｒｏｂｉｎｓ等报道分析，这是由于Ｇａｓ６依赖性血小板功能缺乏所导致的。血管内皮细胞的损伤会导致血小板的激活、粘附、聚集，最终导致血小板血栓形成。纤维蛋白原通过与整合素相互作用促进血小板聚集及血凝块的收缩一，而整合素必须在发生定的形式转变才能与纤维蛋白结合ｓ６一，Ｇａ在整合素的激活中发挥定的作用，从而影响了血小板的聚集。Ｒｏｂｉｎｓ等报道，敲除Ｇａｓ６的小鼠其损伤的血管壁上几乎无组织因子的表达，而对敲除Ｇａｓ６的小鼠増加外源性Ｇａｓ６会使得其内皮细胞重新表达组织因子，表明，ａｓ６可通过殼响组织因ｇ子的表达影响外源性的凝血过程，调节血栓的形＂了３Ｌａｕｒａｎｃｅ成。、通过体外细胞培养再次证实ｇａｓ６影响内皮细胞组织因子的表达，可能通过此机制影响血栓的形成。Ｂａｌｏｇｈ等首次报道在人血浆中检测到Ｇａｓ６蛋白，Ｂｕｒｎｉｅｒ等研巧发现Ｇａｓ６能够影响抗血小板药物的反应，巧抗Ｇａｓ６能有效抑制血栓形成，揭示了ｇａｓ６在血管性疾病方面的临床应用前景。４１ 山东大学硕±学位论文３．５Ｇａｓ６在各种疾病中的表达３．５．１心血管及代谢性疾病、血管及代谢相关疾病Ｇａｓ６在多种屯，如糖尿病、动脉粥样硬化、皆病等疾。病中表达模式发生变化，提示其可能参与此类疾病的发生发展过程ＩＩ型糖尿病患者血浆中Ｇａｓ６浓度较正常人群血浆中ｇａｓ６浓度低，且Ｇａｓ６ＷＴＮＦ－ａ－－水平与空腹血糖、、比６、ＶＣＡＭ１、尿蛋白呈现相关性。研充显示糖巧一步提出Ｇａ病患者中Ｇａｓ６与肤岛素抵抗、炎症及内皮功能障碍有关，且进ｓ６ＷＩＩ可反映型糖尿病发生风险。Ｃｌａｕｓｅｒ等发现，人类动脉粥样斑块中的平ＴＧＦ－滑肌细胞在目的作用下可分泌ｇａｓ６，且随着斑块复杂程度下降，ｇａｓ６分泌＇ｔｗｓ６一个保护性因子减少，提示阱可能作为，减少平滑肌细胞分泌促炎因子。Ｔｊｗａ等也通过实验证实，ｇａｓ６可由血管内皮细胞及平滑肌细胞、单核／巨唆细胞分泌，其分泌水平与斑块的严重程度正相关ｓ６产生，而ｇａ敲除小鼠中粥样斑块较正常小鼠更为稳定。慢性肾衰竭患者血清中Ｇａｓ６水平增加，Ｇａｓ６水平与肾功能、＂＂白蛋白水平呈负相关。：［ｇＡ型肾病患者血清中ｇａｓ６水平增加，有研究提出ｇａｓ６一＂＂水平可作为ＩｇＡ型肾病进步分类的标记因子。３．５．２炎症性及慢性免疫系统疾病研巧发现，ｇａｓ６参与多种炎症及免疫相关疾病，如系统性红斑狼疮、移植物抗宿主病、银屑病、胺毒血症、病毒及细菌感染等疾病的发生及发展过程，这与其对炎症及免疫系统的调节功能密不可分。等发现系统系红斑狼疮患者血浆中Ｇａｓ６水平升高，且阱ｓ６水平与抗双链ＤＮＡ抗体正相关，与疾病的活动指数密切相关。Ｂｕｒｎｉｅｒ等发现对ｇａｓ６敲除小鼠的同种异体之间进行移植术后，移植物抗宿主反应比较捏，提示我们在ＧＶＨＤ患者接受造血干细胞移植术后，可将ｇａｓ６作为潜在的鞭向治疗手段。ＳｕｎｂｕｌＷ等发现银屑病患者外周血中ｇａｓ６水平降低，且ｇａｓ６浓度与银属病发病的高危因素，如高血压、高血脂、糖尿病、吸烟病史等密切相关。在小鼠真菌过敏性气道疾病中，ｇａｓ６及其受体ＴＡＭ亚家族成员的表达增加，提示，ｇａｓ６在抗真菌感一ｔｎ染等过程中发挥定的作用。另有学者提议ｇａｓ６及其可溶性受体ｓＡｘｌ可作为盆腔炎性疾病的筛查指标对于盆腔炎性疾病的筛查具有重要的临床应用价值。Ｇａｓ６被认为是固有免疫的广泛调节因子，严重肢端缺血病人、巧血症、系＂Ｗ统炎症反应综合症等炎症性疾病患者中ｇａｓ６的表达水平发生变化。４２ 山东大学硕±学位论文３．５．３肿瘤Ｇａｓ６参与调节细胞的存活、调亡、迁移等生理过程，与血管的稳态及创伤修复密切相关ｓ６一，故ｇａ在肿瘤组织的发生、发展中具有定的作用，临床研巧发现一，多数肿瘤组织，如乳腺癌、卵巢肿瘤、肾癌等肿瘤中ｇａｓ６的表达发生定的变化。＂Ｉ＂研究发现，ａｓ６是ｇ乳腺上皮细胞中雌激素作用的靴点，而在乳腺、卵巢及肺部肿瘤中，孕激素通过孕激素受体也可上调ｇａｓ６的表达，乳腺癌患者中，孕激素受体的表达水平与ｇａｓ６的表达水平密切相关，并提出Ａｘｌ可作为乳腺癌Ｗ鞭向治疗的新指。卵巢癌中ｇａｓ６表达增高，血清中Ｇａｓ６水平可作为卵巢癌不良预后的独立预测指标，而肿瘤组织活检肥染色ｇａｓ６的染色程度也可预测卯巢＂３１癌的预后。Ｉｔｏ等发现蛋白酪氨酸激酶家族在甲状腺癌的生长及分化中发挥了重要作用，在大部分甲状腺癌患者的血清及组织中ｇａｓ６及其受体的表达显著升＂’３＂＂Ｗ＂Ｗ。高，可能参与了疾病的发展此外，在前列腺癌、肾癌、子宫平滑肌瘤、＂＂＂Ｗ＂《Ｋ＂白血病、子宫内膜癌、肺癌、胃癌等恶性肿瘤组织中Ｇａｓ６表达也明显増加，推测ｇａｓ６可能参与了肿瘤细胞生长、调亡及侵袭等的调节。针对ｇａｓ６在肿瘤组织中的作用机制，学者做了大量研究，发现ｇａｓ６诱导癌－细胞中ＪＮＫ及ＥＲＫ１／２的信号表达－，从而导致活化蛋白１（ＡＰ１）转ｎ录因子Ｃ化、ＡＴＦ－２的磯酸化，诱导巧指转录因子ｓｌｕ的产生ｇ，而ｓｌｕｇ的表达与细胞的迁移密切相关。故ｇａｓ６通过上调ｓｌｕｇ的表达促进细胞的迁移，在癌症的増生、迁移、发展中发挥一定的作用３．６Ｇａｓ６是雌激素诱导的基因化ｎｇ等针对５８９名研究对象研巧发现：成年女性较成年男性血清中Ｇａｓ６水平增高，Ｇａｓ６水平与游离雌激素、游离雄激素水平明显相关。雌激素受体调节Ｇａｓ６的表达、，从而抑制血管的巧化，可能通过此机制参与了雌激素对屯血管疾病风险Ｂ＂的调节。在部分与雌激素相关的疾病，如生殖系统疾病中ｇａｓ６可能通过此机制参与了疾病的发生发展。４．Ｇａｓ６的临床应用前景目刖，医学界对于ｇａｓ６蛋白己有了巧步的认识，包括其分子结构，定位表达，炎症、免疫、血管稳态、损伤修复、肿瘤等各种生理病理作用及发生作用的４３ 山东大学硕古学位论文，与各疾病的相关性等。根据前期的研究深层分子机制，Ｇａｓ６在器官移植排斥、方面血管及代谢性疾病的治疗方面展示了良好的应用前景，可、免疫性疾病、也一步展开动物及临床试验进，检测其临床应用价值。４４ 山东大学硕：ｉｒ学位论文参考文献－１ｒｅｋ－ＴｏｒａｋＡＢｉｎｏＥｌＯｚａｋｉｎａｒ０ＫａｒａｃａＺａｌｓｓｏｃｉａｔｉｏ打ｏｆｌａｓｍａ，巧．Ａ［］ｐ，ｇｐ，ｐｏｗｔｈａ－ｇｒｒｒｅｓｔｓｐｅｃｉｆｉｃｐｒｏｔｅｉｎ６Ｇａｓ６ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎｓｗｉｔｈａｌｂｕｍｉｎｕｒｉａｉｎａｔｉｅｎｔｓ（）ｐ－ｅ２ｄｉａｂｅｔｅＪ．ＲｅｎＦａｉｌ２０１４３６５ｗｉ化ｔｓ：７３７７４２．ｙｐ［］，，（）［２］ＭａｎｆｉｏｌｅｔｔｉＱＢｒａｎｃｏｌｉｎｉＣ，ＡｖａｎｚｉＱｅｔａｌ．Ｔｈｅｐｒｏ１：ｅｉ打ｅｎｃｏｄｅｄｂｙａ－ｔ－ｒｏｗｔｈａｒｒｅｓｔｓｐｅｃｉｆｉｃｅ打ｅａｓ６ｉｓａ打ｅｗｍｅｍｂｅｒｏｆｔｈｅｖｉａｍｉ打Ｋ过ｅｅ打ｄｅｎｔｇｇ（ｇ）ｐｒｏ化ｉｎｓｒｅｌａｔｅｄｔｏｐｒｏｔｅｉｎＳａｎｅａｔｉｖｅｃｏｒｅｕｌａｔｏｒｉ打也ｅｂｌｏｏｄｃｏａｕｌａｔｉｏｎｐ，ｇｇｇ－ｃａｓｃａｄｅＪ．Ｍｏ１４９ｌＣｅｌｌＢｉｏｌ１９９３３８：４９７６８５．［］，，）（［３］ＮａｇａｔａＫ，ＯｈａｓｈｉＫ，ＮａｋａｎｏＴ，ｅｔａｌ，Ｉｄｅｎｔｉｆｉｃａｔｉｏ打ｏｆ化ｅｐｒｏｄｕｃｔｏｆ呂ｒｏｗｔｈ－Ａｘｌｔａｒｒｅｓｔｓｅｃｉ巧ｃｅｎｅ６ａｓａｃｏｍｍｏ打１ｐｇｌｉａｎｄｆｏｒＳｋａｎｄＭｅｒｒｅｃｅｏｒ：ｒｏｓｉｎｅｇ，ｙ，ｐｙ－ｋｉｎａｓｅｓＪ．ＪＢｏｅｍ１４７：３００２７．ｉｌＣｈＪ９９６，２７３００２２［］（）［叫ＯｈａｓｈｉＫ，ＭｉｚｕｎｏＫ，ＫｕｍａＫ，ｅｔａｌ．Ｃｌｏ打ｉｎｇｏｆ化ｅｃＤＮＡｆｏｒａｎｏｖｅｌｒｅｃｅｔｏｒｔｒｏｓｉｎｅｋｉｎａｓｅＳｋｒｅｄｏｍｉｎａｎｔｌｅｘｒｅｓｓｅｄｉｎｂｒａｉｎＪ．ｐｙ．ｙ，ｐｙｐ［］－Ｏｎｃｏｅｎｅ！９９４９３：６９９７０５．ｇ，，（）ｒａｈａｍＤＫａｗｓｏｎＴＬＭｕｌｌａｎｅＤＬ，ｅｔａｌ．ＣｌｏｎｉｎａｎｄｍＲＮａＧ，Ｄ，ｙｇ［引ｒｅｓｓｎａｎａｏｆ－ｅｘｉｏｌｓｉｓａｎｏｖｅｌｈｕｍａｎｒｏｔｏｏｎｃｏｅｎｅｃｍｅｒＪ．ＣｅｌｌＧｒｏｗｔｈＤｉｆｆｅｒｐｙｐｇ，，［］５７－１９９４６：６４６５７．，（）ｚｃｋａ６ａｎｄｒ－６ＨａｆｉｉＳＤａｈ化ａＢ．ＧｓｃｒｔｅｉｎＳ．ＶｉｔａｍｉｎＫｄｅｅ打ｄｅ打ｔｌｉａｎｄｓｆｏｒ［］，ｐｐｇ２３２３１－５２４４ｔｈｅＡｘｌｒｅｃｅｔｏｒｔｒｏｓｉｎｅｋｉｎａｓｅｓｕｂｆａｍｉｌＪ．ＦＥＥＳＪ２００６２７３：５．ｐｙｙ［］，，（）－Ｍａｒｔ７ＴｊｗａＭＢｅｌＨｄｏｉｎＬ，ＬｉｎＹｅｔａｌ．Ｇａｓ６ｒｏｍｏｌ：ｅｓｉｎｆｌａｍｍａｔｉｏｎｂｙ［］，，ｐｅｎｈａｎｃｉ打ｇｉｎ化ｒａｃｔｉｏｎｓｂｅｔｗｅｅｎｅ打ｄｏｔｈｅｌｉａｌｃｅｌｌｓ，ｐｌａｔｅｌｅｔｓ，ａｎｄｌｅｕｋｏｃｙｔｅｓ［Ｊ］．Ｂｌｏｏｄ，－２００８１１１８：４０％４１０５．，（）Ａｔｔ－８Ｇ化ｏｔＳＣｒａｖｏｉｓｅａｌ１ＭａｓｓｉｎＦ．Ｇｒｏｗｈａｒｒｅ巧ｓｅｃｉｆｉｃｒｏ：ｅｉｎ６［］，，ｙ，ｐｐｌａｓｍａＣＯ打ｃｅｎｔｒａｔｉｏｎｓｄｕｒｉｎｓｅｔｉｃｓｈｏｃｋＪ．ＣｒｉｔＣａｒｅ２００７１１１：Ｒ８．ｐｇｐ［］，，（）［９］ＫｏｎｉｓｈｉＡ，ＡｉｚａｗａＴ，ＭｏｈａｎＡ，ｅｔａＬＨｙｄｒｏｇｅｎｐｅｒｏｘｉｄｅａｃｔｉｖａｔｅｓｔｈｅ－Ｇａｓ６ＡｘｌａｔｈｗａｉｎｖａｓｃｕｌａｒｓｍｏｏｔｈｍｕｓｃｌｅｃｅｌｌｓＪ．ＪＢｉｏｌＣｈｅｍ２００４ｐｙ［］，，２７－２７９：２８７６６２８７７０．（）［１０］ＫｏｒｓｈｕｎｏｖＶＡ，ＤａｕｌＭ，ＭａｓｓｅｔｔＭＰ，ｅｔａｌ．Ａｘｌｍｅｄｉａｔｅｓｖａｓｃｕｌａｒ巧ｅｒｏｎｅａｃｅｔａ－ｒｅｍｏｄｅｌｉｎｇｉｎｄｕｃｅｄｂｙｄｅｏｘｙｃｏｒｔｉｃｏｔｅｓａｌｔｈｙｐｅｒｔｅｎｓｉｏｎ［Ｊｉ．］－Ｈｅｒｔｅｎｓｉｏｎ２００７５０６１１．：０５７０６２ｙｐ，，（）－－ｍｅｄ１１ＤｅｎｇＴＺｈａｎＹ，Ｃｈｅ打，ｅｔａｌ．ＴｏｌｌｌｉｋｅＫｃｅｔｏｒｉａｔｅｄｉｎｈｉｂｉｔｉｏｎｏｆ［］，ｇＱｐＧａｓ６ａｎｄＰｒｏＳｅｘｐｒｅｓｓｉｏ打ｆａｃｉｌｉｔａｔｅｓｉｎｆｌａｍｍａｔｏｒｙｃｙｔｏｋｉｎｅｒｏｄｕｃｔｉｏｎｉｎｍｏｕｓｅｐ２０－ｍａｃｒｏｈａｅｓＪ．Ｉｍｍｕｎｏｌｏ１２１３５ｌ；４０５０．ｐｇ［］，ｇｙ，（）１ＭＢＧＡｘｌ１ｅｍ；２ｅｌａｒａｎｏＭＱＦｒｉｄｅｌｌＹＷｅｒｋＢＣ．Ｔｈｅａｓ６／ｓｓ：：ａｎｏｖｅｌ［，］ｇｙ－ｒｅａｒｃｅ．２５０ｕｌａｔｏｒｏｆｖａｓｃｕｌｌｆｕｎｃｔｉｏｎＪＴｒｅｎｄｓＣａｒｄｉｏｖａｓｃＭｅｄ９９９９８：２５ｇｌ［］１３．，，（） 山东大学硕出学位论文－１３ＣａｖｅｔＭＥＳｍｏｌｏｃｋＥＭＭｅｎｏｎＰｅｔａｌ．Ｇａｓ６Ａｘｌａｔｈｗａ：化ｅｒｏｌｅｏｆ［］，，＞ｐｙｒｅ－ｅｎｄｅｎｔａｓｓｏｃｄｏｘｄｅｉａｔｉｏｎｏｆＡｘｌｗｉｔｈｎｏｎｍｕｓｃｌｅｍｙｏｓｉｎＩＩ目Ｊ．Ｈｙｐｅｒｔｅｎｓｉｏｎｐ［］，－２０１０５６１：１０５１１１．，）（１ｕｅ打ＫＴｓｏｕＷＩｅｎｋｏＳｅｔａｌ．ＴＡＭｅｃｅｔｏｒｓｉ打ａｏｐｔｏｉｃｃｅｌｌ［ｙＫｏｔ，ｒｔ叫ＮｇＱ，，ｐｐ－ｃｌｅａｒａｎｃｅａｕｔｏｉｍｍｕｎｉｔａｎｄｃａｎｃｅｒＡｕｔｏｉｍｍｕｎｉｔ２０１３４６５４－，：２９２９７，，，ｙ町ｙ（）［１５］ＨａｓａｎｂａｓｉｃＩ，ＣｕｅｒｑｕｉｓＪ，Ｖａｍｕｍ目，巧ａｌ．Ｉｎｔｒａｃｅｌｌｕｌａｒｓｉｇ打ａｌｉｎｇｐａｔｈｗａｙｓ－－ｍｅｄｉｎｖｏｌｖｅｄｉ打Ｇａｓ６Ａｘｌｉａｔｅｄｓｕｒｖｉｖａｌｏｆｅｎｄｏ化ｅｌｉａｌｃｅｌｌｓ阴．ＡｍＪＰｈｙｓｉｏｌＨｅａｒｔｃｓｏ－ＣｉｒＰｈ：ｙｉｌ，２００４，２８７（３）Ｈ１２０７Ｈ１２１３．Ｖｅｔｔ－ｔｔｎａ１６ＤｅｍａｒｃｈｉＦｒａｒｄｏ民Ｖａｍｕｍ目ｅａｌ．Ｇａｓ６ａｎｉａｏｏｉｃｓｉｌｉｎ［］，，，ｐｐｇｇｒｅ－－ｉｒｅｓａａａｃｔｉｖａｏ打Ｊｉｏｈｅｍ２００１２７６４：１ＮＦｋＢｔｉＪ．ＢｌＣ３１７３８３７４４．ｑｕｐｐ［］，，口）１７ＨａｓａｎｂａｓｉｃＩＣｕｅｒｕｉｓＪＶａｍｕｍ目ｅｔａｌ．Ｉｎｔｒａｃｅｌｌｕｌａｒｓｉｎａｌｉｎａｔｈｗａｓ［］，ｑ，，ｇｇｙｐａｓ６－－ａｖａ打ｖｏｌｖｅ过打ｍｅｄｔｅｄｓｕｒｖｏｆｅ打ｄｏｔｈｅａｅｓＡｍＪＰｓｏｅａｒｔｉｉＧＡｘＩｉｉｌｌｉｌｃｌｌＪ．ｈｉｌＨ［］ｙＣ２００４－ｉｒｃＰｈｓｉｏｌ２８７３：Ｈ１２０７Ｈ１２１３．ｙ，，（）－约－１８ＲｅｃａｒｔｅＰｅｌｚＴａｓｓｉｅｓＤＥｓｉｎｏｓａａｌ．ＶｉｔａｍｉｎＫｄｅｅｎｄｅｎｔｒｏｔｅｉｎｓ［］，ｐＧｐｐＧＡＳ６ａｎｄＰｒｏｔｅｉ。ＳａｎｄＴＡＭｒｅｃｅｐｔｏｒｓｉ。ｐａｔｉｅｎｔｓｏｆｓｙｓ化ｍｉｃｌｕｐｕｓｅｒｙｔｈｅｍａｔｏｓｕｓ：ｃｏｒｒｅｌａｔｏ打ｗｉｔｈｃｏｍｍｏ打ｅｎｅｔｉｃｖａｒｉａｎｔｓａｎｄｄｓｅａｓｅａｃｔｉｖｉｔＡｒｔｈｒｉｔｓｅｓｅｒｉｇｉｙＪ］．ｉ民Ｔｈ，［２０１３１５２：Ｒ４１．，（）１９Ｚｉｚｚｏｉｌｌｉａｒｄ目ＡＭｏｎｅｓｔｉｅｒＭｅｔａｌ．Ｅｆｆｉｃｉｅｎｔｃｌｅａｒａｎｃｅｏｆｅａｒｌ［］ＱＨ，，ｙａｐｏｐｔｏｔｉｃｃｄｌｓｂｙｈｕｍａｎｍａｃｒｏｐｈａｇｅｓｒｅｑｕｉｒｅｓＭ２ｃｐｏｌａｒｉｚａｔｉｏｎａｎｄＭｅｒＴＫｍｍｕｎｏ－ｉｎｄｕｃｔｉｏｎＪ］．ＪＩｌ２０１２，１８９７：３５０８３５２０．［，（）＊２０ＳｕｈＣＨＨｉｌｌｉａｒｄＢＬｉＳｅｔａｌ．ＴＡＭｉｅｃｅｔｏｒｌｉａｎｄｓｉｎｌｕｕｓ：ｒｏｔｅｉ打Ｓｂｕｔ［］，，，ｐｇｐｐｎｏｔＧａｓ６．００９３ｌｅｖｅｌｓｒｅ幻ｅｃ：ｔｄｉｓｅａｓｅａｃｔｉｖｉｔｉ打ｓｅｍｉｃｌｕｕｓｅｒｔｈｅｍａｔｏｓｕｓＪ，２．１３ｙｙ别ｐｙ［］，３８－４１１４．－－－２１ＡｌｃｉａｔｏＦＳａｉｎａｈｉＰＰＳｏｌａＤｅｔａｌ．ＴＮＦａＩｌｈａＬ６ａｎｄＩＬ１ｅｘｒｅｓｓｉｏｎ［］，ｇ，，ｐ，，ｐｉｓｉ打ｈｉｂ１ｅｄｂＧＡＳ６ｉ打ｍｏｎｏｃｔｅｓ／ｍａｃｒｏａｅｓＪ．ｃ１０：ｉ：ｙｙｐｈｇＪＬｅｕｋｏ目ｉｏｌ２０８７５［］，，（）８６９－８７５，＊２ＰａｒｋＩＫＴｒｏｔｔａ民ＹｕＪｅｔａｌ．Ａｘｌ／Ｇａｓ６ａｔｈｗａｏｓｉｔｉｖｅｌｉｅｕｌａｔｅｓＦＬＴ３［马，，，ｐｙｐｙｇａｃｔｉｖａｔｉｏｎｉｎｈｕｍａｎｎａｔｕｒａｌｋｉｌｌｅｒｃｅｌｌｄｅｖｅｌｏｍｅｎｔＪ．ＥｕｒＪＩｍｍｕｎｏｌ２０１３ｐ［］，，－４３１０２７２７５．；５０５（）２３ＢｕｍｉｅｒＬ，ＳａｉｌｅｒＦＫａｄｉＬ，ｅｔａｌ．Ｇａｓ６ｄｅ巧ｃｉｅｎｃｉ打ｒｅｃｉｉｅｎｔｍｉｃｅｏｆ［］，ｙｐ－－ａｌｌｅｇｅ打ｅｉｃｔｒａｎｓｐｔａｔｏｎａｖａｔｅａｔｉｃｒａｆｔｖｅｔｓｅａｓｅＪ．Ｂｏｄ２０ｌａｎｉｌｌｅｉｓｈｅｐｇｒｓｕｓｈｏｓｄｉｌｏ１０［］，，－１１５１６：３３９０３３９７．（）２４Ａｎ－ＢｕｍｉｅＬｔａｅＵｌｌｏＳｃｈｅｒｒｅｒＡｒ？１〇化３ＮｅＬ民ｏｌｅｏｆＧａｓ６ｒｅｃｅＵ）ｒｓｉｎ［］ｇ，，，ｐｐｌａｔｅｌ巧ｓｉｎａｌｉｎｇｄｕｒｉｎｇｔｈｒｏｍｂｕｓｓｔａｂｉｌｉｚａｔｉｏｎａｎｄｉｍｌｉｃａｔｉｏｎｓｆｏｒａｎｔｉｔｈｒｏｍｂｏｔｉｃｇｐ－１ｅｒａｎｖｅｓｔ１５２：２；ｈｐｙＪ，ＪＣｌｉｎＩ２００５１３７２４６．［］，，（） 山东大学硕古学位论文２５Ａ打ｅ－ｌｉｌｌｏＳｃｈｅｒｒｅｒＡｅｒＬＦｌｏｒｅｓＮｅｔａｌ．ＲｏｌｅｏｆＧａｓ６Ｋｃｅｔｏｒｓｉ打［］，Ｂｕｍｉｇ，，ｐａｔｅｅｔｓｎａｎｔｒｏｍｓｓｔａｂｚａｔｏｎａｎｄｉｍｃａｔｏｎｓｆｏｒａｎｔｔｒｏｍｔｃｐｌｌｉｇｌｉｇｄｕｒｉｎｇｈｂｕｉｌｉｉｐｌｉｉｉｈｂｏｉｔ－ｔｈｅｒａｐｙ［Ｊ］．ＪＣｌｉｎＩｎｖｅｓ，２００５，１１５（２）：２３７２４６．２６艮ｏｂｉｎｓ民Ｓ，ＬｅｍａｒｉｅＣＡ，ＬａｕｒａｎｃｅＳ，ｅｔａｌ．ＶａｓｃｕｌａｒＧａｓ６ｃｏｎｔｒｉｂｕｔｅｓｔｏ［］－ｔｈｒｏｍｂｏｇｅ打ｅｓｉｓａｎｄｒｏｍｏｔｅｓｔｉｓｓｕｅｆａｃｔｏｒｕｒｅｕｌａｔｉｏｎａｆｔｅｒｖｅ巧ｅｌｉｎｕｒｉｎｍｉｃｅ．ｐｐｇｊｙ口］－Ｂｌｏｏｄ２０１３１２１４：６９２６９９．，，（）ＬａｕＪａＬＺ－２７ｒａｎｃｅＳＡｈｏｕｒｉａｎＭＮｉｖｅｔａｌ．Ｇａｓ６ｉ打ｄｕｃｅｄｔｉｓｓｕｅｆａｃｔｏｒ［］，ｇ，，ｅｘｒｅｓｓ－－ｐｉｏｎｉｎｅｎｄｏｔｈｅｌｉａｌｃｅｌｌｓｉｓｍｅｄｉａｔｅｄｔｈｒｏｕｇｈｃａｖｅｏｌｉｎ１ｅｎｒｉｃｈｅｄＪｔ２０１４－ｍｉｃｒｏｄｏｍａｉｎｓ．ＪＴｈｒｏｍｂＨａｅｍｏｓ１２３：３％４０８．［］，，（）［２８］ＢａｌｏｇｈＩ，Ｈａｆｉ之ｉＳ，ＳｔｅｎｈｏｆｆＪ，ｅｔａｌ．Ａ打ａｌｙｓｉｓｏｆＧａｓ６ｉｎｈｕｍａ打ｐｌａｔｅｌｅｔｓａｎｄ－ｌａｓｍａＪＡｒｔＴｈ．．ｅｒｉｏｓｃｌｅｒｒｏｍｂＶａｓｅＢｉｏｌ，２００５２５６：１２８０１２８６ｐ［］，（）２９ＢｕｍＡｎ－ｉｅｒＬＢｏｒｅｌＤｅｌｉｌｌｏＳｃｈｅ打ｅｒＡｅｔａｌ．Ｐｌａｓｍａｌｅｖｅｌｓｏｆ化ｅ，，［］ｇ，ｇｗ－ｇｒｏｔｈａｒｒｅｓｔｓｐｅｃｉｆｉｃｇｅ打ｅ６ｒｏｄｕｃｔＧａｓ６ａｎｄａｎｔｉｐｌａｔｅｌｅｔｄｒｕｇｒｅｓｐｏ打ｓｉｖｅ打ｅｓｓｉｎｐ（）－ｈｅａＪ．４３２２８４ｌｔｈｓｕｂｅｃｔｓＪＴｈｒｏｍｂＨａｅｍｏｓｔ２００６，１０：２２８．ｙｊ［］，（）ＹｅＣｅｔａｌ－３０Ｈｕ打ＪＬｅＨＣｈｕＮＦ．Ｐｌａｓｍａｒｏ１：ｅｉｎｒｏｗｔｈａｒｒｅｓｔｓｅｃｉｆｉｃ６［］ｇ，，ｇｐ，ｐｔｔｔｔｏ打ｌｅｖｅｌｓａｒｅａｓｓｏｃｉａｅｄｗｉｈａｋｅｒｅｄｌｕｃｏｓｅｏｌｅｒａｎｃｅｉｎｆｌａｍｍａｉａｎｄｅｎｄｏ化ｅｌｉａｌｇ，，ｓ－ｄｆｌｉ打ｃｔｉｏｎ］．ＤｉａｂｅｔｅｓＣａｒｅ２０１０３３８：１８４０１８４４．ｙｐ，，（）［３１］ＱａｕｓｅｒＳ，Ｍｅｉｌｈａｃ０，ＢｉｅｃｈｅＩ，ｅｔａｌ．Ｉｎｃｒｅａｓｅｄｓｅｃｒｅｔｉｏ打ｏｆＧａｓ６ｂｙｓｍｏｏｔｈｍｕｓｃｌｅｃｅｓｔｈｅｒｏｓｃｅｒｏｃｃａｒｏｄａｕｅｓＴｈｒｏｍｂＨａｅｍｏｓｔ１２ｌｌｉｎｈｕｍａｎａｌｔｉｔｉｐｌｑ［Ｊ］．，２０，－１０７１：１４０１４９．（）Ｍｏｏ打ｓＬ－３２ＴｗａＭＬｕｔｅｎｓＥ．Ｐｌｅｉｏｔｒｏｉｃｒｏｌｅｏｆｒｏｗｔｈａｒｒｅｓｔｓｅｃｉｆｉｃ［］ｊ，，ｇｐｇｐａｔｈｅｒｏｏｓｓＪｏ－％ｅｎｅ６ｉｎｓｃｕｎ：呂ｌｅｒｉ．ＣｒｒＯｐｉＬｉｉｄｌ２００９２０５３８６３．［］ｐ，，（）３３ｅｅｔ－［］ＬＩＪ，ＨｉｌｌｉａｒｄＢ，ＳｗａｍｉＡｅｔａｌ．Ｇｒｏｗｔｈａｒｒｅｓｓｅｃｉｆｉｃｅｎｅ６Ｇａｓ６，ｐｇ（）ｅｖｅｓａｒｅｅｌｅｖａｔｅｄｉｎａｔｉｅｎｔｓｗｉｔｈｃｈｒｏｎｉｃｒｅｎａｌｆａｕｒｅｅｈｒｏｌＤｉａｌＴｒａｎｓｌａｎｔｌｌｐｉｌＵ．Ｎｐｐ，］１１４１６６－２０２２７１．：４１７２，（）［３４ＮａｇａｉＫ，Ｍｉｙｏ沈ｉＭ，ＫａｋｅＴ，ｅｔａｌ．Ｄｕａｌｉ打ｖｏｌｖｅｍｅｎｔｏｆｇｒｏｗｔｈ］ａｒｒｅｓ＾ｓｐｅｃｉｆｉｃｇｅ打ｅ６ｉｎｔｈｅｅａｒｌｙｐｈａｓｅｏｆｈｕｍａｎＩｇＡｎｅｐｈｒｏｐａｔｈｙ［Ｊ］．ＰＬｏＳＯｎｅ，２０１３８６：ｅ６６７５９．，（）＇３ｕＣＳＨｕＣＹＴｓａｉＨＰｅｔａｌ．Ｅｌｅｖａｔｅｄｓｅｒｕｍｌｅｖｅｌｏｆｒｏｗｔｈ［习Ｗ，ｊｓ呂ａｒｒｅｓ－ｔｓｅｃｆｃｒｏｔｅｉ打６Ｇａｓ６ｉ打ｓｓｔｅｍｉｃｌｕｕｓｅｒｔｅｍａｔｏｓｕｓａｔｉｅｎｔｓｉｓａｓｓｏｃｉａｔｅｄｐｉｉｐ（）ｙｐｙｈｐ－ｗｔｔＲｔ２０４５２５．ｉｈｎｅｈｒｉｔｉｓａｎｄｃｕｔａｎｅｏｕｓｖａｓｃｕｌｉｉｓＪ．ｈｅｕｍａｔｏｌＩｎ１３４：６６２９ｐ［］，，（）３６ＳｕｎｂｕｍａｎＺ－ｌＭ，ＧａＧｅｒｉ打Ｆｅｔａｌ．ＧｒｏｗｔｈＡｒｒｅｓｔＳｅｃｉｆｉｃ６ａｎｄ［］ｇ，，ｐＣａｒｄｉｏｍｅ１民ａｃｔｏａｔｔｓｔｏｖａｓｃＴｈｅｒ：ａｂｏｌｉｃｉｓｋＦｒｓｉｎＰｉｅｎｗｉｈＰｓｏｒｉａｓｉｓＪ．Ｃａｒｄｉ２０１５．［］， 山东大学硕±学位论文ｔｔＮＡ民ｏ－３７ＳＷｂａａＩｓｍａｉｌｏｌｕＵＢＫｉｔａｎ巧ａｌ．ｌｅｏｆｒｏｗｔｈａｒｒｅｓｔｓｅｃｉｆｉｃ［］ｇ，，ｇｐｇｅｎｅ６ｉ打ｔｈｅｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔｏｆｆｉｍｇａｌａｌｌｅｒｇｉｃａｉｒｗａｙｄｉｓｅａｓｅｉｎｍｉｃｅ［Ｊ］，ＡｍＪ民ｅｓｐｉｒｅｏｏ－ＣｌｌＭｌＢｉｌ２０１４５１５：６１５６２５．，，（）ＷｕＴＦＴＴＮ＊３８ＹａｎＳＦｓａｉＨｅｔａｌ．ｅｗｍａｒｋｅｉｓｉｎｅｌｖｉｃｉｎｆｌａｍｍａｔｏｒ［］ｇ，，，ｐｙｍ－ｄｉｓｅａｓｅＪ．ＣｌｉｎＣｈｉＡｃｔａ２０１４４３１：１１８１２４．［］，，［３９］ＥｋｍａｎＣ，ＬｉｎｄｅｒＡ，Ａｋｅｓｓｏ打Ｐ，ｅｔａｌ．ＰｌａｓｍａＣＯ打ｃｅｎｔｒａｔｉｃｍｓｏｆＧａｓ６ｒｏｗｔｈａｒｒｅｓｔｓｅｃｉｆｉｃｒｏｔｅｉｎａｎｄｉｔｓｓｏｌｕｂｌｅｔｒｏｓｉｎｅｋｉｎａｓｅｒｅｃｅｔｏｒｓＡｘｌｉｎ（ｇｐｐ巧ｙｐｓｅｓｉｓａｎｄｓｅｍｉｃｉｎｆｌａｍｍａｔｏｒｒｅｓｏ打ｓｅｓ打ｄｒｏｍｅｓＪ．ＣｒｉｔＣａｒｅ２０１０１４４：ｐｙ巧ｙｐｙ［］，，（）民１５８．Ｚｈａｎ－４０Ｍｏ民ＴｏｎＺＹ之ｅｔａｌ．ＧＡＳ６ｉｓａｎｅｓｔｒｏｅｎｉｎｄｕｃｉｂｌｅｅｎｅｉｎ［］，ｙ，ｇ，ｇｇｅｔｅ－ｍａｍｍａｒｙｐｉｈｌｉａｌｃｅｌｌｓＪ．ＢｉｏｃｈｅｍＢｉｏｓＲｅｓＣｏｍｍｕｎ２００７３５３１：１８９１９４．［］ｐｈｙ，，（）４ＭＷＹｔｔｒｔ－１ｅＣＯＣｈｕｎＦｉｚａｉｃｋＰｅａｌ．Ｇｒｏｗｔｈａｒｒｅｓｔｓｅｃｉ打ｃｅｎｅ６［］，ｇ，，ｐｐｇｅｘｒｅｓｓ－ｉｏｎｉｎｈｕｍａｎｂｒｅａｓｔｃａｎｃｅｒ［Ｊ．ＢｒＪＣａｎｃｅｒ２００８９８：１１４１１１４６．ｐ］，，（巧４２Ｂｕｅｈｔｔ－ｔｌｅｒＭＴｓｅＢＬｅｂｏｕｃＡ，ｅａｌ．Ｍｅａａｎａｌｓｉｓｏｆｍｉｃｒｏａｒｒａｄａａ［］，，ｑｙｙｉｄｅ打ｔｉ贷ｅｓＧＡＳ６ｅｘｐｒｅｓｓｉｏ打ａｓａｎｉｎｄｅｐｅｎｄｅｎｔｐｒｅｄｉｃｔｏｒｏｆｐｏｏｒｓｕｒｖｉｖａｌｉ打ｏｖａｒｉａｎｃａｎｃｅｒＪ，ＢｉｏｍｅｄＲｅｓＩｎｔ，２０１３，２０１３：２３８２８４．［］＾ｏＭｓａｋａａｍａｅｔａ－［４３ＩｔＮａｋａｈｉｍａＭＮＴｌ．Ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎｏｆｉｅｃｅｔｏｒｔｅ］，，ｙ，ｐｙｐｔｒｏｓｉｎｅｋｉｎａｓｅＡｘｌａｎｄｉｔｓｌｉａｎｄＧａｓ６ｉｎｅｄｉａｔｒｉｃｔｈｒｏｉｄｃａｒｃｉｎｏｍａｓａｒｏｕｎｄｙ，，，，ｇｐｙ－ｃｈｅｍｏｂｙｌＪ．Ｔｈｙｒｏｉｄ２００２１２ｌｌ：９７１９７５．［］，，（）４４ＳａｉｎａｇｈｉＰＰＧａｓｔｅｌｌｏＬＢｅｒａｍａｓｃｏＬｅｔａｌ．Ｇａｓ６ｉｎｄｕｃｅｓｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｏ打ｉｎ［］，，，ｇｐｐｒｏｓｔａｔｅｃａｒｃｉｎｏｍａｃｅｌｌｌｉ打ｅｓｅｘｐｒｅｓｓｉｎｇｔｈｅＡｘｌｒｅｃｅｐｔｏｒ［Ｊ］．ＪＣｅｌｌＰｈｙｓｉｏｌ，２００５，－２０斗ｌ．：３６４４（）４５ＲａｎｋｉｎＥＢＦｕｈＫＣａｓｔｅｌｌｉｎｉｅｔａｌ．ＤｉｒｅｃｔｒｅｕｌａｔｉｏｎｏｆＧＡ％／ＡＸＬ［］，ＣＬｇ，ｓｉｇ打ａｌｉ打ｇｂｙＭＬＦｐｒｏｍｏｔｅｓｒｅ打ａｌｍｅｔａｓｔａｓｉｓｔｈｒｏｕｇｈＳ民ＧａｎｄＭＥ了Ｊ．ＰｒｏｃＮａｔｌ［］－ＡｃａｄＳｃｉＵＳＡ２０１４ｌｌｌ３７．：ｎ３７３１３３７８，，）（４６ＳｕｎＷＳＦｕｉｍｏｔｏＪＴａｍａａＴ．Ｃｌｉｎｉｃａｉｍｃａｔｏ打ｓｏｆｃｏｅｘｒｅｓｓｉｏｎｏｆｌｌｉｉ［］，ｊ，ｙｐｐｒｏｗｔｈａｒｒｅｓ－ｔｓｅｃｉｆｉｃｅｎｅ６ａ打ｄｒｅｃｅｔｏｒｔｒｏｓｉ打ｅｋｉｎａｓｅｓＡｘｌａ打ｄＳｋｉ打ｈｕｍａｎｇｐｇｐｙｙ－ｕｔｅｒｉｎｅｌｅｉｏｍｏｍａＪ．ＭｏＨｕｍｒｏｄ２００３９１］：７０１．ｙｌ艮巧，，７０７［］（）４７ｄａ－ＷＪＭｉｌｌｉｌｓｏｎＢａｔｅｓＣＳｃｈｋｅｌＪｅｔａｌ．Ｐｒｏｌｏｎｅｄｅｘｏｓｕｒｅ１：０ａＭｅｒ［］ｇ，，ｇ，ｇｐｌｉｇａｎｄｉ打ｌｅｕｋｅｍｉａ：Ｇａｓ６ｆａｖｏｒｓｅｘｐｒｅｓｓｉｏ打ｏｆａｐａｒｔｉａｌＭｅｒｌｙｃｏｆｏｍｎａ打ｄｒｅｖｅａｌｓａｇ打ｏｖｅｌｒｏｌｅｆｏｒＭｅｒｉｎ化ｅｎｕｃｌｅｕｓＪ．ＰＬｏＳＯｎｅ２０１２７：ｅ３１６３５．［］，，（＾－４８ＳｉｍＷＳＦｕｉｍｏｔｏＪＴａｍａａＴ．Ｃｏｅｘｒｅｓｓｉｏｎｏｆｒｏｗｔｈａｒｒｅｓｔｓｅｃｉｆｉｃｅｎｅ［］，ｊ，ｙｐｇｐｇ６ａｎｄｒｅｃｅｔｏｒｔｒｏｓｉｐｙｉ打ｅｋｉｎａｓｅｓＡｘｌａｎｄＳｋｙｉｎｈｕｍａｎｕｂｒｎｅｅｎｄｏｍｅｔｒｉａｌｃａｎｃｅｒｓ．Ｕ］Ａｎｎ－Ｏｎｃｏｌ２００３１４６：８９８９０６．，，（） 山东大学硕±学位论文［４９］ＷｕＸ，ＬｉｕＸ，ＫｏｕｌＳ，ｅｔａｌ．ＡＸＬｋｉｎａｓｅａｓａ打ｏｖｅｌｔａｒｇｅｔｆｏｒｃａｎｃｅｒ化ｅｒａｐｙ＊ｎｃｏ化－Ｊｉｔ１４５５．Ｏｅ２０２０：９４６９５６３．［］ｇ，，（）Ｋａｗａｓｈ－５０ＳａｗａｂｕＴＳｅ打ｏＨｉｍａＴＴｅｔａｌ．Ｇｒｏｗｔｈａｒｒｅ：ｓｔｓｅｃｉｆｉｃｅｎｅ６ａｎｄ［］，，，ｐｇＡｘｌｓｉ打ａｌｉｎａｎｃｅａｓｔＡｇｇｅｎｈｓｒｉｃｃａｎｃｅｒｃｅｌｌｓｕｒｖｉｖａｌｖｉａｋｔｐａｔｈｗａｙＪ．ＭｏｌＣａｒｃｉｎｏｇ［］ｇ，２００７４６２－：１巧６４，（）１．［５１］Ｌｅｅ乂ＬｅｅＭ，ＫｉｍＳ．Ｇａｓ６ｉｎｄｕｃｅｓｃａｎｃｅｒｃｅｌｌｍｉｇｒａｔｉｏｎａｎｄｅｐｉ化ｅｌｉａ＾ｍｅｓｅ打ｃｈｙｍａｌｔｒａｎｓｉｔｉｏ打ｔｈｒｏｕｇｈｕｐｒｅｇｕｌａｔｉｏ打ｏｆＭＡＰＫａｎｄＳｌｕｇＪ．［］Ｂ－ｉｏｃｈｅｍＢｉｏｈｙｓＲｅｓＣｏｍｍｕｎ２０１３４３４１：８１４．ｐ，，（）５２ＨｕｎＹＪＬｅｅＣＨＳｈｉｅｈＹＳｅｔａＬｅ打ｄｅｒｄｆｅｒｅｎｃｅｓｎａｓｍａｏｗｔｈ［］ｇ，，Ｇｉｉｌｒ，ｐｇ－ａｒｒｅｓ－ｔｓｅｃｉｆｉｃｐｒｏｔｅｉｎ６ｌｅｖｅｌｓｉｎａｄｕｌｔｓｕｂｅｃｔｓＪ．ＣｌｉｎＣｈｉｍＡｃｔａ２０１５４４１：１５．ｐｊ［］，，Ａｋ－５３Ｓｏ打ＢＫｉｓｈｉｔａＭｌｉｉｍａＫｅｔａｌ．Ａｎｄｒｏｅｎｒｅｃｅｔｏｒｄｅｅｎｄｅｎｔ［］，，，ｊｇｐｐ－ｔｒａｎｓａｃｔｉｖａｔｉｏ打ｏｆｒｏｗｔｈａｒｒｅｓｔｓｅｃｉｆｉｃｅｎｅ６ｍｅｄｉａｔｅｓｔｅｆｆｅｃｔｓｏｆｇｐｇｉｎｈｉｂｉｏｒｙ－ｔｅｓｔ：ｏｓｔｅｒｏｎｅｏｎｖａｓｃｕｌａｒｃａｌｃｉｆｉｃ如ｉｏｎ．ＪＢｉｏｌＣｈｅｍ２０１０２８５１７５３７＾４４．ｙ］，，（；抑４９ 山东大学硕±学位论文致谢在学位论文完成之际，回想起研巧生期间学习、工作和生活中的点点滴滴，，同时也伴随着不断学习拼搏的充实。在此不仅充满了忙碌踏实工作的辛劳，我一、向３年中所有陪伴我路走过并给予我热屯关怀、无私指导的领导及同学、朋友、的感谢表示最衷屯。、值此论文完成么际！，首先我要感谢我的导师马玉燕教授在马老师的精屯指导下，论文得Ｗ顺利完成。３年的相处，让我意识到马老师精湛的医术、渊博的一知识、鎮密的思维、严谨的治学及工作态度，都将成为我生学习及效化的榜样。老师高尚的医德医风、宽厚的带人处事方式也给了我很大的启示，是我学习的楷ｉ模。感谢导师兰年时间里在工作ｌ＾？及生活上，、学习给我无微不至的关怀，尽可能的为我提供各种理论及临床学习、锻炼的机会，在此我表示最诚擧地谢意。感谢全体妇产科及实验室基础学科老师在临床实践和科研实验中给予我的无私指导和帮助。感谢师姐师妹们Ｗ及同学在临床及实验中给予的热也帮助。感谢我的家人！，是他们永不间断的支持、鼓励，给了我坚持向前的动力５０ 山东大学硕女学位论文攻读学位期间发表的学术论文［１］马玉燕，桑洪爱．微量元素对巧娠期高血压疾病的预防作用．［Ｊ］中国实２０１４０８－用妇科与产科杂志：５８９５９２，，（）［２］王立葵，桑洪爱，马玉燕，徐银涛，王琳琳．６６例系统性红斑狼疮患者６７次１４－妊娠特点及妊娠结局分析［Ｊ］．山东大学学报（医学版）２０１２：６９７２，，（）［３］马玉燕，桑洪爱．经产妇孕前准备、孕期检查及并发症的预防［Ｊ］．中华全２０１５４－科医师杂志：１１，１（３）：６６６９．，４［］桑洪爱．ａ，马玉燕，朱晓丹，王琳琳，贺梦雅ｇｓ６在重度子痛前期患者胎盘组织中的表达及意义［Ｊ］．中华妇产科杂志（已接收）．５１ 学位论文评阅及答辩情况表业技是总体介姓＾所在单位ｒＩ１三职ｉ务ｌＩ针ＩＸ（硕导）论你棚黄ＰＪｒ山义＾ｌ／ｋ邪ｆ义城受．朋ＷＭ良Ａ痛帝专／ＡＪ砰俾中专业技术是否惜尊姓名所在单位二１下某置Ｔ主席苑．钟麵励巧心ｊｊ耐辞部邸■＾］Ｉｔ禾种巧到是答辩絶４厶义＾心员委４如山皆乂衫良戸／所尽含捉飾朵Ｉ餐山奔义遂ｔ４爲故＞ｆ戶员员良答辩秘书杉＾答辩曰期＞＾ｉ．ｉ，／作寞ＳｉｉｔＳＳ｜１注Ｉ＂＂＂＂＂＂＂＂ＸＡＢＤ。优秀为；良好为；合格为Ｃ；不合格为
此文档下载收益归作者所有
