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《《动物寄生虫病学》许金俊-动物寄生虫标本的采集、保存和制作》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在工程资料-天天文库。
1、动物寄生虫标本的采集、保存和制作一、吸虫的采集、固定与制片1、采集吸虫宜用弯头针、弯头银、毛笔挑取，小型的或以吸管吸取，不可以银子夹取，以免损伤虫体，影响观察。体表附着的污物应该放在生理盐水屮以毛笔轻轻刷去，或密闭容器开口充分振荡，除去污物。吸虫的肠内容物过多时，可在生理盐水内放置过夜，待英食物消化或排出。这种洗净而尚未尚定的虫体是半透明的，应先镜检观察。2、固定在制作染色封片标本Z前，须先把虫体压薄，I古I定。较小的虫体应先在薄荷脑溶液(薄荷脑24g,溶解于10ml95%酒精中,使用前滴一滴于100ml水中)中使虫体松弛。常
2、用的固定方法有如下几种。(1)劳氏摇动法I古I定适用于小型吸虫。将小型吸虫放入盛满生理盐水的试管中，摇动3min,使虫体下沉，倒去一半盐水，加入等量饱和升汞醋酸液，再摇lmin,移入纯饱和升汞液屮15〜30min,再移入75%含碘酒精液屮，至不褪色，然后放入70%酒楷液屮长期保存。(2)饱和升汞醋酸溶液固定法将放在生理盐水屮伸张好的吸虫，放入加温至60〜70°C的饱和升汞醋酸溶液(饱和升汞98ml,加冰醋酸2ml)中，固定后将虫体移入50%酒精中,洗去升汞液。然后再移入75%酒精碘溶液屮。2〜3h后，再换到70爲酒椿屮长期保存
3、。(3)福尔马林固定法将洗净、伸张好的吸虫放于两玻璃片Z间，稍加压力压平，玻片两端用胶皮圈缚住，不可过紧，以免压坏虫体。放入10%福尔马林液中3〜7天，然后移入3%福尔马林液中长期保存。小型虫体可不通过10%福尔马林液.f［接放入3%的福尔马林液屮。固定时候标本应用铅笔书写的标签标明标本的详细资料如编号、采集地点、宿主、、寄生部位等等，一式两份，分别置于瓶内外。3、制片吸虫标本的形态观察，常需制成整体染色装片标本或切片标本。切片标本制作过程同组织切片的制备，整体装片标本的制法如以下两种。(1)徳氏苏木素染色法取保存于70%酒精
4、内的虫体逐步通过50%.30%酒清液各0.5h。置蒸锚水内0.5h。放入徳氏苏木素染液内2〜24h。用蒸镯水换洗后依次移入30%.50%.70%酒精屮各0.5h。用含2%盐酸、70%酒精液褪色至全部构造消晰。用70%酒梢换洗两次,如加碱性溶液于酒梢屮,标本呈蓝色。依次移入89%、90%.100%酒椿屮各0.5h«再移入冬青汕与纯酒精各半的'混合液内0.5h。然后移入冬青汕或木锚汕中透明。透明后用阿拉们树胶封片。(2)硼砂洋红染色法将保存于福尔马林中的虫体先用蒸锚水冲洗数次，依次移入30%.50%.70%酒精屮各0.5〜lh。将
5、虫体移入硼砂洋红染液屮30min至数小时(视虫体大小而定)。移入含2%盐酸的70%酒精液屮褪色适宜为止。再依次移入80%.90%>100%酒精屮脱水1〜2h。置于纯酒椿与冬青汕各半混合液中0.5〜lh。然后移入冬青油中透明、封片。徳氏苏木素染液配制：苏木素山溶于10ml纯酒精屮，然后加入100ml饱和氨明矶液，放于日光下14〜28天，再加入25mltf汕、25ml甲醇，置3〜4天后过滤即成。使用时用蒸馆水冲淡10〜15倍。硼砂洋红染液配制：4%硼砂水溶液100ml,加入洋红lgo煮沸熔化，再加70%酒精100ml,24h后过滤
6、即成。二、绦虫的采集、固定与制片1、采集绦虫的挑取和洗净方法同吸虫，但由于头节易断离，动作宜轻。如果绦虫头节附着在肠壁上很牢,应将附冇绦虫的肠段连同虫体一起剪卞，浸入生理盐水屮数小时，头节会门行脱离肠壁。2、固定绦虫肌肉发达，伸缩力强。节片还要压薄后固定。大型绦虫一般只切取头节、若干成熟节片和孕节制成封片标木。若准备作瓶装陈列标木，则应预先将虫体绕在一玻璃瓶上，再连瓶浸入盛冇固定液的更大的瓶内固定之。在固定前应放于两玻片间夹平，压紧投入劳氏液或波氏液，也可用70%热洒精或10%〜50%福尔马林液固定。幼虫固定前用手将头节挤出或
7、在活体时用消化液孵出，洗净，压平后固定24h,然后依次移入30%、50%、70%酒精中，最后放于新的70%酒精中保存。3、制片固定、保存好的标木可用徳氏苏木素染液或明矶洋红染液中染色。染色、脱水、透明、封片等方法与吸虫相同。洋红染液配制：洋红4g,盐酸2ml,水15ml,85%酒精95ml。先将洋红溶解在盐酸与水中，煮沸后加85%酒精95ml,加热片刻,滴入按液数滴中和盐酸,过滤即成。明矶洋红染液配制:2.5%氨明矶水溶液100ml,加洋红lg,煮沸20min,冷却后过滤即成。三、线虫的采集、固定与制片1、采集线虫成虫多寄生于
8、消化道、呼吸道、体腔及循坏系统，幼虫多见于肌肉或各器官系统组织中。采集时用小银子或解剖针挑取，帅部的线虫和丝虫目的线虫易破裂，应略加洗净后立即放入固定液中固定。2、固定线虫的固定可用70%酒精或3%〜5%福尔马林生理盐水，或10ml福尔马林、lOnil冰醋酸和80ml生理盐水
