rnai抑制nek细胞tgfβ表达的研究

《rnai抑制nek细胞tgfβ表达的研究》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在应用文档-天天文库。

1、--------------------------------------------精品文档Word可编辑值得收藏------------------------------------------------RNAi抑制NEK细胞TGFβ表达的研究/h1--8----------------------------------------------------精品文档值得收藏---------------------------------------------------------------------------------------------------

2、----精品文档Word可编辑值得收藏------------------------------------------------RNAi抑制NEK细胞TGFβ表达的研究/h1--8----------------------------------------------------精品文档值得收藏-------------------------------------------------------------------------------------------------------精品文档Word可编辑值得收藏---------------------

3、---------------------------RNAi抑制NEK细胞TGFβ表达的研究/h1--8----------------------------------------------------精品文档值得收藏-------------------------------------------------------------------------------------------------------精品文档Word可编辑值得收藏--------------------------------------------------本站首页免费课件免费试

4、题整册教案教育资讯计划总结英语角幼儿教育文书写作海量教案免费论文网站地图设为首页收藏本站语文科数学科英语科政治科物理科化学科地理科历史科生物科中考备战高考备战高考试题中考试题教学论文作文园地教学论文经济论文理工论文管理论文法律论文行政论文艺术论文医学论文文史论文农科论文英语论文课程改革教育法规教育管理家长频道您现在的位置：3edu教育网免费论文医学论文基础医学论文正文3edu教育网,百万资源,完全免费,无需注册,天天更新！RNAi抑制NEK293细胞TGFβ1表达的研究【摘要】目的:探讨针对转化生长因子β1(TGFβ1)的小干扰RNA(siRNA)对大鼠肾间质细胞系(NEK2

5、93)TGFβ1的表达、细胞周期的抑制及细胞凋亡的诱导作用.方法:利用RNA干扰(RNAi)效应设计针对TGFβ1的不同siRNA,构建表达载体质粒并转染NEK293细胞系.RTPCR和WesternBlot分别检测TGFβ1mRNA及蛋白的表达,细胞生长试验和流式细胞观察转染前后细胞周期及细胞凋亡的变化.另设一无意义RNA载体质粒为阴性对照.结果:siRNA转染效率70%,特异性siRNA对TGFβ1mRNA及蛋白的表达具有抑制作用(P0.05),实验组细胞生长受到抑制、凋亡增加(P0.05).结论:应用RNAi技术可明显抑制TGFβ1的表达,并高效的抑制NEK29

6、3的生长、诱导其凋亡.【关键词】转化生长因子β1;肾纤维化;RNA干扰0引言肾纤维化是肾脏多种损伤,如创伤、缺血、肾移植术后慢性排异反应及尿路梗阻等修复的共同转归.长期以来,肾纤维化被描述为不可逆的静止性瘢痕组织,但近年来的研究认为纤维化实际上是一个动态过程,其特征为细胞外基质(ECM)迅速重建和长期的成纤维细胞激活,已知的主要效应细胞为成纤维细胞、肾间质细胞等.体外研究表明,转化生长因子β1(TGFβ1)是肾间质细胞的主要调控因子.本研究应用TGFβ1特异性小干扰RNA(siRNA),以质粒载体转染大鼠肾间质细胞NEK293,观察特异性siRNA对TGFβ1的表达,NE

7、K293细胞周期及凋亡的影响.1材料和方法1.1材料HEK293细胞(美国Clontech公司);Lipofectamine(美国Gibco公司);RTPCR试剂盒(日本TaKaRa公司);化学发光试剂,(美国SantaCruz公司);噻唑蓝显色剂(MTT)、碘化丙啶(PI)荧光染料、TritonX100打孔剂(美国Sigma公司);DOSPER脂质体(美国Roche公司);荧光显微镜(德国Opton公司);TECANsunrise型自动酶联免疫检测仪,coulterEpic