动物组织培养细胞培养的基本条

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1、细胞培养的基本条件无菌条件：净化工作室，风淋室，传递窗，高效过滤器，洁净层流罩，生物安全柜，超净工作台，紫外灯，电热干燥箱，滤器，高压灭菌器，抗生素细胞生长条件：纯水蒸馏器，纯水仪，培养板，培养瓶，CO2培养箱，培养基，血清细胞检测条件：倒置显微镜，酶标仪，微孔板震荡器，高速离心机，移液器细胞保存条件：液氮罐实验室安全：生物实验室安全，P1,P2,P3实验室安全净化工作室------我国药品生产洁净室（区）空气洁净度标准-------洁净度级别尘粒最大允许数/立方米尘粒最大允许数≥0.5um≥5um浮游菌/立方沉降菌/皿1003,5

2、0005110,000350,0002,0001003100,0003,500,00020,00050010300,00010,500,00060,000NA15风淋室:风淋室是生物洁净室的理想配套设备，它不仅可以清除人体和物品表面附着的尘埃，减少带入洁净室的灰尘量，而且兼有气闸室的功能，可防止非洁净空气的侵入。风淋室的板壁采用轻质隔热夹芯钢板，吹淋板采用进口不锈钢制作，吹淋口方向可调，风淋时间可在30-99秒间的调整。风淋室可以配合加热器，冬天可以加热，温度可调，一般控制温度在30-35℃较为适宜。传递窗:该装置是一种洁净室的辅助

3、设备，主要用于洁净区与洁净区，洁净区与非洁净区之间小件物品的传递，以减少洁净室的开门次数，把对洁净区的污染降低到最低程度。PB系列传递窗按用途分为标准型和生物洁净型两种。（后者带空气自净装置）按门互锁形式分为机械互锁和电子互锁两种外壳按材料分为彩钢板型、薄钢板喷塑型和全不锈钢型三种通用型尺寸如下表所列，特殊规格按用户要求制作。高效过滤器:高效过滤器是用超细玻璃纤维纸作滤料，胶板纸作分隔板，可与铝合金框、木框及镀锌钢板框组合而成。特点：具有低阻高效、轻质、容尘量大等特点，层高的要求，缩小净化设备静压箱体积等优点。适用于常温常压常湿条件

4、下环境空气的净化，尤其适用于需要高效空气过滤器覆盖率高的净化厂房。洁净层流罩:技术性能参数：(1)净化等级：100级(美国联邦标准209E)     (2)平均风速：0.25～0.45m/s(可调)  (3)噪音：≤62dB(A)  (4)电源：220V/50HZ层流罩是可提供局部高洁净环境的空气净化设备。它主要由箱体、风机。初效空气过滤器、高效空气过滤器、阻尼层、灯具等组成，外壳为不锈钢或彩钢板。该产品既可悬挂，又可地面支撑，结构紧凑，使用方便。可以单个使用，也可多个联接组成带状洁净区域，形成洁净隧道。洁净层流罩是将空气经风

5、机以一定的风压通过高效空气过滤器后，由阻尼层均压，使洁净空气呈垂直层流型气流送入工作区，从而保证了工作区内达到工艺所需的高洁净度。超净工作台超净工作台的工作原理是利用鼓风机驱动空气遁过高效滤器除去空气中的尘埃颗粒，使空气得到净化。净化空气徐徐通过工作台面，使工作台内构成无菌环境。II级A型生物安全柜:一种既能使操作造成无菌、无尘的局部空气环境，保证检验、检测不受污染，又能保证被研究的对象（如病菌、细菌等）不外溢，保护周围环境及操作人员的安全隔离设备。　　该设备可广泛应用于低、中等危险度（病原体1--3，DNA重组P1--P3）的临

6、床细菌学，病毒学、微生物学、组织培养、生物学及生命科学的研究，加工、检验部门。紫外灯：紫外线消毒。主要用于培养室空气、操作台、塑料培养　　　　　　皿和培养板等表面消毒电热干燥箱：干热消毒（160℃，2小时）。主要用干玻璃器皿消毒滤器Zeiss滤器：过滤除菌：大多数培养用液，如人工合成培养基、血清、酶液等均采用滤过法除菌大容量高压灭菌器全自动手提式灭菌器自动双重纯水蒸馏器纯水仪培养板培养瓶常用玻璃器皿清洗浸泡（自来水）、刷洗（洗衣粉）、酸泡（24小时）、流水冲洗、蒸溜水浸泡和冲洗、50℃烘干清洁液的配制CO2培养箱CO2培养箱设定的条

7、件为37℃，5％CO2。使用CO2培养箱培养细胞时应注意的问题：①用螺旋口瓶培养细胞时，需将瓶盖微松，以保证通气。②保持培养箱内空气干净。定期消毒（90℃，14h)。③箱内灭菌蒸馏水3000毫升蒸馏水槽中以保持箱内湿度，避免培养液蒸发。移液器顯微鏡酶标仪微孔板震荡器高速离心机液氮罐实验室安全层流净化细胞培养室管理规则一级生物安全防护实验室二级生物安全防护实验室三级生物安全防护实验室四级生物安全防护实验室层流净化细胞培养室管理规则我院层流净化细胞培养室设计标准为万级，专供细胞培养、冻存以及细胞治疗用。层流净化细胞培养室的总体要求：经济

8、、有序、高效、安全。初步制定相关制度如下：1、准入制度：1）必须取得实验室相关实验技能考试合格方可进入层流净化室；2）在本室工作的实验人员应严格遵守本室工作守则，外来人员在进入净化室工作之前，必须接受培训；3）没有经过培训的人员不得单