冬虫夏草无性型—中国被毛孢固态发酵条件的初步研究

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1、第26卷第3期生物学杂志V01．26No．32009年6月JOURNALOFBIOLOGYJun，2009doi：10．3969／j．issn．1008-9632．2009．03．022冬虫夏草无性型一中国被毛孢固态发酵条件的初步研究葛飞，桂琳。，李春如，樊美珍(1．安徽农业大学微生物防治安徽省重点实验室，合肥230036；2．安徽工程科技学院生物与化学工程系，芜湖241000；3．皖南医学院微生物和免疫学教研室，芜湖241001)摘要：采用以麦角甾醇含量为指标间接测定固态发酵产物生物量的方法，对冬虫夏草

2、无性型一中国被毛孢的固态发酵条件进行了研究。正交试验结果表明固态发酵最佳培养基组成为：大米5g，玉米粉2g，蚕蛹粉1g，麸皮2g；单因素试验结果表明：'3-培养温度2Occ、料水比l：1．5、料层厚度2cm、无光照时对菌体生长较为有利。发酵条件优化后，菌丝体中麦角甾醇的含量可达0．5911mg／g，比优化前提高了38．6％。关键词：冬虫夏草；中国被毛孢；固态发酵；培养基配方中图分类号：Q939．93文献标识码：A文章编号：1008—9632(2009)o3—0022—04冬虫夏草Cordycepssine

3、nsis(Berk．)Sacc．是我国上，确定了生物量测定方法后，采用以麦角甾醇含量为传统名贵中药，与人参、鹿茸齐名，具有多种药理作指标间接测定同态发酵产物生物量的方法，研究了中用“。基于冬虫夏草的多种医疗作用，使得其需求国被毛孢同态发酵的培养基配方、培养条件，以求简化量逐年增加，野生资源难以满足市场需求，因此进行冬生产丁艺，提高产量，降低生产成本，并为固态发酵菌虫夏草的人工培养成为解决这一难题的重要途径之丝体相关产品的开发提供科学依据。一I材料和方法。人工发酵冬虫夏草的首要难关就是菌种问题，经数名研究者

4、通过多种方法证实中国被毛孢Hirsutella1．1材料sinensisX．J．Liu，GuoY．L．，Y．X．Yu&W．Zeng为1．1．1供试菌种冬虫夏草无性型中国被毛孢合格发表的冬虫夏草的无性型’。RCEF0273菌株南安徽农业大学微生物防治安徽省重中国被毛孢多采用液态深层发酵技术，但液点实验室提供。态发酵存在工艺复杂，T序繁多，容易污染，设备投资1．1．2主要仪器和试剂人工气候箱(LRH-250．大等缺点；而固态发酵采用的原料一般是廉价的农副GS)；电子天平(METTLERAE200)；麦角甾醇购

5、自美产品，设备也较液体发酵简单，同时同态发酵无废液排国Sigma公司；高效液相色谱仪(YOUNGLIN)。放，不存在污染环境的问题，既节省了排污设备的费1．2方法用，又提高了发酵产物的质量，生产成本大大低于液体1．2．1罐头瓶固态发酵固态发酵培养基原料与水发酵，并且固态发酵的后处理相对简单，菌丝体仅需干搅拌均匀后，121℃灭菌40min，降至室温后接种，放置燥粉碎即可，因此中国被毛孢固态发酵技术受到了人于培养箱中静置培养。至菌丝长透后，停止发酵。根们的重视和深入研究”。目前国内外有关冬虫夏据其它虫草无性型

6、菌株的经验配方，设置了10种中国草无性型菌株的周态发酵研究鲜有报道。被毛孢固态发酵的培养基配方，如表1所示。麦角甾醇是真菌细胞膜的成分，在细胞膜中的含1．2．2培养基配比的正交试验为综合确定培养基量较为稳定，而且它在代谢上也比较稳定，不受培养时中各成分的配比，在初筛试验配方的基础上，选取大间和培养基成分等因素的影响，可以作为生物量的一米、玉米粉、蚕蛹粉、麸皮4个因子，以菌丝体中麦角甾个间接指标进行测定’。本文在预备实验的基础醇的含量为指标进行培养基配比优化，应用DPS统计收稿日期：2008—06～26作者

7、简介：葛飞(1978一)，男，博士，i井师，主要从事应用微生物研究，E—mail：gerrylin@126．corn；通讯作者：樊美珍(1944一)，女，博士生导师，教授，主要从事虫生真菌及资源开发研究，E—mail：mzfan@ahau．edu．cn。基金项目：国家自然科学基金(30570004)；安徽工程科技学院引进人才科研启动基金(2007YQo05)22第26卷第3期生物学杂志V01．26No．32009年6月joURNALOFBIOLOGYJun，2009分析软件设计了正交试验表L。(3)，因素

8、水平见表2。皮起到疏松基质、增加培养基透气性的作用，从而有利表1不同固体培养基配方于菌体的生长。Table1DifferentsolidmediumcompositionofHirsutellasinensis表3不同培养基对中国被毛孢菌体生长的影晌Table3Effectsofdifferentsolidmediumsoncellgrowth基霹编号培养基成分(质量％)ofHirsutellasinensis1号50％蔗糖2