自体骨髓间充质干细胞移植治疗脑梗死

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万方数据自体骨髓间充质干细胞移植治疗脑梗死：6个月随访★孟宪国1，朱士文2，高华2，李义召2，时庆3，侯怀水3，李栋3-—●一IIII——_————_-——__————_●-———●——___———-—_-——————————-_—_—_Treatmentofcerebralinfarctionusingautologousmarrowmesenchymalstemcellstransplantation：Asix-monthfollow-upMengXian．gu01，ZhuShi-wen2。GaoHua2．LiYi-zha02，ShiQin93，HouHuai—shui3，LiDon93’DepartmentofRehabiiitationMedicine．JinanCampusofShandongMedicalCollege．Jinan250002．ShandongProvince．China；‘DepartmentofNeurology,ShandongDisabledRehabilitationCenter,Jinan2500017，ShandongProvince，China；‘LowTemperatureLaboratory,OiluHospitalofShandongUniversity,Jinan250012，ShandongProvince，ChinaMengXian-guo★．Master,Attendingphysician。Lecturer,DepartmentofRehabilitationMedicine，JinanCampusofShandongMediceICollege。Jinan250002．ShandongProvince，Chinamxgsdcn@163．conlReceived：2009-0掀Accepted：2009-05-121山东医学高等专科学校康复医学系，山东省济南市250002；2山东省残疾人康复中心神经内科，山东省济南市250017：3山东大学齐鲁医院低温试验室，山东省济南市250012孟宪国★，女，1973年生，山东省枣庄市人，汉族，2003年山东大学医学院毕业，硕士，主治医师，讲师，主要从事神经系统疾病康复方面的研究。mX9sdcn@163．com中图分类号：R394．2文献标识码：B文章编％-：1673-8225(2009)32-06374-05收稿日期：2009-03-02修回日期：2009-05-12(20090212027／7_8’zl6374AbstractOBJECTIVE：Toobservethecurativeeffectandsafetyofautologousmarrowmesenchymalstemcells(MSCs)transplantationontreatingcerebralinfarction．METHODS：TOtally120cerebra|InfarctionpatientsenrolledattheQiluHospitalofShandongUniversityfromJune2003toJune2008wascollected．anddiagnosedasischemicstrokeaccordingtothediagnosisstandardpublishedonthecollectionofNationalFourthCerebraIVascularDiseaseConfefence．Al|patientsweredividedintocontrol，stemcelImobilization．stemcelItransplantation，andcombinedtreatmentgroups，with30casesineachgroup．IntheControlgrouppatientsweretreatedwithroutinemedicationandrehabilitationtraining．Patientsinthestemcellmobilizationgroupwerereceived150PgfllgrastimatabdominaIsubcutaneousjnjectionaswelIastheroutinemedication．InthestemcelJtransplantationgroup，patientswereveintransplantedf16．2—51．3)x105MSCsbasedontheroutinemedication．1ntheCombinedtreatmentgroup，theabovemethodsDe怖rmedsimultaneously．RESULTS：Comparedtothecontrolgroup，scodngwithFugl—Meyer(FMA)andFunctionIndependenceMeasure(FIM)wasobviousimprovedintheothergroupsattheweeks4，12andmonths6aftertreatment(P<0．05orP<0．01)，especiallyinthecombinedtreatmentgroup．thecurativeeffectofwhichwassuperiortostemcelImobilizationandstemcelItransplantationgroups(P<0．05)．Within14daysaftertreatment．noadverseeffectappearedinthestemcelImobilizationgroup；4patientshadfevetinthestemcelItransplantationgroup．withbodytemperaturebeIow38℃andreturnedtoanormaJIeveafter24hours，3patientssufferedmildheadacheandreleasedafter24hourswithouttreatment；inthecombinedtreatmentgroup．4patientshadfeverwithbodytemperaturebelow38℃andraturnedtoanormaIIeveIafter24hours，3patientssufferedmildheadacheandreleasedafter24hourswithouttreatment．CoNCLUSl0N：MSCstransplantationobtainsanexcellentcurativeeffectontreatingcerebraIInfarction，andtheadversee竹eccsarefewMengXG。ZhuSW，GaoH．LiYZ，ShiQ．HouHS，LiD．Treatmentofcerebralinfarctionusingautologousmarrowmesenchymalstemcellstransplantation：Asix—monthfollow．up．ZhongguoZuzhiGongchengYanjiuyuLinchuangKangfu．2009；13(32)：6374—6378．【http：／／www．cRer．cnhttp：Hen．zglckf．com】摘要目的：观察骨髓问充质干细胞移植治疗脑梗死的l临床疗效和安伞性。方法：本院2003—06／2008—06收治的脑梗死患者120例，均符合1995年全国第四届脑血管病会议制定的诊断标准，随机分为4组：对照组、单纯干细胞动员组、单纯干细胞移植组、联合组，30例，组。对照组采用常规药物治疗与康复训练；单纯干细胞动员组在对照组治疗的基础上，给予重组人粒细胞集落刺激凶子150闪腹部皮下注射；单纯干细胞移植组在对照组治疗的基础上，经静脉移植自体骨髓间允质干细胞(16．2-51．3)x108；联合组综合上述3组方法进行治疗。结果：①与对照组比较，治疗后4周、12周、6个月单纯干细胞动员组、单纯干细胞移植组、联合组Fugl·Meyer运动功能评分、功能独立性评定量表评分均显著好转(P<0．05或P<0．01)：且联合组治疗效果最佳，疗效明显优于单纯于细胞动员组、单纯干细胞移植组(P<0．05)。②治疗后14d内，单纯干细胞动员组未发现任何不良反应；单纯干细胞移植组发热4例，体温均在38℃以下，月．24h后体温恢复正常，轻微头痛3例，未行治疗24h后缓解；联合组发热5例，体温均在38℃以下，且24h后体温恢复IF常，轻微头痛3例，未行治疗24h后缓解。结论：骨髓间充质十细胞移植治疗脑梗死近期疗效明显，不良反应较少。关键词：骨髓间充质干细胞；移植；脑梗死doi：10．3969／j．issn．1673．8225。2009．32．036孟宪国，朱士文，高华，李义召，时庆，侯怀水。李栋．自体骨髓间充质干细胞移植治疗脑梗死：6个月随访【J】．中国组织工程研究与临床康复，2009，13(32)：6374-6378．【http：／／www。citer．orghttp：l／cn．zglcld．Gom】0引言目前除了超急性期溶栓治疗有可能挽救濒死的脑组织外，其余的治疗措施都不能修复或逆转已坏死的脑组织，更不能促进神经细胞再生。然而由于发病时间难以掌握、适应证的限制以及并发症的发生，真正能实施溶栓治疗并取得良好疗效的比例并不高。脑梗死患者在康复后往往有不同程度的偏瘫、偏身感觉障碍及偏盲等，如何促进梗死区内神经细胞再生是促进患者神经系统各项功能改善乃至完全恢复的关键，而干细胞移植治疗则有可能成为解决这一难题的有效方法111圳。P0．Box1200,Shenyang110004cn．zglckf．com 万方数据孟宪国。等i良律骨髓阚危磕于镪泡移植治疗酸攫死：6个再髓访《蕈疋7易2一明矾。憎骨髓间充质干细胞来源于中胚层，作为一种多潜能干细胞，对中枢神经系统缺血损伤或创伤等造成的功能缺失治疗作用显著，具有明显优点【16-38]：获取方便，可从患者本人骨髓取材；可在体外快速培养扩增，并定向诱导分化；在宿主脑组织中可长期生存并进行整合：避开了免疫排斥的难题等；不涉及伦理道德问题；可通过血脑屏障；容易导入和表达外源性基因，是细胞治疗和基因治疗的理想种子细胞。大量动物实验已证实，骨髓间充质干细胞经脑实质内移植、血液内移植和脑脊液内移植后，均可到达病损部位，并分化成神经干细胞、成熟神经元和胶质细胞，能安全和有效地改善中枢神经损伤后的功能恢复lz-24J。自2003-06以来，本院与齐鲁医院脐血库联合开展自体骨髓问充质干细胞移植治疗脑梗死，取得了较为显著的效果。1对象和方法设计：临床实验。对象：本院2003—06(2008—06收治的脑梗死患者120例，男78例，女42例，年龄28-66岁，均符合1995年全国第四届脑血管病会议制定的诊断标澍列J，并经头颅CT或MRI检查确诊，均为首次发病6周内、病情稳定的患者。排除标准：患有恶性肿瘤、有严重的心肺功能及肝肾功能不全、感染等不能完成研究内容和不能配合调查者。120例患者随机分为4组：对照组、单纯干细胞动员组、单纯干细胞移植组、联合组，30例，组，各组患者的年龄、性别构成比、临床病情及治疗时间等差异均无显著性意义(尸>0．05)，具有可比性，见表1。￡一{表1各组患者的摹线资料分析Table1Analysisofbaselinedataofpatientsineachgroup(n=30)·TimefromGenderParelyzeGroupAge(yr)onsetto————‘陀al：emMaleFemaleLeftRightd()Control529",-8．320．5+2．920101416Stemcell53．3+8．821．3±2．82191218mobilizationStemcell52．7+7．921．4+3．219111317transplantationCombined53．1±8．122．7：t：3。1181215treatment治疗方法：对照组：采用常规药物治疗，包括应用脑保护剂(如胞二磷胆碱、脑蛋白水解物等静滴10d，疗程)、改善微fSSN1673-8225CN21．1539／RCODE～：ZLKHAH循环(丹参注射液等静滴10cI，疗程)、抗血小板药物(阿司匹林100mg／d)、他汀类药物(辛伐他汀40mg／d)等。同时在康复治疗师的指导下及早进行常规康复训练，包括良肢位摆放，以Bobath疗法为主的肢体各关节的被动及主动运动、床上翻身和坐起训练、站立和行走训练、日常生活活动能力训练等，45min／次，2次／d，6次／周，8周为1个疗程。单纯干细胞动员组：在对照组治疗的基础上，给予重组人粒细胞集落刺激因子150Ug，腹部皮下注射，1次，d，10d为1个疗程。每2d检查外周血白细胞计数1次，使外周血白细胞计数控制在(30—40)×10一周。单纯干细胞移植组：在对照组治疗的基础上，在患者及家属同意并签署手术协议书后，行骨髓穿刺，采集自体骨髓血222-580mL(平均406mL)，分离提取骨髓血有核细胞(16．2-51．3)x10s(-平均29．7x105)经静脉途径一次性注射。有核细胞分离方法：把采集骨髓转移到分离袋中，按骨髓液容量4：1加入分离用HES，静置25min，收集富含有核细胞层，2000r，min离心去除上清，生理盐水洗涤2遍，加入150-200mL生理盐水稀释有核细胞并计数。联合组：综合上述3组方法进行治疗。检测指标：分别在治疗前和治疗后4周、12周、6个月，采用Fugl—Meyer运动功能评分标准评定患者的运动功能，采用功能独立性评定量表评定患者的日常生活活动能力；于治疗后1，2，3，4，5，7，14d观察不良反应。所有评定均由相同的2位康复医师共同完成。FugI-Meyer运动功能评分标准：O分：无运动；1分：部分运动；2分：正常运动。运动评分<50为严重运动障碍，50-84分为明显运动障碍，85-95分为中度运动障碍，96-100分为轻度运动障碍。功能独立性评定量表评分标准：最高分为126分(运动功能评分91分，认知功能评分35分)，最低分为18分。126分为完全独立，108-125分为基本独立，90-107分为有条件的独立或极轻度依赖，72-89分为轻度依赖，54—71分为中度依赖，36-53分为重度依赖，19-35分为极重度依赖，18分为完全依赖。独立(活动中不需他人帮助)：完全独立(7分)：构成活动的所有作业均能规范、完全地完成，不需修改和辅助设备或用品，并在合理的时间内完成。有条件的独立具有下列一项或几项(6分)：活动中需要辅助设备；活动需要比』F常长的时间；或有安全方面的考虑。6375 万方数据孟宪西．等。自体嚣髓黼充瑷f缎匏穆植治疗赫梗死：5个月髓访依赖(为进行活动，患者需要另一个人予以监护或身体的接触性帮助，或不进行活动)：有条件的依赖：患者付出50％或更多的努力，其所需的辅助水平如下：①监护和准备(5分)：患者所需的帮助只限于备用、提示或劝告，帮助者和患者之间没有身体的接触或帮助者仅需要帮助准备必需用品；或帮助带上矫形器。②少最身体接触的帮助(4分)：患者所需的帮助只限于轻轻接触，自己能付出75％或以上的努力。③中度身体接触的帮助(3分)：患者需要中度的帮助，自己能付出50％-75％的努力。完全依赖：患者需要一半以卜的帮助或完全依赖他人，否则活动就不能进行。①大量身体接触的帮助(2分)：患者付出的努力小十50％，但大于25％。②完全依赖(1分)：患者付出的努力小于25％。统计学分析：由第一作者采用SPSS10．O软件包进行统计处理，计量资料以娃s表示，治疗前后及组间比较行方差分析，各等级分组资料使用Ridit分析，P<0．05为差异有显著性意义。2结果2．1自体骨髓间充质干细胞移植治疗的，陆床效果治疗前各组患者Fugl—Meyer运动功能评分、功能独立性评定量表评分比较差异无显著性意义(P>0．05)。与对照组比较，治疗后4周、12周、6个月单纯干细胞动员组、单纯干细胞移植组、联合组Fugl—Meyer运动功能评分、功能独立性评定量表评分均显著好转(P<0．05或P<0．01)；且联合组治疗效果最佳，疗效明显优于单纯干细胞动员组、单纯干细胞移植组(P<0．05)，见表2，3。表2各组患者治疗前后Fugl-Meyer运动功能评分的比较Table2ComparisonofscoringonFugl-Meyermotorfunctionassessment(x+s，score)orouP嚣三兰兰Control20．6±1．929．3+-3．9|42．4+-5．5|61．6+-8．18Stemcell21．3：1：2．141．9+3．6“51．7+5．3“71．9±7．9=-Stemcell20．5：1：2．245．6+-3．3h58．2±5．5“75．3+7．产transplantationCombined21．2±2．359．5+3．产71．4+5．6”87．3+7．酽Sp《0．05，6P(0．01。VS．priortotreatment；cp《0．05．。P<0．01，VS．controlgroup；。P<0．05．vs．combinedtreatmentgroup6376表3各组患者治疗前后功能独立性评定颦表评分的比较Table3Comparisonofscoringonfunctionindependencemeasurement(i±s，score)G巾印垤P—riorto—t4re秽atment．t佗re≯atmentt．6re秽atment．Control25．1+8336．1+9．2。52．3+-5．5669．5+-11．3bStemcell24．8+-7，646．5+,10．护66．6+5．3“75．7+10．4“Stemcell24．6+-9．448．2+-8．妒68．7+-5．妒78．4±9．9“transplantationCombined25．2+8．16&2+-9．∥81．2+5．∥91．2+,10．4ba。P1篇，年审稿不少于12篇，每篇审稿时间3-5天)，将连任下一届，不能完成相应工作时，下一届将不再被聘任。按照上述条件愿意成为本刊审稿专家者，可登陆http：／／oa．crter．org／zglckf／ch／index．aspx在线申请。RO．Box1200,Shenyang110004cn．zg／ckf．com 自体骨髓间充质干细胞移植治疗脑梗死:6个月随访作者：孟宪国，朱士文，高华，李义召，时庆，侯怀水，李栋，MengXian-guo，ZhuShi-wen，GaoHua，Lizhao，ShiQing，HouHuai-shui，LiDong作者单位：孟宪国,MengXian-guo(山东医学高等专科学校康复医学系,山东省济南市,250002)，朱士文,高华,李义召,ZhuShi-wen,GaoHua,Lizhao(山东省残疾人康复中心神经内科,山东省济南市,250017)，时庆,侯怀水,李栋,ShiQing,HouHuai-shui,LiDong(山东大学齐鲁医院低温试验室,山东省济南市,250012)刊名：中国组织工程研究与临床康复英文刊名：JOURNALOFCLINICALREHABILITATIVETISSUEENGINEERINGRESEARCH年，卷(期)：2009,13(32)被引用次数：12次参考文献(39条)1.EglitisMA;DawsonD;ParkKWTargetingofmarrowderivedastrocytestotheischemicbrain1999(06)2.KopenGC;ProckopDJ;PhinneyDGMarrowstromalcellsmigratethroughoutforebrainandcerebellum,andtheydifferentiateintoastrocytesafterinjectionintoneonatalmousebrains1999(19)3.LiY;ChoppM;ChenJlntrastriataltransplantationofbonemarrownonhematopoieticcellsimprovesfunctionalrecoveryafterstrokeinadultmice[外文期刊]2000(09)4.ChenJ;LiY;ChoppMlntracerebraltransplantationofbonemarrowwithBDNFafterMCAoinrat[外文期刊]2000(05)5.LuD;MahmoodA;WangLAdultbonemarrowstromalcellsadministeredintravenouslytoratsaftertraumaticbraininjurymigratentobrainandimproveneurologicaloutcome[外文期刊]2001(03)6.ChenJ;LiY;WangLTherapeuticbenefitofintravenousadministrationofbonemarrowstromalcellsaftercerebralischemicinrats[外文期刊]2001(04)7.LiY;ChenJ;ChenXGHumanmarrowstromalcelltherapyfortrokeinrat:neurotrophinsandfunctionalrecovery[外文期刊]2002(04)8.ChenX;LiY;WangLIschemicratbrainextractsinducehumanmarrowstromalcellgrowthfactorproduction2002(04)9.LeeJ;KurodaS;ShichinoheHMigrationanddifferentiationofnuclearfluorescence-labeledbonemarrowstromalcellsaftertransplantationintocerebralinfarctandspinalcordinjuryinmice2003(03)10.ChenJ;LiY;KatakowskiMIntravenousbonemarrowstromalcelltherapyreducesapoptosisandpromotesendogenouscellproliferationafterstrokeinfemalerat[外文期刊]2003(06)11.YanoS;KurodaS;ShichinoheHDobonemarrowstromalcellsproliferateaftertransplantationintomicecerebralinfarct?-Adoublelabelingstudy[外文期刊]2005(1-2)12.GaoQ;LiY;ChoppMBonemarrowstromalcellsincreaseastrocytesurvivalviaupregulationofphosphoinositide3-kinase/threonineproteinkinaseandmitogen-activatedproteinkinasekinase/extracellularsignal-regulatedkinasepathwaysandstimulateastrocytetrophicfactorgeneexpressionafteranaerobicinsult[外文期刊]2005(01)13.ShenLH;LiY;ChenJlntracarotidtransplantationofbonemarrowstromalcellsincreasesaxon- myelinremodelingafterstroke[外文期刊]2006(02)14.MajkaMA;Janowska-WieczorekJ;RatajczakKNumerousgrowthfactors,cytokines,andchemokinesaresecretedbyhumanCD34(+)cells,myeloblasts,erythroblasts,andmegakaryoblastsandregulatenormalhematopoiesisinanautocrine/paracrinemanner2001(10)15.ShyuWC;LeeYJ;LiuDDHominggenes,celltherapyandstroke[外文期刊]200616.KurozumiK;NakamuraK;TamiyaTBDNFgene-modifiedmesenchymalstemcellspromotefunctionalrecoveryandreduceinfarctsizeintheratmiddlecerebralarteryocclusionmodel[外文期刊]2004(02)17.lihoshiS;HonmouO;HoukinKAtherapeuticwindowforintravenousadministrationofautologousbonemarrowaftercerebralischemiainadultrats[外文期刊]2004(1-2)18.NomuraT;HonmouO;HaradaKl.V.lnfusionofbrain-derivedneurotrophicfactorgene-modifiedhumanmesenchymalstemcellsprotectsagainstinjuryinacerebralischemiamodelinadultrat[外文期刊]2005(01)19.ZhangZG;ZhangL;TsangWCorrelationofVEGFandangiopoietinexpressionwithdisruptionofblood-brainbarrierandangiogenesisafterfocalcerebralischemia[外文期刊]2002(04)20.ZhangZG;ZhangL;JiangQVEGFenhancesangiogenesisandpromotesblod-brainbarrierleakageintheischemicbrain2000(07)21.KimBT;RaoVL;SailorKAProtectiveeffectsofglialcellline-derivedneurotrophicfactoronhippocampalneuronsaftertraumaticbraininjuryinrats[外文期刊]2001(04)22.ChenQ;LongY;YuanXProtectiveeffectsofbonemarrowstromalcelltransplantationininjuredrodentbraimsynthesisofneurotrophicfactors2005(05)23.AngET;WongPT;MoochhalaSNeuroprotectionassociatedwithrunning:isitaresultofincreasedendogenousneurotrophicfactors?[外文期刊]2003(02)24.HirouchiM;UkaiYCurrentstateondevelopmentofneuroprotectiveagentsforcerebralischemia[外文期刊]2002(02)25.DezawaM;HoshinpM;NabeshimaYMarrowstromalCells:lmplicationsinHealthandDiseaseinthenervoussystem[外文期刊]2005(07)26.lihoshiS;HonmouO;HoukinKAtherapeuticwindowforintravenousadministrationofautologousbonemarrowaftercerebralischemiainadultrats[外文期刊]2004(1-2)27.ShenLH;LiY;ChenJlntracarotidtransplantationofbonemarrowstromalcellsincreasesaxon-myelinremodelingafterstroke[外文期刊]2006(02)28.LiY;MclntoshK;ChenJAllogeneicbonemarrowstromalcellspromoteglial-axonalremodelingwithoutimmunologicsensitizationafterstrokeinrats[外文期刊]2006(02)29.LiY;ChenJ;ZhangCLGliosisandbrainremodelingaftertreatmentofstrokeinratswithmarrowstromalcells2005(03)30.Alvarez-DoladoM;PardalR;Garcia-VerdugoJMFusionofbone-marrow-derivedcellswithPurkinjeneurons,cardiomyocytesandhepatocytes[外文期刊]2003(6961)31.DezawaM;KannoH;HoshinoMSpecificinductionofneuronalcellsfrombonemarrowstromalcells 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