动物胚胎移植技术及体外受精

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1、第四章动物胚胎工程技术及体外受精现代生物技术家畜育种领域繁殖生物技术分子生物技术人工受精技术胚胎工程技术超数排卵和胚胎移植胚胎性别鉴定体外受精胚胎分割克隆技术第一节胚胎工程技术胚胎移植胚胎融合胚胎分割胚胎的冷冻保存早期胚胎培养胚细胞核移植一、胚胎移植受精卵移植把一头雌性动物的早期胚胎从输卵管或子宫中冲洗出来，移植到另一头雌性动物的输卵管或子宫内，使之继续发育成新个体的技术。供体提供胚胎的动物受体接受和孕育胚胎的动物1.胚胎移植的生理学基础成年母畜卵巢上存在数千到上万个卵泡，在外源激素作用下，每个发情期的卵泡发育和排卵数可达数十个每个

2、发情周期生殖器官都有一个孕向发育早期胚胎处于游离状态胚胎发育不存在免疫问题胚胎发育到一定阶段会与子宫发生生理和组织联系胚胎的遗传性不受受体的影响2.胚胎移植的基本原则胚胎移植前后所处的环境的同一性供体和受体在分类学上的相同属性动物生理上的一致性：受体和供体在发情时间上的同期性动物解剖位置上的一致性：空间环境的一致性胚胎的发育期限：必须处于周期黄体期内胚胎的质量：胚胎必须是正常的，并在处理过程中不受不良因素的影响3、胚胎移植供受体的选择与管理供体的超数排卵处理和配种受体的同期发情处理胚胎回收胚胎检查胚胎移植1）供受体的选择与管理供体的选择

3、遗传价值：生产性能优秀的母畜健康状况:身体健康，营养水平中等以上的未孕动物繁殖性能：达到配种年龄以上繁殖机能正常的母畜受体的选择身体健康，身体状况中上的适繁未孕个体，无生殖道疾病和难产病史繁殖状况正常，有正常的发情周期母性良好：泌乳性能、护仔性能供、受的管理防疫、记录饲养管理等2）、超数排卵超排：以各种外源性促性腺激素诱发动物卵巢的许多卵泡发育并排出具有受精能力的卵子。孕母马促性腺激素、促卵泡素、前列腺素、促排卵类药物、孕激素超数排卵处理的时期应选择在发情周期的后期，即黄体消退时期。个体对超排处理的反应效果难以预测；产生不良的后果：胚胎

4、死亡卵母细胞蛋白质合成过程发生改变生殖道机能产生影响3）同期发情（synchronizationofeatrus）采用激素或类激素的药物处理，使这一群母畜在特定时间内集中发情和排卵。即将母畜的黄体期延长或缩短，使母畜摆脱内、外孕激素对卵巢的控制，在同一时间内引起全部母畜的卵泡发育，从而达到同期发情的目的。延长黄体期：孕激素控制卵泡的生长发育和发情表现缩短黄体期：前列腺素加速黄体退化，使卵巢提前摆脱体内孕激素的控制促进卵泡发育、排卵：促性腺激素4）胚胎回收利用冲胚液从供体的生殖道中冲洗出来，提供移植或其它胚胎工程用。手术法非手术法5）胚胎

5、检查胚胎早期发育胚胎质量评价：透明带的形态和完整性胚胎的发育与胚龄是否一致胚胎的形态与匀称性，胚内细胞大小的变化细胞质的结构及颜色，胚内是否出现空泡，细胞碎片，有无游离细胞如A级：为优良胚胎，形态典型，卵裂球轮廓清晰，紧密充实，大小均一，细胞质致密，色调和分布均一。胚胎的降温：使胚胎停止发育，延长其体外生存时间体外培养：将胚胎置于体温条件下，在培养液中，使其继续发育胚胎冷冻：通过一定的处理程序，将胚胎降温冷冻后，保存于液氮中6）胚胎的保存胚胎冷冻的原理胚胎冷冻实际是脱水的过程，冷冻保存的关键是设法减少细胞内冰晶对胚胎的损伤。冷冻过程中，

6、水分形成冰晶造成细胞机械损伤，同时，导致未结冰的细胞内溶液渗透压急剧升高，造成蛋白质变性，导致死胎。受精卵移植一般供体为良种或优良个体，而受体为生产性能较差的个体或品种。“借劣质动物之腹怀优秀个体之胎”5）、胚胎移植选择供体母牛受体母牛……同期发情处理……超数排卵供体公牛配种冲卵质量检查、培养胚胎移植妊娠检查分娩（胚胎移植的犊牛）胚胎移植的基本程序6)胚胎移植的应用范围在家畜改良方面的应用在特定品种扩繁上的应用在动物生物多样性上的应用其它方面应用：转基因动物、性别控制、体外受精在家畜改良方面的应用人工授精技术可成几十到几百倍地提高了优秀

7、种公畜的配种效能。但对优秀母畜来说，受其产仔数和世代间隔的限制，尤其是牛羊等繁殖力较低的畜种更是如此。通过超数排卵和胚胎移植技术（multipleovulationandembryotransfer:MOET)牛羊的生长性状年遗传进展可比正常繁殖提高80%和70%；产奶性状提高33%。在特定品种扩繁上的应用牛羊等低繁殖力家畜，从引进到形成一个纯种群体需要7-8个世代，15-20年。而采用MEOT法，一次就可获得一个纯种群体。80年代初，美、澳、新从欧洲引进的大型肉牛品种均采用胚胎移植技术扩繁。2000年前后，我国的波尔山羊也是采用胚胎移

8、植进行扩繁的。在动物生物多样性上的应用在保护动物遗传资源，提高家畜生产性能，挽救濒临灭绝的野生动物方面，胚胎移植技术越来越发挥出重要作用。冷冻能够很好地保存濒临灭绝动物的胚胎或生殖细胞，但该种动物雌性个体的