《色谱法概论》PPT课件

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1、色谱法概论课程内容一、色谱法概论二、经典液相色谱法（LC）三、气相色谱法（GC）四、高效液相色谱法（HPLC）五、毛细管电泳（CE）邮箱：jhq@sdjutcm.edu.cn密码：405405定义：色谱法是一种物理或物理化学分离分析方法。是一种分离技术。特点：适宜分离多组分的试样，效率高、应用广。原理：利用各物质（组分）在两相（固定相、流动相）中具有不同的分配系数，当两相作相对运动时，这些物质在两相中进行多次反复的分配来达到分离的目的。完成这种分离分析的仪器为色谱仪。K=Cs/Cm色谱法概论一、色谱法的起源和发展1906年，俄国植物学家茨维特首次提出色谱法。茨维特研究植物色素时

2、使用的色谱原型装置，如右图。在一根玻璃管底部塞上棉花，管内填入碳酸钙粉末，石油醚萃取液倒在碳酸钙上面，用石油醚冲洗。结果几种色素在管内展开形成5个色带。第一节色谱法的起源、历程及分类1931年库恩利用茨维特的色谱法分离了60多种胡萝卜素，；并从蛋黄只能够分离出叶黄素，从此吸附色谱法才迅速为各国所注意。1940年，Martin和Synge（英）提出液－液分配色谱法；1952年，James和Martin发表了从理论到实践比较完整的气液色谱方法因而获得了1952年的诺贝尔化学奖。1957年，Golay开创了毛细管柱气相色谱；20世纪60年代，高效液相色谱；20世纪80年代初，超临界流

3、体色谱；20世纪80年代末，毛细管电泳在分析化学领域，色谱法是一个相对年轻的分支学科。早期的色谱技术只是一种分离技术而已，与萃取、蒸馏等分离技术不同的是其分离效率高得多。当这种高效的分离技术与各种灵敏的检测技术结合在一起后，才使得色谱技术成为最重要的一种分析方法，几乎可以分析所有已知物质，在所有学科领域都得到了广泛的应用。色谱法起过关键作用的诺贝尔奖研究工作年代获奖学科获奖研究工作1937化学类胡萝卜素化学，维生素A和B1938化学类胡萝卜素化学1939化学聚甲烯和高萜烯化学1950生理学、医学性激素化学及其分离、肾皮素化学及其分离1951化学超铀元素的发现1955化学脑下腺激

4、素的研究和第一次合成聚肽激素1958化学胰岛素的结构1961化学光合作用时发生的化学反应的确认1970生理学、医学关于神经元触处迁移物质的研究1970化学糖核苷酸的发现及其在生物合成碳水化合物中的作用1972化学核糖核酸化学酶结构的研究1972生理学、医学抗体结构的研究方法项目数量1985年版1990年版1995年版2000年版2005年版2010版HPLC鉴别及含测78119169713272496TLC鉴别及含测未统计未统计未统计未统计15684075GC鉴别及含测未统计未统计未统计未统计4785色谱法在中国药典中的应用高效液相色谱的样品芬达橙汁汽水水甜味剂人工香精(香橙)

5、人工色素(柠檬黄)高效液相色谱-组分分离芬达样品色谱图水甜味剂人工香精(香橙)人工色素(柠檬黄)高效液相系统液体传输液体样品高效液相系统高效液相色谱柱数据处理检测器检测器硅胶填料液体医药样品结果高效液相色谱柱可更换卡套色谱柱Agilent1100高效液相系统溶剂以不同速率流出的组分色谱图高效液相系统和色谱柱气相-质谱系统色谱柱气相色谱系统检测器进样器色谱柱GAS气源柱温箱数据处理食品与香料分析实例食品中的天然香精香料人工香精香料饮料中的醇类010203040Time(min.)奶酪胆固醇pepperoni多肽蘑菇醛酸消化物样品:比萨色谱分析领域(1)生命科学奥运会医药工业FBI

6、法医，法检0123(minutes)气相色谱分析实例体液和组织中的药品血醇水平药品纯度色谱分析领域(2)石化DB-1,15mx0.25mmI.D.0.25µmfilmStegosaurus-o-gram航天汽油空气质量标准Pew!!分析实例燃料油定级汽车排放的废气色谱分析领域(3)环境DB-502.2105mx0.53mmI.D.,30µm气相分析实例水和土壤中的农残饮用水中的溶解物(MTBE甲基叔丁基醚)工业污染物新型持久性有机污染物（PCBs多氯联苯,PFCs全氟有机物）色谱分析领域(4)NamLaketinTibat纳木错湖PFCsLiver180~680ng/gBloo

7、d26~52ng/gPlasma2580ng/mlPFCs二、色谱法的几个重要术语*1.色谱柱（column）在茨威特实验中,装有CaCO3的玻璃管,即是一根色谱柱(是指包括CaCO3的管).2.固定相(stationaryphase)在柱内固定不动的一相称固定相,如CaCO3.3.流动相(mobilephase)在柱内不断流动的一相,称流动相,如石油醚.4.被分离组分（样品）如色素5.洗脱将流动相连续不断地加入色谱柱,使之通过固定相,把被分离的物质冲洗出柱的过程,叫洗脱。洗脱是色谱过程中必