多杀菌素补料发酵工艺的研究

《多杀菌素补料发酵工艺的研究》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在行业资料-天天文库。

1、生物工程粮油食品科技第22卷2014年第3期多杀菌素补料发酵工艺的研究邹球龙，郭伟群，王超，胡翔，韩伟，张晓琳(国家粮食局科学研究院，北京100037)摘要:利用30L及50L发酵罐，通过控制pH和补料优化多杀菌素发酵工艺，提高多杀菌素的产量。采用优化后的补料发酵工艺，多杀菌素的发酵产量可达1050μg/mL，较对照575μg/mL提高82%。为多杀菌素的工业化生产提供了依据。关键词:刺糖多孢菌;多杀菌素;补料发酵工艺中图分类号:TQ920．6文献标识码:A文章编号:1007－7561(2014)03－0

2、086－03Studyonthefed－batchfermentationprocessofspinosadZOUQiu－long，GUOWei－qun，WANGChao，HUXiang，HANWei，ZHANGXiao－lin(AcademyofStateAdministrationofGrain，Beijing100037)Abstract:ThefermentationprocesswasoptimizedbycontrollingpHandfed－batchwiththe30Land50Lferm

3、entationtanksinordertoincreasetheproductionofspinosad．Theyieldofspinosadreachedto1050μg/mLbytheoptimizedmethod，whichincreased82%comparedwiththecontrolgroupof575μg/mL．Thisresearchprovidesthebasisfortheindustrialproductionofspinosad．Keywords:saccharopolyspo

4、raspinosa;spinosad;fed－batchfermentationprocess多杀菌素，又名刺糖菌素，是土壤放线菌刺糖多数分析仪，美国Nova公司;Waters515/2487型高效孢菌经有氧发酵产生的次级代谢产物，属大环内酯液相色谱仪，美国Waters公司。类化合物。可有效防治鳞翅目、双翅目、缨翅目、鞘1．2菌种与培养基［1－2］翅目及膜翅目等多种害虫。多杀菌素及其衍生1．2．1菌种物兼有生物农药的安全性和化学合成农药的速效刺糖多孢菌ASAGF73，本实验室保存。［7－8］性，因其具有低

5、毒、低残留、对人安全、对非靶标动物1．2．2培养基和环境安全、自然分解快等优点，曾先后于1999年、斜面及平板培养基(g/L):葡萄糖5．0，牛肉膏2008年、2010年三次获得美国“总统绿色化学品挑3．0，酪蛋白胨0．25，琼脂18．0。pH7．2。战奖(PresidentialGreenChemistryChallengeA-种子培养基(g/L):葡萄糖15．0，可溶性淀粉ward)”［3－4］。10．0，豆饼粉3．0，棉籽蛋白3．0，大豆蛋白胨25．0，我国对多杀菌素的研究还处于试验阶段，尚无MgS

6、O42．0。pH7．2。工业化生产的相关报道。现阶段多杀菌素的研究热发酵培养基(g/L):葡萄糖70．0，棉籽粉20．0，点主要集中在全合成和分子改造上［5－6］。国内多杀NaCl3．0，K2HPO4·3H2O0．2，FeSO4·7H2O0．05，菌素发酵水平较低，需进一步选育高产菌株，提高发CaCO31．0。大豆油3mL/L，pH7．0。酵工艺水平。本研究利用30L及50L发酵罐对经上述培养基12l℃灭菌30min，葡萄糖单独115℃灭菌25min。过多次诱变选育获得的多杀菌素高产菌株进行培养发酵罐培养

7、基同摇瓶，培养基121～124℃在位基配方改良和发酵工艺优化，研究补料发酵工艺，为灭菌30min。灭菌后pH在6．5～7．0之间。多杀菌素的工业化生产奠定基础。1材料与方法培养条件:接种量10%，培养温度29℃，摇瓶转速为240r/min，发酵罐通过搅拌将溶氧控制在1．1仪器设备40%以上。15L发酵罐，德国satorius集团;30L及50L发1．3实验方法酵罐，镇江东方生物工程设备有限公司;SBM/SS－1．3．1基础培养基优化本实验利用摇瓶在原发X摇床，瑞士Kuhner公司;NovaBioProfi

8、le300多参酵培养基的基础上添加0．3%～0．7%的酵母提取物收稿日期:2013－11－18基金项目:“十二五”国家科技支撑计划课题(2011BAD03B02－2);及0．4%～1．6%玉米浆干粉进行氮源优化。2013年“农业科技成果转化资金项目”(2013GB24490638)1．3．2补料发酵工艺优化作者简介:邹球龙，1984年出生，男，科研助理．通讯作者:张晓琳，1975年出生，女，研究员．1．3．2．1pH的优化流加