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《抗凝剂edta二钠对家禽血液指标及基因组dna的影响》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在行业资料-天天文库。
1、生物技术通讯378LETTERSINBIOTECHNOLOGYVol.24No.3May,2013doi:10.3969/j.issn.1009-0002.2013.03.019研究报告抗凝剂EDTA-Na2对家禽血液指标及基因组DNA的影响aaba齐玉凯，孙钰，刘丽英，李显耀山东农业大学a.动物科技学院；b.生命科学学院；山东泰安271018［摘要］目的：分析不同浓度的抗凝剂EDTA-Na2对家禽血液指标及基因组DNA抽提的影响。方法：采集鸡血，分别加入0.6（A组）、0.9（B组）、1.2（C组）、1.5（D组）、1.8（E
2、组）和2.1（F组）mg/mL的EDTA-Na2，立即检测白细胞总数（WBC）、淋巴细胞（LYM）、中间细胞（MID）、粒细胞（GRAN）、红细胞总数（RBC）、血红蛋白（HGB）、血红蛋白含量（MCH）和血小板总数（PLT），用SPSS软件分析检测数据；用酚-氯仿法提取添加不同量抗凝剂的血液基因组DNA，并进行PCR扩增，基因组DNA和PCR产物用琼脂糖凝胶电泳检测。结果：A组样品出现肉眼可见的凝块，B组有2/7样品有凝集现象，C、D、E和F组均无凝集现象。A组凝集现象严重无法进行血液指标测定，其余5组样品中，对于RBC和HG
3、B指标，C组与B组相比无显著性差异，与D、E、F组差异极显著（P<0.01）；对于PLT，C组与B组相比无显著性差异，与D、E、F组差异显著（P<0.05）；WBC无显著变化。除A组外，各组均能获得质量较好的基因组DNA，并能扩增出目的条带。结论：除A组外，不同浓度的EDTA-Na2对基因组DNA提取和PCR扩增无影响。以EDTA-Na2作为禽血抗凝剂时，建议用量应不低于1.2mg/mL。［关键词］EDTA-Na2；抗凝剂；血液指标；基因组DNA；PCR扩增［中图分类号］Q78;Q46［文献标识码］A［文章编号］1009-000
4、2（2013）03-0378-04EffectsofEDTA-Na2onPoultryBloodIndexesandGenomicDNAaabaQIYu-Kai,SUNYu,LIULi-Ying,LIXian-Yao*a.CollegeofAnimalScienceandTechnology;b.CollegeofLifeScience;ShandongAgriculturalUniversity,Tai'an271018;China*Correspondingauthor,E-mail:xyli@sdau.edu.cn［Abs
5、tract］Objective:ToanalyzetheeffectofdifferentconcentrationsofEDTA-Na2onthepoultrybloodindexesandgenomicDNAextraction.Methods:Onemilliliterbloodwerecollectedfromchickenwingvein,0.6（A）,0.9（B）,1.2（C）,1.5（D）,1.8（E）and2.1（F）mg/mLEDTA-Na2anticoagulantswereaddedtoeachgroup,
6、respective⁃ly.Eachgroupconsistedof7samples.WBC,LYM,MID,GRAN,RBC,HGB,MCHandPLTweremeasuredforeachsample.ThedatawereanalyzedusingSPSS.GenomicDNAwasextractedwithphenol-chloroformmethodfromeachsampleandusedforPCRtoamplifyβ-actin.DNAandPCRproductswereanalyzedbyagarosegele
7、lectrophoresis.Results:AllsamplesingroupAappearclots,2/7ofgroupBsamplesappearclots,andthere⁃mainingfourgroupsdidnotappearclots.Wecouldn'ttestbloodindexesofgroupAbecauseofagglutinatephe⁃nomenon.TheRBCandHGBdidnotdifferbetweengroupCandgroupB,butthereweresignificantdiff
8、erences（P<0.01）whencomparedwithgroupD,E,F.ThePLThadthesametrend（P<0.05）astheRBCandHGB.Therewerenosignificantdifferencesamongallgrou
