淋巴管内皮细胞培养技术的改进

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1、第41卷第2期Vol.41，No.2青岛大学医学院学报2005年6月ACTAACADEMIAEMEDICINAEQINGDAOUNIVERSITATISJune2005淋巴管内皮细胞培养技术的改进谢方民’，程园园2，邵旭建‘(1青岛大学医学院人体解剖学教研室，山东青岛266021;2泰安市中心医院肿瘤内科)〔摘要〕①目的改进淋巴管内皮细胞的培养方法，为该方面的基础和临床研究提供良好的平台。②方法本研究采用的研究方法包括细胞培养、免疫组织化学、光镜观察、透射电镜观察、扫描电镜观察等。③结采猪胸导管内皮细胞具有一般淋巴

2、管内皮细胞的特征。在所培养的细胞中，经第珊因子鉴定的内皮细胞约占950o。在细胞消化过程中，一次消化法比传统的方法更为简便。明胶喷涂培养皿更有利于细胞生长。综合法纯化淋巴管内皮细胞可获得较纯的内皮细胞。④结论猪胸导管是淋巴管内皮细胞培养的较理想来源;在细胞培养过程中，采用一次消化法、明胶喷涂培养皿、综合法纯化培养淋巴管内皮细胞可得到更好的效果。〔关扭词〕淋巴管内皮细胞;细胞培养;胸导管[中图分类号]R322.2+8[文献标识码〕A[文章编号j1672-4488(2005)02-0154-04IMPROVEMENTO

3、FCULTURETECHNIQUEOFLYMPHATICENDOTHELIALCELLSXIEFang一二in,CHENGYuan-yuan，SHAOXu一ian(DepartmentofAnatomy,QingdaoUniversityMedicalCollege,Qingdao266021,China)[ABSTRACT]O6jectiveimprovetheculturemethodoflymphaticendothelialcells,andprovideaplatformforthebasicandcli

4、nicalresearchinthisfield.MethodsCellculture,immunohistochemistry,LM,transmissionandscanningelectronmi-croscopywereapplied.ResultsLymphaticendothelialcellsofpigthoracicductpossessedgeneralmorphologicalcharacteristicsofnormallymphaticendothelialcells.Amongthecul

5、turedcells,95%cellsweretheendothelialcellsidentifiedby祖.Thesingledi-gestivemethodforthecellculturewasbetterthanthetraditionalone.Paintingtheculturedisheswithgelatinwasgoodforcellgrowth.Theidealeffectcouldbeobtainedbyusingthecomprehensivemethodtopurifythecultur

6、edlymphaticendothelialcells.ConclusionThepigisanidealsourceoflymphaticendothelialcells.Thesingledigestivemethod,paintingoftheculturedisheswithgelatin,andthecomprehensivemethodtopurifytheculturedlymphaticendothelialcellscangreatlyimprovethetraditionalmethodofce

7、llculture.[KEYWORDS]lymphaticendothelialcell;cellculture;thoracicduct淋巴管不但具有重要的生理功能，如转运组织的探索之后，成功地利用猪的胸导管进行了淋巴管液和脂肪，清除进人机体的异物、细菌及病毒等，而内皮细胞的培养。下面就猪胸导管内皮细胞的培养且具有重要的临床意义，因此对淋巴管进行研究具方法报告如下。有重要的意义。长期以来，人们对淋巴管的形态学1材料和方法研究主要集中在大体解剖水平和组织学水平上。近年来，随着分子生物学和细胞培养技术的飞速发展，1.

8、1材料来源人们对淋巴管的研究也逐渐深人到分子水平，开始猪取自当地屠宰场，雌雄均可，体质量约100-意识到淋巴管内皮细胞离体培养的重要性。1984150kg。淋巴管内皮细胞取自猪的胸导管。年Johnston等[1〕首次将细胞培养技术应用于淋巴1.2实验试剂管内皮细胞的培养上，利用牛的肠系膜淋巴管成功胶原酶(Type工/A)购自Sigma公司;胰蛋白地培养出了淋