紫苏无菌苗培养条件的研究

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1、紫苏无菌苗培养条件的研究袁月,梁彦龙,周文龙,王量,黄漁海,郝宏运(吉林大学牛物与农业工程学院牛物工程系,长春130025)摘要:木实验对紫苏种子在MS固体培养基中萌发为无菌苗的条件和方法方法进行了研究,为进一步利用紫苏无菌苗做试验材料览定基础。得到的结果表明,LOg/L升汞消毒5min,消毒Z后使用无菌水冲洗3-4次,培养基屮染菌率较低,发芽率较高,属于比较理想的条件,H最适培养温度为26°C。木试验采用在无菌环境下直接将消毒种子接入MS培养基中置于培养箱中以获得无菌茁的方法。关键词:紫苏;无菌苗;消賂培养中图分类号:S

2、351.2DiscussiononAsepticCultureConditionsofPerillafrutescensYuanyue,LiangYanlong,Zhouwenlong,Wangliang,Huangyuhai,Haohongyun(CollegeofbiologicalandagriculturalengineeringofJilinUniversity,Chernyclum130025)Abstract:Inthepresentwork,theoptimalconditionsforculturings

3、terileseedlingsofPerillafrutescensonsolidMSmediumwerestudiedtolayfoundationforfurtherresearchesutilizingP・frutescensseedlingasmaterial.Theresultsshowedthattheoptimalsterilizationconditionwassterilizingwith1.0g/Lmercuricchloridefollowedbywashing3-4timeswithsterilew

4、ater.Theidealculturetemperaturewas26°C・Undertheseconditions,thegerminationratewashighandcontaminationratewaslowinthissludy.Keywords:Perillafrutescens;asertic;sterilize;culture0引言紫苏(Perillafrutescens),是唇形科紫苏属下唯一种,属于一年生草本植物,紫苏是一种古老而又广泛的食材,也是一种屮药材,每个部位都具冇重要的价值。因紫苏具冇重

5、要的经济学价值与研究价值,所以对其无菌苗的培养以及培养条件的优化是特别重要的是有效开展工作的前提和基础。对于紫苏无菌苗的培养,在初期,种子的灭菌方式是至关重要的,灭菌的程度和方式的不同会影响后期种子的发芽率和染菌率。在紫苏苗长出以厉,培养条件的不同会使紫苏生长的速度有很人不同。1材料与方法1.1试验材料紫苏种子从淘宝网店购买,经证实可以发芽。75%(体积分数,下同)乙醇、1.0g/L升汞、1()%双氧水和5().()g/L次氯酸钠3种药品作为消毒剂。选粒饱满、颜色正常和大小基本一致的健康紫苏种子作为试验材料。1.2试验方法

6、基金项H:大学生创新创业实验计划作者简介:袁月(1992-),男,本科通信联系人:梁彦龙(1977-),男,副教授,生物工程.liangyl@jlu.edu.cn121无菌苗的获得本实验共使用3种药品作为消毒剂,在种了消毒Z前都要使用温水浸泡30s。使用升汞时分为12个处理,先将120()粒种子分为3份,分别使用75%酒精处理Os,10s,20s,然后每一份中分别使用升汞消毒Imin,5min,lOmin,15min;使用10%双氧水时分为5个处理,将500粒种子分别使川10%双氧水处理lmin,5min,lOniin,1

7、5min,20min;使Jlj50.0g/L次氯酸钠消毒吋分为5个处理,分别消毒lOmin,15min,20min,25min,30mino每个处理消毒后使用无菌水冲洗4次,每次时间不少于3min。在超净工作台上接种于MS培养基上,25°C下培育。每个处理需要重复三次。1.2.2无菌苗牛长的嚴适条件选取种子100粒,使用75%乙1椁表面处理3min,再使用l.Og/L处理10min,将种子置于1000lx光照之下,共分为5组,温度分别为22,24,26,28,30。重复3次试验。记录每组冇一半以上发芽所需时间。1.2.3数

8、据处理当种子胚根长到4mm左右时视为发芽,每24h记录1次发芽情况,发芽结束后统计发芽起始时间、发芽率和污染率。发芽率=(Nl/100)xl00%;污染率=(N2/100)x100^利用三次实验的平均发芽率和污染率作为最终结果。同样当种子胚根长到右视为发芽,每24h记录一次发芽情况,每种试验均有20粒种

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