七氟烷对培养的小鼠小胶质细胞炎症因子表达的影响

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1、分类号：R164.1密级：不保密UDC：610学校代码：11065硕士学位论文七氟烷对培养的小鼠小胶质细胞炎症因子表达的影响孙敏指导教师殷积慧教授学科专业名称麻醉学论文答辩日期2015年6月6日摘要目的：探讨七氟烷对培养的小鼠小胶质细胞中炎症因子表达的影响。方法：取新生（2-3天）C57BL/6小鼠，分离小胶质细胞，将其随机分为4组（n=10）：对照组（Control）；七氟烷组（Sevoflurane）；NF-ΚB抑制剂组（PDTC）；NF-ΚB抑制剂+七氟烷组（PDTC+Sevoflurane）。用Drager麻醉机向Sevof

2、lurane组PDTC+Sevoflurane组培养的小胶质细胞盒内释放21%O2，5%CO2，4.1%七氟烷的气体，用气体分析仪持续监测各组的浓度。应用Iba-1的免疫荧光染色法对小鼠小胶质细胞进行纯度鉴定。分别在于给七氟烷后2h、4h和6h时采用免疫印迹分析技术检测两组小胶质细胞IL-6和TNF-α的表达水平和NF-ΚB的活性。PDTC+Sevoflurane组在给七氟烷前一小时给予PDTC，采用ELISA技术和免疫印迹分析技术检测各组小胶质细胞IL-6和TNF-α的浓度和NF-ΚB的表达。结果：免疫印迹显示七氟烷组细胞中IL-

3、6、TNF-α水平和NF-ΚB的激活水平升高；PDTC降低了七氟烷作用后核内NF-ΚB的表达，减弱了IL-6和TNF-α水平的升高作用。结论：七氟烷可通过激活NF-ΚB信号通路，进一步激活培养的小鼠小胶质细胞中炎症因子的表达。硕士研究生孙敏（麻醉学）指导教师殷积慧教授关键词：七氟烷；神经炎症；IL-6；TNF-α；NF-ΚBAbstractObjective:Toevaluateeffectofsevofluraneontheexpressionofinflammationcytokineinneurogliomacellsofcu

4、lturedmice.Methods:Microgliacellsabtainedfromnewborn(2-3days)C57BL/6micewereseparatedandrandomlydividedinto4groups(n=10):controlgroup(Control);sevofluranegroup(Sevoflurane);NF-ΚBinhibitorsgroup（PDTC);NF-ΚBinhibitorsgroup+sevofluranegroup(PDTC+Sevoflurane).Oxygen(21%),C

5、arbondioxide(5%)andsevoflurane(4.1%)weredeliveredfromanDrageranesthesiamachinetothemicrogliacellssealedinaplasticboxofthetwogroups.ThetwogroupsareSevofluranegroupandPDTC+SevofluranegroupinwhichthelatergrouphadbeengivenPDTC1hourbeforesevofluranetreatment.ADraggasanalyze

6、rwasusedtocontinuouslymonitortheconcentrationsoftheO2,CO2andsevofluranerespectively.Iba-1immunofluorescencestainingmethodwasusedtothepurityidentificationofmicrogliainmice.WeexaminedtheexpressionofIL-6andTNF-α(byWesternBlottingAnalysisandELISA)andactivationofNF-ΚB(byWes

7、ternBlottingAnalysis)at2,4and6haftersevofluranetreatment.Results:SevofluraneincreaseslevelsofIL-6andTNF-αthroughactivatesNF-ΚBsignalingpathway.Conclusion:ThesestudiessuggestthatNF-ΚBsignalingpathwaycouldcontributetotheincreasingexpressionofinflammationcytokine.Postgrad

8、uatestudent:SunMin(Anesthesiology)Directed:YinJi-huiProfessorKeywords:Sevoflurane;Neuroinflammation;IL-6;TNF-α;NF-ΚB目