细胞培养的设施与基本条

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1、1.1细胞工程实验室的设置1.2常用仪器与设备1.3实验室的生物安全（自学）第一章细胞培养的设施与基本条件预防培养细胞受到污染是细胞培养成功与否的关键为什么？生物体内的细胞可以通过机体的代谢、调节和保护等机制而使其营养、环境、生长条件、抵抗有害因子能力等方面处于最佳状况。而体外培养的细胞由于失去了对整体的依赖性，对实验室细胞培养的设施条件和人员素质提出了较高的要求。为了最大限度的创造既适合于细胞生长又可防治污染的环境，在培养过程中对细胞培养的设施、操作规程和检测方法等制定了严格的规范要求。细胞工程实验室与其他一般实验室的主要区别在于，要求

2、保持严格无菌环境，避免微生物及其他有害因子的影响。一般来讲，它应能进行六方面的工作：无菌操作、培养、制备、清洗、消毒灭菌处理和储藏。一般来讲，它应能进行六方面的工作：无菌操作、培养、制备、清洗、消毒灭菌处理和储藏。各区最好分别设置于相连的各个房间，特别是无菌操作室最好能单独设置。如安排在一大实验室内，则无菌操作区与清洗、消毒灭菌区应分别位于两端，而培养、制备和储藏区位于此两区之间。动物细胞工程实验室的设置1.1细胞工程实验室的设置有其特殊的设置，如具有光照条件的培养室，试管苗培育所需的温室和移植驯化室等。植物细胞工程实验室的设置基本实验室

3、1.1清洗间根据工作量的大小决定其大小，一般面积控制在30~50m2。在实验室的一侧设置专用的洗涤水槽，用来清洗玻璃器皿、用具和培养材料等。中央实验台还应配置2个水槽，用于清洗小型玻璃器皿。如果工作量大，可以购置一台洗瓶机。准备1~2个洗液缸，专门用于洗涤对洁净度要求很高的玻璃器皿。还应配置落水架、干燥箱、超声波清洗器、纯水制备等。地面应耐湿并排水良好。超声波清洗机电热干燥箱纯水仪洗瓶机主要用于有关培养用液体、培养基母液和培养基的配制等。面积60m2左右，配备的主要仪器设备有：冰箱、实验台、药品柜、器械柜、天平、微波炉、pH计、玻璃棒、烧

4、杯、磁力搅拌器、培养基分装器、抽气泵、电炉、各种规格的培养瓶、培养皿、移液管（器）、烧杯、量筒、容量瓶、储藏瓶等。冰箱以体积180~200L为宜，用于储存培养基母液、激素、维生素等贵重药品、彩色胶卷及保存植物材料。天平应有不同感量。1.2制备室pH计天平移液器用于培养细胞所用器械、培养基的消毒与灭菌。配备实验台、高压灭菌锅、排风灭火设备、细菌过滤设备、干燥箱、消毒柜、电炉等。灭菌锅的选择应根据不同的要求选择不同型号的灭菌锅。一般实验室可选用小型的医用手提式高压灭菌锅，较大的实验室可选用立式自动控制压力和温度的灭菌锅。生产性的实验室可选用

5、大型的卧式灭菌锅。如果没有条件的话，可以将上述工作间合并成一个准备间，要求设备的安装和排列要合理、房间要宽敞、明亮、透风，地面要便于清洁、防滑。1.3消毒间无菌操作室主要用于实验材料的接种操作，所以又叫接种室。通常由里外两间组成，外间是缓冲间，用于准备工作，还有防止污染的作用。缓冲间的门应该与接种室的门错开，两个门也不要同时开启，以保证无菌室不因开门和人的进出带进杂菌。缓冲间内应该设有水槽、实验台、鞋帽架、柜子、紫外灯。无菌操作室的内壁应当用塑钢板或瓷砖装修，工作人员进入操作间前要穿上消过毒的工作服和拖鞋。室内应配有超净工作台、紫外灯

6、、酒精灯、解剖镜、各种接种器械等。1.4无菌操作室超净工作台离心机为了控制培养室的温度和光照，培养室的房间不要窗户，但应当留一个通气窗，并安上排气扇。天花板和内墙最好用塑料钢板装修，地面用水磨石或瓷砖铺设，一般要分两间，一为光照培养室，一为暗培养室。培养室外应有一预备间或走廊。室内温度由空调控制，光照时间及其强度由日光灯和自动定时开关控制。培养室应配有若干培养架，上面固定日光灯、转床、摇床、光照培养箱、生化培养箱、自动控时器等。1.5培养室2、辅助实验室2.1鉴定室细胞学鉴定室其功能是对培养材料进行细胞学鉴定和研究。要求清洁、明亮、干燥

7、，使各种光学仪器不受潮湿和灰尘污染。应配置各种显微镜、照相系统等生化分析室在以培养细胞产物为主要目的实验室中，应建立相应的生化分析实验室，以便于对培养物的有效成分随时进行取样检查。离心机、酶联免疫检测仪、天平、PCR仪等PCR酶标仪显微镜为试管苗提供满足生长的适宜环境条件。2.2温室1.2常用仪器与设备基本设备：水纯化装置、冰箱、天平、酸度计、电炉、培养基分装器、搅拌器、离心机及离心管、移液器（管）、吸管等。灭菌设备：蒸汽压力灭菌锅、电热干燥箱、过滤除菌装置、喷雾消毒器、紫外灯。无菌操作设备：超净工作台光温控制设备：时间程序控制器、空调及

8、温度感应器。细胞培养设备：培养设备根据需要而定，包括培养架、培养箱、摇床、生物反应器等。细胞学鉴定设备：光学显微镜、实体显微镜、倒置显微镜等。除上述基本设备外，如果有条件和需要还可配制摄影设备