《吸光光度》PPT课件

《《吸光光度》PPT课件》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在教育资源-天天文库。

1、第10章吸光光度法吸光光度法：基于物质对光的选择性吸收的分析方法(1)比色法(2)可见分光光度法（visiblespectrophotometry）(3)紫外分光光度法（ultravioletspectrophotometry）(4)其他特点：(1)具有较高的灵敏度，适用于微量组分的测定。(2)通常所测试液的浓度下限达10-5~10-6mol·L-1。(3)吸光光度法测定的相对误差约为2%~5%。(4)测定迅速，仪器操作简单，价格便宜，应用广泛(5)几乎所有的无机物质和许多有机物质的微量成分都能用此法进行测

2、定。(6)还常用于化学平衡等的研究。10.1物质对光的选择性吸收和光吸收的基本定律10.1.1物质对光的选择性吸收1.光的性质:波粒二相性；2.物质的颜色:单色光—具有同一波长的光复合光—由不同波长组成的光物质的颜色—对不同波长的光具有选择性吸收的结果。互补色光—两种对应颜色(波长)的光按一定比例混合后可得白光。物质颜色与吸收光颜色的互补关系3.吸收光谱的产生:原子吸收光谱—原子外层电子选择性吸收电磁波而引起,为线状谱。分子吸收光谱—价电子跃迁产生的分子光谱，为带状谱。电子能级—紫外、可见光谱；包括若干振动

3、能级；1-20eV，200-750nm振动能级—红外光谱；包括若干转动能级；0.5-1eV,>750nm转动能级—红外光谱,<0.05eV,>750nm10.1.2光的吸收基本定律─朗伯-比耳（Larnbert-Beer）定律1.朗伯—比耳定律吸光度与液层厚度A∝b吸光度与物质浓度A∝cA∝cb·单位截面内吸光质点使光强度减弱光质点与浓度的关系式中A：吸光度；描述溶液对光的吸收程度；b：液层厚度(光程长度)，通常以cm为单位；c：溶液的摩尔浓度，单位mol·L-１；κ：摩尔吸收系数，单位L·mol-１·c

4、m-１；常用ε表示。或:A=lg(I0/It)=abcc：溶液的浓度，单位g·L-１a：吸收系数，单位L·g-１·cm-１a与κ的关系为：a=κ/M（M为摩尔质量）朗伯—比耳定律数学表达式朗伯-比耳定律成立的前提：(1)适用于所有的电磁辐射和所有的吸光物质（气体、固体、液体、原子、分子和离子）；(2)入射光平行单色且垂直照射；(3)吸光物质为均匀非散射体系；(4)吸光点之间无相互作用；(5)辐射与物质之间的作用仅限于光吸收过程，无荧光和化学现象发生透过度T:描述入射光透过溶液的程度T=I/I0吸光度A与透射

5、比T的关系:透射比T(1)吸光光度法的理论基础和定量测定的依据。(2)摩尔吸收系数ε在数值上等于浓度为1mol·L-1、液层厚度为1cm时该溶液在某一波长下的吸光度；(3)吸光度具有加和性。（1）吸收物质在一定波长和溶剂条件下的特征常数；（2）不随浓度c和光程长度b的改变而改变。在温度和波长等条件一定时，ε仅与吸收物质本身的性质有关，与待测物浓度无关；（3）同一吸收物质在不同波长下的ε值是不同的。在最大吸收波长λmax处的摩尔吸收系数κmax表明了该吸收物质最大限度的吸光能力，也反映了光度法测定该物质可能达

6、到的最大灵敏度。摩尔吸收系数ε的讨论（4）可作为定性鉴定的参数；（5）物质的吸光能力的度量εmax越大表明该物质的吸光能力越强，用光度法测定该物质的灵敏度越高。ε>105：超高灵敏；ε=(6～10）×104：高灵敏；ε=104～103：中等灵敏；ε<103：不灵敏。（6）ε在数值上等于浓度为1mol·L-1、液层厚度为1cm时该溶液在某一波长下的吸光度。摩尔吸收系数ε的讨论桑德尔灵敏S光度计的检测极限A=0.001，此时检测到的是该物质的最低浓度为Cmin。定义：单位截面积光程内所能检测出的吸光物质的最低含

7、量，即S=Cminb不同波长下的S不同，在最大波长λmax下的桑德尔灵敏度能反映测定某物质所能达到的最大灵敏度。根据朗伯-比尔定律：Cminb=A/ε=0.001/εS=Cminb=0.001/ε·M×10-3×106S=M/ε(ug/cm2)10.2分光光度计及吸收光谱光源单色器比色皿检测器显示装置10.2.1分光光度计1.光源在整个紫外光区或可见光谱区可以发射连续光谱，具有足够的辐射强度、较好的稳定性、较长的使用寿命。可见光区：钨灯作为光源，其辐射波长范围在320～2500nm。紫外区：氢、氘灯。发射1

8、85～400nm的连续光谱。2.单色器将光源发射的复合光分解成单色光并可从中选出一任意波长单色光的光学系统。①入射狭缝：光源的光由此进入单色器；②准光装置：透镜或返射镜使入射光成为平行光束；③色散元件：将复合光分解成单色光;棱镜或光栅3.样品室样品室放置各种类型的吸收池（比色皿）和相应的池架附件。吸收池主要有石英池和玻璃池两种。在紫外区须采用石英池，可见区一般用玻璃池。4.检测系统将光强度转换成电流来进行测量。光