11《遗传学》实验指导

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1、实验一果蝇生活史及其外部形态观察一、实验1=1的1、掌握雌雄果蝇的外部形态区别。2、了解果蝇生活史及其培养方法。二、实验材料19#：野生型（红眼、长翅、直刚毛）6#：三隐性纯合体（白眼、小翅、焦刚毛）W：（白眼））黑檀体：唾腺染色体观察材料三、实验仪器、药品放大镜、双冃解剖镜、蹑子、白瓷盘、毛笔、乙瞇等四、实验步骤1、于培养瓶中，肉眼观察果蝇成虫、幼虫及蛹的形态。2、用乙瞇麻醉成虫后，置于双目解剖镜下观察（翅膀、眼色、刚毛、体色、平衡棒）。3、在解剖镜下，识別雌雄成虫。4、肉眼识别雌雄成虫。5、肉眼区分死、活成虫。6、了解果蝇培养基的配制方法及其转管步骤。7、列表描述果蝇雌雄成虫的区别

2、性状雌蝇雄蝇体型腹端腹背黑色环纹腹片数性梳Female9Male/附录一果蝇的饲养果蝇具有生活史短、繁殖率高、饲养简便等特点，是研究遗传学的好材料，尤其在基因分离、连锁、交换等方面，对果蝇的研究更是广泛而充分。一、果蝇的生活史果蝇属于昆虫纲，双翅目，与家蝇是不同的种。它的生活史包括卵f幼虫f蛹f成虫。果蝇的生活周期长短与温度关系很密切，30°C以上的温度能使果蝇不育和死亡，低温则使它生活周期延长，同时生活力也减低，果蝇培养的最适温度20-25°Co101520°C25£卵f幼虫幼虫f成虫5T天18天8天6.3天5天4.2天从表中可以看!l!25°C时，从卵到成虫约10天；在25°C时成

3、虫约活15天。果蝇一般是培养在恒温箱内，盛夏时，要注意降温。果蝇有雌雄之分，幼虫期区别较难，成虫区别容易（图1）。雄性的腹部环纹5节，末端钝而圆，颜色深。第一对脚的附节前端表而有黑色鬃毛流苏，称性梳（sexcombs）。雌性腹部环纹7节，末端尖，颜色浅，附节前端无黑色鬃毛流苏（图2）。二、果蝇的繁育果蝇在水果摊或果园里常可见到，但它并不是以水果为生，而是食生长在水果上的酵母菌，因此实验室内凡能发酵的基质，均可作为果蝇饲料。H前果蝇饲料较好的配方如下：A：糖6.2克，加琼脂0.62克，再加水38毫升，煮沸溶解。B：玉米粉8.25克，加水38毫升，加热搅拌均匀后，再加0.7克酵母粉。A和B

4、混合加热成糊状后，加0.5毫升丙酸，即可分装到培养瓶中。培养果蝇的饲养瓶，常用的有牛奶瓶，人中型指管，用纱布包裹的棉花球作瓶寒（有条件的地方可改用泡沫塑料作瓶塞）。饲养瓶先消毒，然后倒入饲料（2厘米厚），待冷却后，用酒精棉擦瓶壁，然后滴入酵母菌液数滴，再插入消毒过的吸水纸，作为幼虫化蛹时的干燥场所。三、果蝇处理对果蝇进行检查时，可用乙瞇麻醉，使它保持静止状态。因杲蝇对乙瞇很敏感，易麻醉，麻醉的深度看实验要求而定（作种蝇以轻度麻醉为宜，做观察可深度麻醉，致死也无妨。杲蝇翅膀外展45°C角表示已死亡）。麻醉后的果蝇放在门瓷板上检查，完毕后倒入煤汕或酒精瓶中（死蝇盛留器）。四、原种培养在作为

5、新的留种培养时，事先检查一下果蝇有没有混杂，以防原种丢失。亲本的数目一般每瓶5・10对，移入新培养瓶时，须将瓶横卧，然后将果蝇挑入，待果蝇清醒过来后，再把培养瓶竖起，以防果蝇粘在培养基上。原种每24周换一次培养基（按温度而定），每一原种培养至少保留两套。培养瓶上标签要写明名称，培养日期等，作为原种培养，可控制到10・15°C，培养时避免日光直射。五、实验交配果蝇雌体生殖器官有受精囊，可保留交配所得的人量精子，能使人量的卵受精，因此在做品系间杂交时，雌体必须选用处女蝇。雌蝇孵出后几小时内不会交配，所以把老果蝇除去后，几小时内所收集到的雌体必为处女蝇。由于雌蝇两天内不产卵，所以雄蝇可直接放

6、到处女蝇培养瓶屮（也可以放在盛有食物的小瓶屮暂养两天，直到雌蝇将要产卵时放回培养瓶屮）。贴好标签，写好交配口期，当子蝇即将孵化出来以前，也就是说23°C培养7・9天，倒出亲本，以免和亲代混淆。另一方面应该注意，杂交的F1代的计数安全期是自培养开始的20天内（因为再晚些时，F2也可能有了）。实验二果蝇唾腺染色体的制片观察一、实验目的1.练习取出呆蝇幼虫唾腺的技术和制作唾腺染色体标本的方法。2.观察多线染色体的特征：a・巨大；b.体细胞配对，所以染色体只有半数(n)；c.横纹有深浅、疏密的不同，。二、实验原理果蝇唾腺染色体巨大，大约有1000-4000根染色体丝的拷贝，又称多线染色体。经染

7、色后，出现深浅不同、密疏各别的横纹，具数1=1和位置代表果蝇的特征。三、实验材料黑腹果蝇的三龄幼虫。四、实验仪器、药品双筒解剖镜、显微镜、银子、解剖针、载玻片、盖玻片、滤纸，1%醋酸洋红、生理盐水、1NHC1五、实验步骤1.取三龄幼虫放在载玻片上，加一滴生理盐水。2•取出唾腺细胞,加］滴INHC15分钟(消解脂肪)。3.加醋酸洋红1滴，染色10分钟。4.盖上盖玻片，在垂直方向压片后观察。5.画出显微镜卜•的果蝇唾腺染色体图形。附:1%的醋酸洋红