小分子化合物和hips培养液对猪体细胞核移植胚胎的研究

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2、ＯＮＰＩＧＳＯＭＡＴＩＣＣＥＬＬＮＵＣＬＥＡＲＴＲＡＮＳＰＬＡＮＴＡＴＩＯＮ金死动物遗传育种与繁殖延边大学学校代码；１０１８４？分类号：农娜壬学位论文小妍化翰和ｈｉＰＳ培＃｜＾猪体细胞核移植胜胎的礁ＳｔｕｄｉｅｓｏｎｔｈｅＥｆｆｅｃｔｏｆＳｍａｌｌＣｈｅｍｉｃａｌＣｏｍｐｏｕｎｄｓａｎｄｈｉＰＳＭｅｄｉｕｍｏｎＰｉＳｏｍａｔｉｃＣｅｌｌＮｕｃｌｅａｒＴｒａｎｓｌａｎｔａｔｉｏｎｇｐ金龙动觀遗传前与繁殖醜大学分类号密级ＵＤＣ学号巧这大学项古学位论文

3、小分子化合物和ＭＰＳ培养液对体细胞核移植化胎的研究ＳｔｕｄｉｅｓｏｎｔｈｅＥｆｆｅｃｔｏｆＳｍａｌｌＣｈｅｍｉｃａｌＣｏｍｐｏｕｎｄｓａｎｄｈｉＰＳＭｅｄｉｕｍｏｎＰｉｇＳｏｍａｔｉｃＣｅｌｌＮｕｃｌｅａｒＴｒａｎｓｐｌａｎｔａｔｉｏｎ研究生姓名金龙巧？养单位延边大＃抬导教师姓名、职称熙俊教授赛学科专化动物遗作育＾与秦殖［；研突方向动物化胎王程论文提交曰期２０１日月曰奇；言＾本论文已达到农学硕±学位论文要求答辩委员会主席（印）答辩委员会委员疼答辩委员会委员答辩委员会

4、委员＾延边大学２０巧年５月２２日Ｉ学位论文独创性声明本人郑重声明：所呈交的学位论文系本人在导师指导下独立完成的研究成果。尽我所知，除了文中特别加Ｗ标记和致谢的部分外，论文中不包含其他人已经发表或撰写过的研究成果，也不包含本人为获得任何教育机构的学位或学历而使用过的材料一同工作的同事对本研究所做的任何贡献均已在论文中作了。与我明确的说明并表示谢意。本人如违反上述声明一，愿意承担由此引发的切责任和后果。，研究生签名：令私日期：心年Ｔ月Ｗ日学位论文使用授权声巧本人在导师指导下所完成的学位论文，可，学校有权保存其电子和

5、纸制文挡Ｗ借阔或上网公布本学位论文的全部或部分内容，可向有关部口或机构送交并授权其保存。对于保密论文，按、借阅或上网公布本学位论文的全部或部分内容保密的有关规定和程序处理。本学位论文属于：Ｌ保密□，在年解密后适用于本明；２不保密回｛ｔ＾：■Ｍｒ年１月研究生签名：导师签名；从ｙ／日期？５摘要目前体细胞核移植技术生产克隆猪在农业和医学等领域都有着广泛的应用一前景。但由于体细胞核移植效率直很低。影响克隆效率，限制了克隆猪的应用、的原因有很多，例如表观遗传程序的不完全表法不适的培养环境及染色体的异常化等。本文首次研究了罗米

6、鲁曲对猪体细胞核移植胚胎后期发育能力的影响，并首次将猪体细胞核移植早期囊胜在人诱导多功能干细胞培养液中培养，并分析其结果。研究结果如下：１．本章利用不同浓度的罗米鲁曲处理瘡体细胞克隆胚胎２４小时，寻找最适。合浓度，随后用最适浓度处理不同时间，确定最佳时间和最佳浓度实验结果发现在不同的处理浓度下（ＯｎＭ，５０ｎＭ，ｌＯＯｎＭ，２００ｎＭ），其中ｌＯＯｎＭ的囊９。．８％，１２．３％，１８．３％５．２％Ｐ＜０．０５用胚率显著优于对照组和其他处理组（，，）最优浓度ｌＯＯｎＭ的罗米鲁曲进行不同时间的处理时（Ｏｈ，１２ｈ，２化，４化），结

7、果显示＂，２４小时的囊胚率优于对照組及其他处理组化０／〇，４．７％，１３．７％，１１．１％。最后将ｌＯＯｎＭ罗米鲁曲处理２４小时的猪体细施核移植胚胎移植到两头）一。代孕母猪体内，其中头怀孕Ｗ上结果表明，罗米鲁曲对猜体细胞核移植胚胎体外发育起到促进作用。２名为ｏｎｅ－．本章研究两种不同体外培养系统培养的囊胚的质量，分别命ｓｔｅｐ－－和－ｓｔｅｅｓｔｅ３７ｔｗｏｐ培养系统。在ｏｎｐ培养系统中，猪核移植囊胚在ＮＣＳＵ培养５－ｓｔｅ液中培养７天，在第天更换１次培养液。在ｔｗｏｐ培养系统中，猪核移植胚胎在ＮＣＳＵ－３７培养液培养５天，之后更换